| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 1. 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 RLRs模式识别受体 | 第12-17页 |
| 1.1.1 RLRs简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 RIG-I研究进展 | 第13页 |
| 1.1.3 MDA5 研究进展 | 第13页 |
| 1.1.4 LGP2 研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.5 RLRs识别病毒RNA的机制、特点 | 第14-15页 |
| 1.1.6 RLRs下游相关分子及其激活的下游信号通路 | 第15-17页 |
| 1.2 干扰素的抗病毒途径 | 第17-19页 |
| 1.2.1 干扰素的分类及作用 | 第18页 |
| 1.2.2 鱼类干扰素研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.3 RLRs激活的IFN表达 | 第19页 |
| 1.3 乌鳢弹状病毒（Snakehead fish vesiculovirus, SHVV） | 第19-20页 |
| 1.4 斑马鱼、ZF4 细胞 | 第20页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 1.5.1 本研究的目的 | 第20页 |
| 1.5.2 本研究的意义 | 第20-22页 |
| 2 斑马鱼LGP2 基因克隆、进化分析 | 第22-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 实验用鱼、细胞及病毒 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器及厂家 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 主要溶液及培养基配制 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 cDNA第一条链的合成 | 第23页 |
| 2.2.3 LGP2 基因cDNA片段的合成 | 第23-25页 |
| 2.2.4 LGP2 基因cDNA 3’ 末端扩增 | 第25-27页 |
| 2.2.5 基因cDNA 5’ 末端扩增 | 第27-30页 |
| 2.2.6 生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果和分析 | 第31-46页 |
| 2.3.1 RNA样品的制备和鉴定 | 第31页 |
| 2.3.2 LGP2 基因cDNA全长克隆 | 第31-33页 |
| 2.3.3 LGP2 基因生物信息学分析 | 第33-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-48页 |
| 3 LGP2 蛋白表达和抗体制备 | 第48-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第48页 |
| 3.1.1 实验用鱼、病毒 | 第48页 |
| 3.1.2 主要仪器及厂家 | 第48页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第48页 |
| 3.1.4 主要溶液及培养基配制 | 第48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-49页 |
| 3.2.1 DrLGP2- DEXDc蛋白表达及多克隆抗体制备 | 第48页 |
| 3.2.2 DrLGP2- DEXDc 蛋白表达及多克隆抗体制备 | 第48-49页 |
| 3.2.3 Elisa检测抗体效价 | 第49页 |
| 3.3 实验结果及分析 | 第49-52页 |
| 3.3.1 DrLGP2-DEXDc片段扩增 | 第49-50页 |
| 3.3.2 基因的表达 | 第50-52页 |
| 3.3.3 Elisa检测抗体效价 | 第52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-53页 |
| 4 病毒感染和RLRs途径 | 第53-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.1.1 细胞、病毒 | 第53页 |
| 4.1.2 主要仪器及厂家 | 第53页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第53页 |
| 4.1.4 主要溶液及培养基配制 | 第53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.2.1 SHRV感染ZF-4 实验 | 第53页 |
| 4.2.2 基因表达的定量分析 | 第53-54页 |
| 4.2.3 细胞转染 | 第54页 |
| 4.2.4 Western blot检测蛋白表达 | 第54-55页 |
| 4.3 实验结果和分析 | 第55-62页 |
| 4.3.1 SHRV N蛋白和G蛋白在不同时间在细胞内的表达 | 第55-56页 |
| 4.3.2 SHVV感染对IFN-α和Mx基因表达的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.3 SHVV感染和LGP2、RIG-I、MDA5 基因表达 | 第57-58页 |
| 4.3.4 SHVV感染和LGP2 蛋白表达 | 第58-60页 |
| 4.3.5 细胞总RNA转染ZF-4 后IFN的表达 | 第60-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-64页 |
| 5 结论、创新及不足之处 | 第64-66页 |
| 5.1 结论 | 第64页 |
| 5.2 创新点 | 第64-65页 |
| 5.3 不足之处 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 硕士期间发表论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
