| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1.1 乳腺 | 第14-17页 |
| 1.1.1 乳腺发育及其结构 | 第14页 |
| 1.1.2 乳腺泌乳机制 | 第14-15页 |
| 1.1.2.1 乳的生成 | 第14-15页 |
| 1.1.2.2 乳的分泌 | 第15页 |
| 1.1.3 乳腺免疫 | 第15-17页 |
| 1.1.3.1 乳腺健康调节的研究 | 第16页 |
| 1.1.3.2 乳腺固有免疫调节的信号通路 | 第16-17页 |
| 1.1.4 乳腺的作用 | 第17页 |
| 1.2 乳腺上皮细胞的研究 | 第17-20页 |
| 1.2.1 乳腺上皮细胞生长特性与形态学特征 | 第17-18页 |
| 1.2.2 乳腺上皮细胞的凋亡 | 第18-19页 |
| 1.2.3 乳腺上皮细胞系的研究概况 | 第19-20页 |
| 1.2.4 乳腺上皮细胞的应用 | 第20页 |
| 1.3 乳腺发育与泌乳调控 | 第20-27页 |
| 1.3.1 乳腺发育与泌乳调控因素 | 第20-25页 |
| 1.3.1.1 激素对乳腺发育和泌乳的调控作用 | 第21-22页 |
| 1.3.1.2 生长因子及其它细胞因子对乳腺发育和泌乳的调控作用 | 第22页 |
| 1.3.1.3 营养素 | 第22-23页 |
| 1.3.1.4 细胞外基质 | 第23-24页 |
| 1.3.1.5 乳腺发育及泌乳功能基因的作用 | 第24-25页 |
| 1.3.2 乳腺泌乳相关信号通路 | 第25-27页 |
| 1.4 乳腺干细胞/祖细胞 | 第27-28页 |
| 1.5 乳腺上皮细胞的原代培养 | 第28-31页 |
| 1.5.1 细胞来源 | 第28页 |
| 1.5.2 分离培养方法 | 第28-29页 |
| 1.5.3 纯化法 | 第29页 |
| 1.5.4 乳腺上皮细胞的鉴定 | 第29-31页 |
| 第二章 奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞原代培养与鉴定 | 第31-50页 |
| 2.1 材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第31页 |
| 2.1.2 活体材料 | 第31页 |
| 2.1.3 主要试剂与耗材 | 第31-32页 |
| 2.2 方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 组织块贴壁法同时分离奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞方法的建立 | 第32-33页 |
| 2.2.2 乳汁分离法分离奶牛乳腺上皮细胞 | 第33-34页 |
| 2.2.3 奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞的纯度分析 | 第34页 |
| 2.2.4 原代奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞鉴定 | 第34-39页 |
| 2.2.4.1 乳腺上皮细胞特异性分子RT-PCR：检测乳腺上皮细胞中角蛋白8基因、角蛋白18基因和β-酪蛋白基因的存在 | 第34-37页 |
| 2.2.4.2 乳腺上皮细胞和成纤维细胞细胞免疫荧光染色：乳腺上皮细胞中角蛋白7、角蛋白18和β-酪蛋白检测,以及成纤维细胞中波形蛋白和β-酪蛋白检测 | 第37-38页 |
| 2.2.4.3 乳腺上皮细胞和成纤维细胞染色体核型分析 | 第38页 |
| 2.2.4.4 奶牛乳腺成纤维细胞Giemsa染色 | 第38-39页 |
| 2.2.5 原代奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞生物学特性分析 | 第39页 |
| 2.2.5.1 营养要求 | 第39页 |
| 2.2.5.2 生长曲线测定 | 第39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-50页 |
| 2.3.1 原代奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞培养 | 第39-42页 |
| 2.3.1.1 组织块贴壁法同时分离乳腺上皮细胞和成纤维细胞 | 第39-41页 |
| 2.3.1.2 乳汁分离法分离乳腺上皮细胞 | 第41-42页 |
| 2.3.2 奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞的纯度分析 | 第42-43页 |
| 2.3.3 原代培养的奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞鉴定 | 第43-48页 |
| 2.3.3.1 特异性分子RT-PCR鉴定---检测乳腺上皮细胞中角蛋白8基因、角蛋白18基因和β-酪蛋白基因的存在 | 第43-44页 |
| 2.3.3.2 细胞免疫荧光染色鉴定---乳腺上皮细胞中角蛋白7、角蛋白18和β-酪蛋白检测以及成纤维细胞中波形蛋白检测 | 第44-46页 |
| 2.3.3.3 乳腺上皮细胞和成纤维细胞染色体核型分析 | 第46-47页 |
| 2.3.3.4 奶牛乳腺成纤维细胞培养与Giemsa染色 | 第47-48页 |
| 2.3.4 原代培养的奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞生物学特性分析 | 第48-50页 |
| 2.3.4.1 营养要求 | 第48-49页 |
| 2.3.4.2 生长曲线测定 | 第49-50页 |
| 讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第67页 |
