| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1. 引言 | 第11-13页 |
| 2. 试剂和方法 | 第13-27页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第13-19页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第13-14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.3 常用溶液和培养基配方 | 第15-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 CysC目的片段的优化合成和引物探针设计与合成 | 第19页 |
| 2.2.2 PCR扩增CysC的反应体系及反应条件 | 第19页 |
| 2.2.3 PCR产物凝胶电泳及回收 | 第19-20页 |
| 2.2.4 E.coli Top10F’感受态细胞的制备 | 第20页 |
| 2.3 CysC克隆载体的构建 | 第20-22页 |
| 2.3.1 目的片段和pMD18-T载体连接 | 第20-21页 |
| 2.3.2 连接物的转化 | 第21页 |
| 2.3.3 重组克隆质粒的提取及测序 | 第21-22页 |
| 2.3.4 重组克隆质粒的酶切鉴定及凝胶电泳 | 第22页 |
| 2.4. CysC表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.4.1 回收的基因片段和表达载体pET-32a的连接 | 第22-23页 |
| 2.4.2 感受态表达菌株ER2566的制备 | 第23页 |
| 2.5 CysC目的蛋白的表达和鉴定 | 第23-27页 |
| 2.5.1 CysC目的蛋白的小量诱导表达 | 第23-24页 |
| 2.5.2 CysC目的蛋白活性鉴定 | 第24页 |
| 2.5.3 重组Cys C蛋白的纯化与鉴定 | 第24-25页 |
| 2.5.4 间接ELISA检测重组蛋白的抗原反应性 | 第25-26页 |
| 2.5.5 间接ELISA检测重组蛋白的免疫原性 | 第26-27页 |
| 3. 结果 | 第27-33页 |
| 3.1 CysC基因扩增产物的鉴定 | 第27页 |
| 3.2 重组CysC克隆质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| 3.3 重组CysC表达质粒的构建和酶切鉴定 | 第28页 |
| 3.4 CysC重组蛋白的诱导表达 | 第28-29页 |
| 3.5 CysC重组蛋白表达方式鉴定及纯化 | 第29-30页 |
| 3.6 CysC重组蛋白的免疫反应性鉴定 | 第30-31页 |
| 3.7 间接ELISA检测CysC重组蛋白反应灵敏度 | 第31页 |
| 3.8 间接ELISA检测CysC重组蛋白免疫原性 | 第31-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-36页 |
| 5. 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 综述 | 第40-57页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 读研期间发表的论文 | 第57页 |
| 读研期间参与的课题 | 第57-58页 |
| 缩略词对照表 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
