中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
英文缩写词表 | 第6-10页 |
1 绪论 | 第10-22页 |
1.1 国内外研究现状 | 第10-19页 |
1.1.1 TGF-β1 对肝纤维化的影响 | 第12-16页 |
1.1.2 基底硬度对细胞功能的影响 | 第16-18页 |
1.1.3 高通量测序技术 | 第18-19页 |
1.2 问题的提出及研究意义 | 第19-20页 |
1.2.1 问题的提出 | 第19-20页 |
1.2.2 研究意义 | 第20页 |
1.2.3 创新点 | 第20页 |
1.3 研究目的与研究内容 | 第20-21页 |
1.3.1 研究目的 | 第20页 |
1.3.2 研究内容 | 第20-21页 |
1.4 技术路线 | 第21-22页 |
2 硬度可控的基底膜的制备及检测 | 第22-34页 |
2.1 引言 | 第22-23页 |
2.2 实验材料和实验设备 | 第23-24页 |
2.2.1 主要实验细胞 | 第23页 |
2.2.2 主要实验试剂 | 第23页 |
2.2.3 实验设备 | 第23-24页 |
2.2.4 试剂的配制 | 第24页 |
2.3 实验方法 | 第24-28页 |
2.3.1 聚乙烯醇水凝胶基底膜的制备方法 | 第24-25页 |
2.3.2 聚乙烯醇水凝胶弹性模量的测定 | 第25-27页 |
2.3.3 扫描电镜观察PVA水凝胶表面形貌 | 第27页 |
2.3.4 细胞培养 | 第27页 |
2.3.5 细胞凋亡检测方法 | 第27-28页 |
2.4 实验结果 | 第28-33页 |
2.4.1 PVA水凝胶弹性模量的测量结果 | 第28-29页 |
2.4.2 扫描电镜对聚乙烯醇水凝胶基底膜表面形貌的测定结果 | 第29-30页 |
2.4.3 细胞凋亡 | 第30页 |
2.4.4 细胞形态 | 第30-33页 |
2.5 讨论 | 第33-34页 |
3 高通量测序及基因的挖掘 | 第34-47页 |
3.1 引言 | 第34页 |
3.2 材料与方法 | 第34-37页 |
3.2.1 测序样品准备及RNA的提取 | 第34-35页 |
3.2.2 RNA样品质量的检测 | 第35页 |
3.2.3 文库建立及测序 | 第35-37页 |
3.2.4 数据过滤处理 | 第37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-45页 |
3.3.1 RNA-Seq序列数据比对与质控分析 | 第37-39页 |
3.3.2 RNA-Seq差异基因定量分析 | 第39-42页 |
3.3.3 RNA-Seq功能注释 | 第42-44页 |
3.3.4 肝纤维化相关基因挖掘 | 第44-45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
4 基底硬度和TGF-Β1 对肝细胞功能的影响 | 第47-61页 |
4.1 引言 | 第47-48页 |
4.2 实验材料、设备和试剂 | 第48-50页 |
4.2.1 主要实验材料 | 第48-49页 |
4.2.2 实验设备 | 第49页 |
4.2.3 试剂的配制 | 第49-50页 |
4.3 实验方法 | 第50-54页 |
4.3.1 免疫荧光 | 第50页 |
4.3.2 实时荧光定量PCR(RT-PCR) | 第50-51页 |
4.3.3 western blot(蛋白免疫印迹) | 第51-54页 |
4.4 实验结果及分析 | 第54-59页 |
4.4.1 基底硬度和TGF-β1 对肝细胞骨架构象的影响 | 第54-56页 |
4.4.2 基底硬度和TGF-β1 对肝细胞骨架及粘附分子的基因表达水平的测定与分析 | 第56-58页 |
4.4.3 基底硬度和TGF-β1 对肝细胞骨架及粘附分子的蛋白表达水平的测定与分析 | 第58-59页 |
4.5 讨论 | 第59-61页 |
5 结论与展望 | 第61-63页 |
5.1 主要结论 | 第61页 |
5.2 后续工作展望 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-68页 |