| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第16-26页 |
| 1.1 Graves病 | 第16-17页 |
| 1.1.1 Graves病概述 | 第16页 |
| 1.1.2 GD的临床表现和特征 | 第16-17页 |
| 1.1.3 GD的发病机制 | 第17页 |
| 1.2 TSHR | 第17-20页 |
| 1.2.1 TSHR的基因和蛋白结构 | 第18-19页 |
| 1.2.2 TSHR的信号传导 | 第19-20页 |
| 1.2.3 TSHR的组织分布 | 第20页 |
| 1.3 GD小鼠模型 | 第20-22页 |
| 1.3.1 GD的现状 | 第20-21页 |
| 1.3.2 GD动物模型的探索 | 第21-22页 |
| 1.3.3 理想GD动物模型的构建 | 第22页 |
| 1.4 miRNA | 第22-24页 |
| 1.4.1 概述 | 第22-23页 |
| 1.4.2 miRNA的生物合成及生物学功能 | 第23页 |
| 1.4.3 miRNA与自身免疫病 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究的目的、方法、实验设计及意义 | 第24-26页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第24页 |
| 1.5.2 研究方法 | 第24页 |
| 1.5.3 实验设计 | 第24-25页 |
| 1.5.4 意义 | 第25-26页 |
| 第二章 人TSHR289基因重组腺病毒的制备与鉴定 | 第26-44页 |
| 2.1 实验仪器和材料 | 第26-30页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.2 菌种、细胞株及质粒 | 第27页 |
| 2.1.3 材料和试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第27-28页 |
| 2.1.5 相关质粒图谱 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-37页 |
| 2.2.1 电转化E. coli BJ5183感受态菌制备 | 第30-31页 |
| 2.2.2 电转化pAdEasy-1 | 第31页 |
| 2.2.3 化学法制备感受态E. coli BJ5183-p | 第31-32页 |
| 2.2.4 质粒pBlueScript II SK (+)-hTSHR289扩大培养和鉴定 | 第32页 |
| 2.2.5 目的基因hTSHR289的纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.6 pAdTrack-CMV载体的酶切 | 第33页 |
| 2.2.7 目的基因hTSHR289和线性化pAdTrack-CMV载体的连接和鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.8 腺病毒载体的重组和鉴定。 | 第34-36页 |
| 2.2.9 重组腺病毒载体（pAdEasy-GFP-hTSHR289和pAdEasy-GFP-CMV）的包装。 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-42页 |
| 2.3.1 pBluescript II SK(+)-hTSHR289的鉴定 | 第37-39页 |
| 2.3.2 pAdTrack-hTSHR289的构建和鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.3 重组腺病毒质粒载体的构建和鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.4 重组腺病毒pAdEasy-GFP-hTSHR289的包装 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 GD小鼠模型的构建 | 第44-53页 |
| 3.1 实验仪器和材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第44页 |
| 3.1.2 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 重组腺病毒的大量扩增 | 第45-46页 |
| 3.2.2 动物免疫 | 第46页 |
| 3.2.3 组织标本及血清的留取 | 第46-47页 |
| 3.2.4 血清TRAb检测 | 第47-48页 |
| 3.2.5 血清T4检测 | 第48页 |
| 3.2.6 小鼠甲状腺组织的病理学检查 | 第48页 |
| 3.2.7 统计学分析 | 第48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-51页 |
| 3.3.1 TCID50法检测病毒滴度 | 第48页 |
| 3.3.2 血清TRAb（单位U/L）以及T4检测（单位pg/ml） | 第48-50页 |
| 3.3.3 甲状腺组织病理切片检查 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 GD小鼠模型中Tfh细胞比例的变化 | 第53-58页 |
| 4.1 实验仪器和材料 | 第53-54页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第53-54页 |
| 4.1.2 实验材料 | 第54页 |
| 4.1.3 实验动物 | 第54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-55页 |
| 4.2.1 动物模型的构建 | 第54页 |
| 4.2.2 流式细胞仪检测小鼠颈部淋巴结中Tfh细胞比例的变化 | 第54-55页 |
| 4.2.3 流式细胞仪检测小鼠脾脏Tfh细胞比例的变化 | 第55页 |
| 4.2.4 统计学分析 | 第55页 |
| 4.3 实验结果 | 第55-57页 |
| 4.3.1 小鼠颈部淋巴结中Tfh细胞比例的变化 | 第55-56页 |
| 4.3.2 小鼠脾脏Tfh细胞比例的变化 | 第56-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 miR-346对GD小鼠模型的影响 | 第58-64页 |
| 5.1 实验仪器和材料 | 第58-59页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第58页 |
| 5.1.2 实验材料 | 第58-59页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第59页 |
| 5.2 miR-346对GD小鼠的影响 | 第59-60页 |
| 5.2.1 GD小鼠模型的构建 | 第59页 |
| 5.2.2 miR-346对GD小鼠的干预 | 第59-60页 |
| 5.2.3 检测血清中TRAb和T4水平 | 第60页 |
| 5.2.4 流式细胞仪检测小鼠淋巴结中Tfh细胞 | 第60页 |
| 5.2.5 统计学分析 | 第60页 |
| 5.3 实验结果 | 第60-62页 |
| 5.3.1 miR-346对GD小鼠血清TRAb和T4的影响 | 第60-61页 |
| 5.3.2 miR-346对GD小鼠淋巴结中Tfh的影响 | 第61-62页 |
| 5.4 讨论 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第82页 |
