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转录因子WblI对变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)抗生素合成调控作用机制的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略词第8-10页
第一章 文献综述第10-18页
    1 链霉菌(Streptomyces)和变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)的介绍第10-18页
        1.1 链霉菌形态分化过程第11-12页
        1.2 链霉菌染色质体外遗传物质的功能多样性及线性不稳定性第12-14页
        1.3 链霉菌抗生素的生产第14-16页
        1.4 选题依据第16-18页
第二章 wblI过表达及敲除对变铅青链霉菌抗生素产量的影响第18-42页
    1 实验材料第18-20页
    2 实验方法第20-32页
        2.1 wblI过表达研究第20-29页
        2.2 基因wblI的敲除实验第29-31页
        2.3 wblI过表达及敲除后对孢子形态的影响第31-32页
    3 数据统计分析第32页
    4 实验结果第32-41页
        4.1 变铅青链霉菌总DNA的提取第32-33页
        4.2 wblI过表达对变铅青链霉菌抗生素生产的影响第33-35页
        4.3 wblI敲除对变铅青链霉菌抗生素生产的影响第35-37页
        4.4 ACT孢内孢外含量测定第37-38页
        4.5 生长曲线的测定第38-39页
        4.6 培养基培养观察wblI过表达及敲除后对孢子形态的影响第39页
        4.7 电镜观察wblI过表达及敲除后对孢子形态的影响第39-41页
    5 本章讨论和总结第41-42页
        5.1 本章讨论第41页
        5.2 本章小结第41-42页
第三章 WblI下游调控靶基因的鉴定及功能分析第42-85页
    1 实验材料第42-50页
        1.1 实验材料第42页
        1.2 实验试剂第42-43页
        1.3 实验仪器第43-44页
        1.4 实验主要试剂配制方法第44-50页
    2 实验方法第50-72页
        2.1 变铅青链霉菌总DNA的提取第50-52页
        2.2 DH5α/BL21感受态细胞的制备第52-55页
        2.3 wblI重组表达载体构建第55-57页
        2.4 变铅青链霉菌中WblI蛋白诱导表达第57-60页
        2.5 变铅青链霉菌中WblI蛋白纯化第60-61页
        2.6 染色质标签共沉淀第61-63页
        2.7 DNA单酶切及连接第63页
        2.8 FITC标记调控区序列第63-67页
        2.9 目的蛋白浓缩第67页
        2.10 非变性凝胶电泳第67-68页
        2.11 过表达及敲除wblI对靶基因的调控作用分析第68-72页
    3 数据统计分析第72页
    4 实验结果第72-80页
        4.1 目的基因编码区PCR扩增结果第72-73页
        4.2 菌落PCR筛选阳性克隆电泳检测结果第73页
        4.3 wblI的DNA全序列和蛋白结构图第73-74页
        4.4 目的蛋白WblI的纯化结果第74-75页
        4.5 靶基因的分离鉴定第75页
        4.6 EMSA最佳DNA浓度的鉴定第75-77页
        4.7 WblI结合目标DNA序列保守基序分析第77-78页
        4.8 变铅青链霉菌总RNA的提取结果第78页
        4.9 WblI过表达及敲除后靶基因的定量分析结果第78-80页
    5 本章讨论与小结第80-85页
        5.1 本章讨论第80-84页
        5.2 本章小结第84-85页
全文总结第85-86页
参考文献第86-97页
发表论文情况第97-98页
致谢第98页

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