摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1 链霉菌(Streptomyces)和变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)的介绍 | 第10-18页 |
1.1 链霉菌形态分化过程 | 第11-12页 |
1.2 链霉菌染色质体外遗传物质的功能多样性及线性不稳定性 | 第12-14页 |
1.3 链霉菌抗生素的生产 | 第14-16页 |
1.4 选题依据 | 第16-18页 |
第二章 wblI过表达及敲除对变铅青链霉菌抗生素产量的影响 | 第18-42页 |
1 实验材料 | 第18-20页 |
2 实验方法 | 第20-32页 |
2.1 wblI过表达研究 | 第20-29页 |
2.2 基因wblI的敲除实验 | 第29-31页 |
2.3 wblI过表达及敲除后对孢子形态的影响 | 第31-32页 |
3 数据统计分析 | 第32页 |
4 实验结果 | 第32-41页 |
4.1 变铅青链霉菌总DNA的提取 | 第32-33页 |
4.2 wblI过表达对变铅青链霉菌抗生素生产的影响 | 第33-35页 |
4.3 wblI敲除对变铅青链霉菌抗生素生产的影响 | 第35-37页 |
4.4 ACT孢内孢外含量测定 | 第37-38页 |
4.5 生长曲线的测定 | 第38-39页 |
4.6 培养基培养观察wblI过表达及敲除后对孢子形态的影响 | 第39页 |
4.7 电镜观察wblI过表达及敲除后对孢子形态的影响 | 第39-41页 |
5 本章讨论和总结 | 第41-42页 |
5.1 本章讨论 | 第41页 |
5.2 本章小结 | 第41-42页 |
第三章 WblI下游调控靶基因的鉴定及功能分析 | 第42-85页 |
1 实验材料 | 第42-50页 |
1.1 实验材料 | 第42页 |
1.2 实验试剂 | 第42-43页 |
1.3 实验仪器 | 第43-44页 |
1.4 实验主要试剂配制方法 | 第44-50页 |
2 实验方法 | 第50-72页 |
2.1 变铅青链霉菌总DNA的提取 | 第50-52页 |
2.2 DH5α/BL21感受态细胞的制备 | 第52-55页 |
2.3 wblI重组表达载体构建 | 第55-57页 |
2.4 变铅青链霉菌中WblI蛋白诱导表达 | 第57-60页 |
2.5 变铅青链霉菌中WblI蛋白纯化 | 第60-61页 |
2.6 染色质标签共沉淀 | 第61-63页 |
2.7 DNA单酶切及连接 | 第63页 |
2.8 FITC标记调控区序列 | 第63-67页 |
2.9 目的蛋白浓缩 | 第67页 |
2.10 非变性凝胶电泳 | 第67-68页 |
2.11 过表达及敲除wblI对靶基因的调控作用分析 | 第68-72页 |
3 数据统计分析 | 第72页 |
4 实验结果 | 第72-80页 |
4.1 目的基因编码区PCR扩增结果 | 第72-73页 |
4.2 菌落PCR筛选阳性克隆电泳检测结果 | 第73页 |
4.3 wblI的DNA全序列和蛋白结构图 | 第73-74页 |
4.4 目的蛋白WblI的纯化结果 | 第74-75页 |
4.5 靶基因的分离鉴定 | 第75页 |
4.6 EMSA最佳DNA浓度的鉴定 | 第75-77页 |
4.7 WblI结合目标DNA序列保守基序分析 | 第77-78页 |
4.8 变铅青链霉菌总RNA的提取结果 | 第78页 |
4.9 WblI过表达及敲除后靶基因的定量分析结果 | 第78-80页 |
5 本章讨论与小结 | 第80-85页 |
5.1 本章讨论 | 第80-84页 |
5.2 本章小结 | 第84-85页 |
全文总结 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-97页 |
发表论文情况 | 第97-98页 |
致谢 | 第98页 |