| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 英文缩略词对照表 | 第9-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-34页 |
| 1.1 溶酶体、晚期胞内体生成机制概述 | 第11-29页 |
| 1.1.1 溶酶体概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 胞内体概述 | 第12页 |
| 1.1.3 溶酶体功能 | 第12-16页 |
| 1.1.4 溶酶体与疾病 | 第16-25页 |
| 1.1.5 溶酶体、晚期胞内体生成机制 | 第25-29页 |
| 1.2 Atg蛋白的研究进展 | 第29-34页 |
| 1.2.1 Atg蛋白的分类 | 第29-33页 |
| 1.2.2 Atg5蛋白的功能研究 | 第33-34页 |
| 第2章 材料与方法 | 第34-51页 |
| 2.1 试剂与抗体 | 第34-35页 |
| 2.1.1 抗体 | 第34页 |
| 2.1.2 试剂 | 第34-35页 |
| 2.2 细胞培养 | 第35-36页 |
| 2.3 细胞电转 | 第36页 |
| 2.4 Lentivirus病毒构建以及感染 | 第36-39页 |
| 2.5 质粒、Si RNA、Sh RNA信息 | 第39页 |
| 2.6 活细胞成像 | 第39页 |
| 2.7 细胞内吞囊泡提取 | 第39-40页 |
| 2.8 免疫荧光染色 | 第40-42页 |
| 2.9 透射电镜 | 第42页 |
| 2.10 显微镜图像分析 | 第42页 |
| 2.11 蛋白免疫印迹 | 第42-44页 |
| 2.12 RNA提纯及反转录PCR | 第44-46页 |
| 2.13 表达质粒构建 | 第46-48页 |
| 2.14 单克隆稳定表达细胞系构建 | 第48-49页 |
| 2.15 胆固醇含量检测 | 第49-51页 |
| 第3章 Atg5缺失导致晚期胞内体和溶酶体再生缺陷 | 第51-59页 |
| 3.1 本章引论 | 第51页 |
| 3.2 实验结果 | 第51-58页 |
| 3.2.1 Atg5~(-/-) MEF细胞LPOs大小、数量和分布发生改变 | 第51-53页 |
| 3.2.2 导入外源Atg5至Atg5~(-/-) MEF细胞中LPOs大小、数量和分布恢复正常 | 第53-56页 |
| 3.2.3 Atg5敲低的大鼠肾上皮细胞（ NRK）中LPOs数量、大小和分布改变 | 第56-58页 |
| 3.3 本章讨论与小结 | 第58-59页 |
| 第4章 Atg5以非自吞噬依赖的方式调控晚期胞内体和溶酶体再生 | 第59-68页 |
| 4.1 本章引论 | 第59-60页 |
| 4.2 实验结果 | 第60-67页 |
| 4.2.1 Atg7稳定敲低NRK细胞中晚期胞内体与溶酶体数量、大小和分布未见明显改变 | 第60-62页 |
| 4.2.2 Atg9稳定敲低NRK细胞中晚期胞内体与溶酶体数量、大小和分布未见明显改变 | 第62-64页 |
| 4.2.3 Atg12稳定敲低NRK细胞中晚期胞内体与溶酶体数量、大小和分布未见明显改变 | 第64-67页 |
| 4.3 本章讨论与小结 | 第67-68页 |
| 第5章 Atg5缺失将导致晚期胞内体和溶酶体再生停留在杂交体 | 第68-79页 |
| 5.1 本章引论 | 第68-69页 |
| 5.2 实验结果 | 第69-78页 |
| 5.2.1 利用不同标记物可以显示WT MEF细胞中晚期胞内体、溶酶体和杂交体 | 第69-72页 |
| 5.2.2 在Atg5~(-/-) MEF细胞中缺少晚期胞内体 | 第72-73页 |
| 5.2.3 在Atg5~(-/-) MEF细胞中LPOs是晚期胞内体 -溶酶体的杂交体 | 第73-78页 |
| 5.3 本章讨论与小结 | 第78-79页 |
| 第6章 Atg5缺失导致晚期胞内体长管及长管调节的分裂过程受损 | 第79-84页 |
| 6.1 本章引论 | 第79页 |
| 6.2 实验结果 | 第79-83页 |
| 6.2.1 Atg5缺失导致晚期胞内体长管和长管调控的分裂过程受损 | 第79-81页 |
| 6.2.2 新生成的LPOs来源于晚期胞内体 -溶酶体的杂交体 | 第81-82页 |
| 6.2.3 新生成的LPOs可与早期胞内体融合 | 第82-83页 |
| 6.3 本章讨论与小结 | 第83-84页 |
| 第7章 Atg5缺失导致晚期胞内体成分从杂交体中分离障碍 | 第84-88页 |
| 7.1 本章引论 | 第84页 |
| 7.2 实验结果 | 第84-87页 |
| 7.2.1 SNX1在Atg5缺失细胞中形成增大的点状结构 | 第84-86页 |
| 7.2.2 Atg5缺失导致由Retromer调控的晚期胞内体成分从杂交体分离过程障碍 | 第86-87页 |
| 7.3 本章讨论与小结 | 第87-88页 |
| 第8章 Atg5缺失导致杂交体膜上V1-ATPase定位障碍 | 第88-93页 |
| 8.1 本章引论 | 第88-89页 |
| 8.2 实验结果 | 第89-92页 |
| 8.2.1 Atg5缺失导致V-ATPase V1招募到杂交体上数量减少 | 第89-90页 |
| 8.2.2 降低LPOs上V-ATPase V1含量将导致LPOs再生异常 | 第90-92页 |
| 8.3 本章讨论与小结 | 第92-93页 |
| 第9章 降低细胞内pH将会修复受损的晚期胞内体/溶酶体再生过程 | 第93-96页 |
| 9.1 本章引论 | 第93页 |
| 9.2 实验结果 | 第93-95页 |
| 9.2.1 降低细胞内p H将修复受损的晚期胞内体 /溶酶体再生过程 | 第93-95页 |
| 9.3 本章讨论与小结 | 第95-96页 |
| 第10章 Atg5缺失造成细胞中杂交体胆固醇含量降低 | 第96-101页 |
| 10.1 本章引论 | 第96页 |
| 10.2 实验结果 | 第96-100页 |
| 10.2.1 Atg5缺失导致胞内杂交体胆固醇含量降低 | 第96-97页 |
| 10.2.2 降低WT MEF细胞中胆固醇含量影响LPOs的大小、数量和分布 | 第97-98页 |
| 10.2.3 降低WT MEF细胞中胆固醇含量影响V1-ATPase分布情况 | 第98-100页 |
| 10.3 本章讨论与小结 | 第100-101页 |
| 第11章 胆固醇可修复Atg5缺失细胞中V-ATPase定位和LPOs表型 | 第101-105页 |
| 11.1 本章引论 | 第101页 |
| 11.2 实验结果 | 第101-104页 |
| 11.2.1 增加Atg5~(-/-) MEF细胞中胆固醇含量将修复LPOs的表型 | 第101-103页 |
| 11.2.2 增加Atg5~(-/-) MEF细胞中胆固醇含量将修复V-ATPase的定位 | 第103-104页 |
| 11.3 本章讨论与小结 | 第104-105页 |
| 第12章 讨论与展望 | 第105-111页 |
| 12.1 结论 | 第105-107页 |
| 12.2 讨论 | 第107-111页 |
| 参考文献 | 第111-118页 |
| 致谢 | 第118-120页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第120页 |
