| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第8-35页 |
| 1.1 非洲爪蛙是经典的模式生物 | 第8-13页 |
| 1.1.1 非洲爪蛙是研究胚胎发育的理想模式生物 | 第8-9页 |
| 1.1.2 非洲爪蛙的胚胎发育过程 | 第9-13页 |
| 1.2 爪蛙的胚层分化 | 第13-19页 |
| 1.2.1 非洲爪蛙胚层分化概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 调控爪蛙早期发育的主要母源性因子 | 第14-16页 |
| 1.2.3 爪蛙胚层分化的调控机制 | 第16-19页 |
| 1.3 MBT与细胞响应信号能力的获得 | 第19-21页 |
| 1.3.1 MBT | 第19-20页 |
| 1.3.2 细胞响应信号的能力 | 第20-21页 |
| 1.4 爪蛙早期胚胎发育过程中的TGFβ 信号 | 第21-29页 |
| 1.4.1 TGFβ 信号通路概述 | 第21-23页 |
| 1.4.2 Nodal/Activin信号通路 | 第23-26页 |
| 1.4.3 BMP信号通路 | 第26-29页 |
| 1.5 R-Smad的磷酸化与去磷酸化调控 | 第29-31页 |
| 1.5.1 R-Smad C末端的磷酸化与去磷酸化调控 | 第30页 |
| 1.5.2 R-Smad linker区域的磷酸化与去磷酸化调控 | 第30-31页 |
| 1.6 磷酸酶与SCP3蛋白 | 第31-33页 |
| 1.6.1 磷酸酶概述 | 第31-33页 |
| 1.6.2 SCP3蛋白 | 第33页 |
| 1.7 本课题的研究目的及意义 | 第33-35页 |
| 第2章 材料与方法 | 第35-50页 |
| 2.1 实验设备及材料 | 第35-41页 |
| 2.1.1 仪器设备 | 第35页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 2.1.3 溶液配方 | 第36-37页 |
| 2.1.4 序列信息 | 第37-41页 |
| 2.2 分子与生化实验方法 | 第41-44页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第41-42页 |
| 2.2.2 RNA提取 | 第42页 |
| 2.2.3 逆转录 | 第42-43页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第43页 |
| 2.2.5 荧光报告基因检测 | 第43页 |
| 2.2.6 Western Blotting | 第43-44页 |
| 2.3 爪蛙胚胎实验方法 | 第44-48页 |
| 2.3.1 爪蛙胚胎受精与培养 | 第44页 |
| 2.3.2 动植物半球细胞分离 | 第44-45页 |
| 2.3.3 显微注射 | 第45页 |
| 2.3.4 体外转录 | 第45-46页 |
| 2.3.5 原位杂交探针的制备 | 第46-47页 |
| 2.3.6 原位杂交 | 第47-48页 |
| 2.3.7 动物帽实验 | 第48页 |
| 2.4 细胞实验方法 | 第48-50页 |
| 2.4.1 细胞培养与蛋白处理 | 第48-49页 |
| 2.4.2 转染 | 第49-50页 |
| 第3章 非洲爪蛙卵裂期胚胎动植物半球转录本的差异分析 | 第50-59页 |
| 3.1 利用RNA-seq技术分析非洲爪蛙动植物半球转录本的差异 | 第50-55页 |
| 3.2 差异转录本的进一步确定 | 第55-56页 |
| 3.3 差异转录本的初步功能分析 | 第56-57页 |
| 3.4 本章总结 | 第57-59页 |
| 第4章 SCP3调控爪蛙胚胎的胚层分化 | 第59-69页 |
| 4.1 SCP3在爪蛙胚胎早期发育过程中的时空表达模式 | 第59-62页 |
| 4.2 SCP3是爪蛙胚胎早期发育的必需因子 | 第62-68页 |
| 4.2.1 scp3 MO有效性验证 | 第62页 |
| 4.2.2 SCP3是爪蛙胚胎早期发育的必需因子 | 第62-65页 |
| 4.2.3 SCP3调控爪蛙胚胎的胚层分化 | 第65-68页 |
| 4.3 本章总结 | 第68-69页 |
| 第5章 SCP3通过去磷酸化R-Smad的linker区域正调控Nodal/Activin和BMP信号 | 第69-82页 |
| 5.1 SCP3通过调控Nodal/Activin和BMP信号发挥作用 | 第69-72页 |
| 5.2 SCP3通过去磷酸化R-Smad的linker区域正调控Nodal/Activin和BMP信号 | 第72-81页 |
| 5.2.1 SCP3在爪蛙早期胚胎里发挥作用依赖于磷酸酶活性 | 第72-75页 |
| 5.2.2 SCP3通过R-Smad调控Nodal/Activin和BMP信号 | 第75-76页 |
| 5.2.3 SCP3通过去磷酸化R-Smad linker区域调控Nodal/Activin和BMP信号 | 第76-78页 |
| 5.2.4 SCP3通过去磷酸化R-Smad的linker区域进而调控胚胎对Nodal/ Activin和BMP信号的响应能力 | 第78-81页 |
| 5.3 本章总结 | 第81-82页 |
| 第6章 在哺乳动物细胞中SCP3正调控Nodal/Activin和BMP信号 | 第82-87页 |
| 6.1 SCP3正调控Nodal/Activin和BMP信号 | 第82-84页 |
| 6.1.1 SCP3 siRNA有效性和特异性验证 | 第82-83页 |
| 6.1.2 SCP3在人细胞系中正调控Nodal/Activin和BMP信号 | 第83-84页 |
| 6.2 SCP3通过去磷酸化R-Smad的linker区域调控Nodal/Activin和BMP信号 | 第84-86页 |
| 6.3 本章总结 | 第86-87页 |
| 第7章 讨论与展望 | 第87-94页 |
| 7.1 结论 | 第87页 |
| 7.2 讨论 | 第87-91页 |
| 7.2.1 SCP3通过去磷酸化R-Smad linker区域正调控TGFβ 信号 | 第87-89页 |
| 7.2.2 SCP3在预定的时间和空间赋予胚胎响应信号的能力 | 第89-91页 |
| 7.3 展望 | 第91-94页 |
| 7.3.1 是谁启动了SCP3的去磷酸化功能 | 第91页 |
| 7.3.2 磷酸酶与激酶的对抗与协调 | 第91-92页 |
| 7.3.3 其它SCP蛋白在爪蛙早期胚胎发育的功能 | 第92-93页 |
| 7.3.4 爪蛙动植物半球差异转录本的进一步研究 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第108页 |
