中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-12页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 壳聚糖修饰的丝素蛋白支架材料与hADSCs生物相容性的研究 | 第14-19页 |
1 材料和方法 | 第14-16页 |
1.1 材料 | 第14-15页 |
1.1.1 主要试剂和仪器 | 第14-15页 |
1.2 实验方法 | 第15-16页 |
1.2.1 hADSCs的分离、培养 | 第15页 |
1.2.2 hADSCs的鉴定 | 第15页 |
1.2.3 改性丝素蛋白支架材料的处理及电镜观察 | 第15-16页 |
1.2.4 MTT法检测hADSCs在CS/SF上的粘附与增殖 | 第16页 |
1.2.5 hADSCs-CS/SF成脂诱导后光镜、电镜观察 | 第16页 |
2 数据处理 | 第16页 |
3 结果 | 第16-18页 |
3.1 hADSCs的分离及培养 | 第16-17页 |
3.2 hADSCs的鉴定 | 第17页 |
3.3 CS/SF支架的扫描电镜观察 | 第17页 |
3.4 MTT法检测hADSCs在CS/SF上的粘附与增殖 | 第17页 |
3.5 hADSCs-CS/SF成脂诱导在CS/SF支架上的生长状况及扫描电镜观察 | 第17-18页 |
4 讨论 | 第18-19页 |
第二部分 VEGF165基因修饰的hADSCs与改性丝素蛋白支架材料体外构建组织工程脂肪的研究 | 第19-25页 |
1 材料和方法 | 第19-21页 |
1.1 材料 | 第19-20页 |
1.1.1 主要试剂和仪器 | 第19-20页 |
1.2 实验方法 | 第20-21页 |
1.2.1 hADSCs的分离、培养及鉴定 | 第20页 |
1.2.2 慢病毒感染hADSCs | 第20页 |
1.2.3 慢病毒感染hADSCs后成脂诱导 | 第20页 |
1.2.4 MTT法检测慢病毒感染后hADSCs在支架材料上的增殖 | 第20页 |
1.2.5 慢病毒感染的hADSCs在支架材料上成脂诱导 | 第20-21页 |
1.2.6 RT-PCR检测成脂特异性基因PPARγ-2的表达 | 第21页 |
2 统计学分析 | 第21页 |
3 结果 | 第21-23页 |
3.1 慢病毒感染hADSCs | 第21-22页 |
3.2 慢病毒感染hADSCs后成脂诱导 | 第22页 |
3.2.1 倒置显微镜观察 | 第22页 |
3.2.2 油红O染色 | 第22页 |
3.3 MTT法检测慢病毒感染的hADSCs在支架材料上的增殖 | 第22页 |
3.4 慢病毒感染的hADSCs在支架材料上成脂诱导 | 第22-23页 |
3.4.1 油红O染色 | 第22页 |
3.4.2 RT-PCR | 第22-23页 |
4 讨论 | 第23-25页 |
第三部分 VEGF165基因修饰的hADSCs与改性丝素蛋白体内构建血管化组织工程脂肪的研究 | 第25-31页 |
1 材料和方法 | 第25-27页 |
1.1 材料 | 第25-26页 |
1.1.1 主要试剂和仪器 | 第25-26页 |
1.2 方法 | 第26-27页 |
1.2.1 hADSCs的分离、培养及鉴定 | 第26页 |
1.2.2 慢病毒感染人脂肪间充质干细胞 | 第26页 |
1.2.3 支架材料的处理 | 第26页 |
1.2.4 细胞与支架材料的复合培养及成脂诱导 | 第26页 |
1.2.5 CM-DIL标记细胞 | 第26页 |
1.2.6 细胞-支架材料复合物移植 | 第26页 |
1.2.7 移植物观察 | 第26-27页 |
1.2.8 免疫印迹法检测VEGF165、PPARγ-2蛋白 | 第27页 |
2 统计学分析 | 第27页 |
3 结果 | 第27-29页 |
3.1 CM-DIL标记的细胞-支架复合物 | 第27页 |
3.2 移植物大体观察 | 第27-28页 |
3.3 移植物组织学观察 | 第28页 |
3.3.1 荧光显微镜下观察 | 第28页 |
3.3.2 油红O-HE染色 | 第28页 |
3.3.3 HE染色 | 第28页 |
3.3.4 扫描电镜 | 第28页 |
3.4 移植物中VEGF165、PPAR γ-2蛋白的表达 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-31页 |
结论 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-35页 |
综述 | 第35-41页 |
参考文献 | 第39-41页 |
在学期间的研究成果 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
附图 | 第43-52页 |