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刺槐翻译控制肿瘤蛋白基因Rpf41在共生结瘤过程中的功能研究

中文摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 文献综述第11-18页
    1.1 植物和微生物之间的共生第11页
    1.2 豆科植物与根瘤菌的共生第11-15页
        1.2.1 豆科植物根瘤形成的过程第11-12页
        1.2.2 定型根瘤和不定型根瘤第12-14页
        1.2.3 豆科植物结瘤分子机制第14-15页
    1.3 翻译控制肿瘤蛋白第15-16页
    1.4 植物基因功能研究技术第16页
    1.5 刺槐与根瘤菌共生固氮的研究现状第16-17页
    1.6 技术路线第17-18页
第二章 Rpf41基因CDNA末端的快速扩增(RACE)第18-29页
    2.1 引言第18页
    2.2 材料、试剂和仪器第18页
        2.2.1 实验材料及载体第18页
        2.2.2 实验试剂第18页
        2.2.3 实验仪器第18页
    2.3 实验方法第18-23页
        2.3.1 刺槐根总RNA的提取及基因组DNA的去除第18-20页
        2.3.2 候选基因的cDNA末端快速扩增(RACE)第20-21页
        2.3.3 目的片段胶回收第21-22页
        2.3.4 目的片段连接T载体及转化大肠杆菌第22页
        2.3.5 菌落PCR检测目的片段的连接情况第22页
        2.3.6 质粒的提取第22-23页
        2.3.7 全长的获得及序列分析第23页
        2.3.8 TCTP蛋白序列的一致性和相似性分析第23页
    2.4 结果与分析第23-26页
        2.4.1 总RNA提取及基因组DNA的去除结果第23-24页
        2.4.2 RACE反应结果第24-26页
    2.5 Rpf41序列分析第26-28页
    2.6 讨论第28-29页
第三章 Rpf41基因亚细胞定位第29-35页
    3.1 引言第29页
    3.2 实验材料、仪器第29页
        3.2.1 实验材料第29页
        3.2.2 实验仪器第29页
    3.3 实验方法第29-32页
        3.3.1 亚细胞定位载体的构建第29-31页
        3.3.2 基因枪转化洋葱表皮细胞第31-32页
    3.4 结果与分析第32-34页
        3.4.1Rpf41亚细胞定位载体的构建第32-33页
        3.4.2 Rpf41亚细胞定位结果与分析第33-34页
    3.5 讨论第34-35页
第四章 Rpf41基因的RNA沉默与过表达第35-60页
    4.1 引言第35页
    4.2 实验材料、试剂和仪器第35页
        4.2.1 实验材料第35页
        4.2.2 试剂与配方第35页
        4.2.3 实验仪器第35页
    4.3 实验方法第35-42页
        4.3.1RNAi载体的构建第35-37页
        4.3.2 过量表达载体的构建第37-38页
        4.3.3 重组质粒电转化发根农杆菌K599第38页
        4.3.4 刺槐的转化体系第38-39页
        4.3.5 实验结果鉴定第39-42页
    4.4 结果与分析第42-58页
        4.4.1 目的基因的扩增结果第42-43页
        4.4.2 RNA沉默载体的构建第43页
        4.4.3 过量表达载体的构建第43页
        4.4.4 转化苗植株表型检测第43-47页
        4.4.5 刺槐根部提取的总RNA质量检测第47-48页
        4.4.6 干扰及过表达效率检测第48-51页
        4.4.7 转化苗植株表型及根瘤的形态第51-55页
        4.4.8 根瘤显微形态观测第55-58页
    4.5 讨论第58-60页
第五章 结论第60-61页
参考文献第61-68页
附录第68-72页
致谢第72-73页
作者简介第73页

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