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一种新的基于FRET技术和流式细胞分析的细胞凋亡诱导剂药物筛选系统

中文摘要第7-8页
Abstract第8-9页
第一章 前言第10-14页
第二章 实验方法第14-29页
    1. 探针及其相关克隆的构建第14-20页
        1.1 通用荧光表达载体的改造第16-17页
        1.2 多色荧光蛋白真核表达载体的构建第17-20页
        1.3 真核表达克隆质粒的大量制备第20页
    2. 三色FRET流式细胞仪系统的搭建第20-25页
        2.1 流式细胞仪系统第20-21页
        2.2 所用荧光蛋白的性质以及流式细胞系统的硬件搭建第21-23页
        2.3 三色FRET流式系统各个荧光信号之间的补偿调节第23-25页
    3. 三色FRET流式细胞仪检测系统的凋亡诱导药物检测实验第25-27页
        3.1 凋亡诱导用药物性质第25页
        3.2 不同细胞凋亡诱导剂作用下的FRET检测第25-27页
    4. 相关抑制剂对检测结果的验证实验第27-29页
        4.1 Casp-2活性抑制剂对CDDP细胞凋亡诱导中FRET变化的回复实验第27-28页
        4.2 Casp-8抑制剂对RGD-TRAIL细胞凋亡诱导中FRET变化的回复实验第28-29页
第三章 实验结果第29-38页
    1. 构建成功克隆质粒的大量制备结果及其质量分析第29页
    2. 三色流式细胞系统的搭建结果及分析第29-32页
    3. 细胞凋亡诱导的三色FRET检测结果及分析第32-34页
    4.抑制剂对凋亡诱导FRET变化回复实验测定结果及分析第34-38页
第四章 讨论第38-40页
第五章 综述第40-50页
    第一节 荧光蛋白的发现、发展及运用第40-44页
        一. 荧光蛋白的发现第40页
        二. 荧光蛋白的结构特性第40-42页
        三. 荧光蛋白的运用第42-44页
    第二节 荧光共振能量转移技术(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)第44-50页
        一. 荧光共振能量转移技术原理第44-45页
        二. FRET技术在生物科学中的运用第45-48页
        三. FRET技术运用的挑战与展望第48-50页
参考文献第50-56页
附录第56-63页
    A 实验材料第56页
    B 细菌培养基第56页
    C 仪器设备第56-57页
    D 实验操作技术第57-63页
致谢第63-64页

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