中文摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第10-14页 |
第二章 实验方法 | 第14-29页 |
1. 探针及其相关克隆的构建 | 第14-20页 |
1.1 通用荧光表达载体的改造 | 第16-17页 |
1.2 多色荧光蛋白真核表达载体的构建 | 第17-20页 |
1.3 真核表达克隆质粒的大量制备 | 第20页 |
2. 三色FRET流式细胞仪系统的搭建 | 第20-25页 |
2.1 流式细胞仪系统 | 第20-21页 |
2.2 所用荧光蛋白的性质以及流式细胞系统的硬件搭建 | 第21-23页 |
2.3 三色FRET流式系统各个荧光信号之间的补偿调节 | 第23-25页 |
3. 三色FRET流式细胞仪检测系统的凋亡诱导药物检测实验 | 第25-27页 |
3.1 凋亡诱导用药物性质 | 第25页 |
3.2 不同细胞凋亡诱导剂作用下的FRET检测 | 第25-27页 |
4. 相关抑制剂对检测结果的验证实验 | 第27-29页 |
4.1 Casp-2活性抑制剂对CDDP细胞凋亡诱导中FRET变化的回复实验 | 第27-28页 |
4.2 Casp-8抑制剂对RGD-TRAIL细胞凋亡诱导中FRET变化的回复实验 | 第28-29页 |
第三章 实验结果 | 第29-38页 |
1. 构建成功克隆质粒的大量制备结果及其质量分析 | 第29页 |
2. 三色流式细胞系统的搭建结果及分析 | 第29-32页 |
3. 细胞凋亡诱导的三色FRET检测结果及分析 | 第32-34页 |
4.抑制剂对凋亡诱导FRET变化回复实验测定结果及分析 | 第34-38页 |
第四章 讨论 | 第38-40页 |
第五章 综述 | 第40-50页 |
第一节 荧光蛋白的发现、发展及运用 | 第40-44页 |
一. 荧光蛋白的发现 | 第40页 |
二. 荧光蛋白的结构特性 | 第40-42页 |
三. 荧光蛋白的运用 | 第42-44页 |
第二节 荧光共振能量转移技术(Fluorescence resonance energy transfer,FRET) | 第44-50页 |
一. 荧光共振能量转移技术原理 | 第44-45页 |
二. FRET技术在生物科学中的运用 | 第45-48页 |
三. FRET技术运用的挑战与展望 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
附录 | 第56-63页 |
A 实验材料 | 第56页 |
B 细菌培养基 | 第56页 |
C 仪器设备 | 第56-57页 |
D 实验操作技术 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |