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非达霉素菌株选育及发酵条件优化

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 绪论第10-15页
    1.1 研究背景第10页
    1.2 非达霉素的生物合成途径第10-12页
    1.3 非达霉素菌种选育研究第12页
    1.4 非达霉素的发酵工艺研究第12页
    1.5 本课题研究目的、意义及研究内容第12-15页
2 菌株SIIA-A2098的鉴定第15-22页
    2.1 材料第15-16页
        2.1.1 菌株第15页
        2.1.2 培养基第15页
        2.1.3 主要试剂第15-16页
        2.1.4 主要仪器第16页
    2.2 实验方法第16-18页
        2.2.1 表观特征第16-17页
        2.2.2 生理生化特征第17页
        2.2.3 菌株系统发育树的建立第17-18页
    2.3 结果与讨论第18-21页
        2.3.1 菌株SIIA-A2098的培养特征第18页
        2.3.2 菌株SIIA-A2098的形态鉴定第18-19页
        2.3.3 菌株SIIA-A2098的生理生化特征第19-20页
        2.3.4 16S rDNA序列测定结果第20页
        2.3.5 16S rDNA分析及系统进化树建立第20-21页
    2.4 本章小结第21-22页
3 非达霉素高产菌株选育第22-42页
    3.1 引言第22-23页
    3.2 材料第23-25页
        3.2.1 菌株第23页
        3.2.2 培养基第23页
        3.2.3 主要试剂第23-24页
        3.2.4 主要仪器第24页
        3.2.5 缓冲液第24-25页
    3.3 实验方法第25-31页
        3.3.1 非达霉素分析方法的确定第25页
        3.3.2 单菌丝体悬液的制备第25页
        3.3.3 氮离子注入诱变筛选高产突变株第25-26页
        3.3.4 链霉素和红霉素抗性突变株的筛选第26-27页
        3.3.5 Genome shuffling(基因组重排)育种第27-28页
        3.3.6 Tn5转座子插入筛选高产突变株第28-30页
        3.3.7 高产菌株培养特征及遗传稳定性第30-31页
    3.4 结果与讨论第31-41页
        3.4.1 非达霉素的标准曲线绘制第31页
        3.4.2 氮离子诱变结果第31-32页
        3.4.3 链霉素和红霉素抗性突变株的筛选结果第32-35页
        3.4.4 Genome shuffling(基因组重排)筛选结果第35-37页
        3.4.5 Tn5转座子插入筛选高产突变株的筛选结果第37-40页
        3.4.6 高产菌株培养特征及遗传稳定性第40-41页
    3.5 本章小结第41-42页
4 非达霉素高产突变株发酵工艺优化第42-65页
    4.1 引言第42页
    4.2 材料第42-44页
        4.2.1 菌株第42页
        4.2.2 培养基第42页
        4.2.3 主要试剂第42-43页
        4.2.4 主要仪器第43-44页
    4.3 实验方法第44-48页
        4.3.1 分析方法第44-45页
        4.3.2 突变株SIIA-10L-2 发酵条件的优化第45-46页
        4.3.3 突变株SIIA-10L-2 发酵培养基的单因素筛选第46页
        4.3.4 突变株SIIA-10L-2 发酵培养基响应面优化第46-48页
        4.3.5 突变株SIIA-10L-2 发酵培养基非显著性因素的最适浓度考察第48页
    4.4 结果与讨论第48-64页
        4.4.1 突变株SIIA-10L-2 发酵条件优化结果第48-52页
        4.4.2 突变株SIIA-10L-2 发酵培养基单因素优化结果第52-56页
        4.4.3 突变株SIIA-10L-2 发酵培养基响应面优化结果第56-61页
        4.4.4 突变株SIIA-10L-2 非显著性因素最适浓度考察结果第61-64页
    4.5 本章小结第64-65页
5 非达霉素高产菌株高产机理分析第65-75页
    5.1 引言第65页
    5.2 材料第65-67页
        5.2.1 菌株第65页
        5.2.2 培养基第65-66页
        5.2.3 主要试剂第66页
        5.2.4 主要设备第66-67页
    5.3 方法第67-69页
        5.3.1 基因组DNA的提取和纯化第67页
        5.3.2 rpsL基因序列和rsmG基因序列的PCR扩增及序列比对第67-69页
    5.4 结果与讨论第69-73页
        5.4.1 基因组DNA的提取第69页
        5.4.2 基因序列PCR扩增结果第69-70页
        5.4.3 扩增片段TA克隆、测序及结果分析第70-73页
    5.5 本章小节第73-75页
结论第75-76页
参考文献第76-80页
附录A 试剂盒操作方法第80-83页
攻读硕士学位期间发表论文及科研成果第83-84页
致谢第84-85页
综述 非达霉素的研究进展第85-93页
    参考文献第92-93页

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