| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| 1.1 研究背景及意义 | 第12-18页 |
| 1.1.1 止血和血栓的机理 | 第12-14页 |
| 1.1.2 血小板与血管性血友病因子VWF | 第14-16页 |
| 1.1.3 胶原及其受体 | 第16-18页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第18-22页 |
| 1.2.1 VWF-A1A2A3与血小板的相互作用 | 第18-19页 |
| 1.2.2 胶原与血小板的相互作用 | 第19-20页 |
| 1.2.3 血小板活化表达P-选择素 | 第20-22页 |
| 1.3 本课题研究思路 | 第22-25页 |
| 1.3.1 科学问题的提出 | 第22-23页 |
| 1.3.2 论文研究的主要内容 | 第23-24页 |
| 1.3.3 论文的结构安排 | 第24-25页 |
| 第二章 重组蛋白VWF-A1A2A3的表达及纯化 | 第25-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.1.1 细胞与质粒 | 第25-26页 |
| 2.1.2 试剂与材料 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第27-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-38页 |
| 2.2.1 质粒的转化及克隆 | 第29-30页 |
| 2.2.2 质粒的提取及基因测序 | 第30-31页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第31-34页 |
| 2.2.4 质粒的稳定转染与表达细胞的获得 | 第34页 |
| 2.2.5 VWF-A1A2A3蛋白的表达和纯化 | 第34-36页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE鉴定蛋白的纯度 | 第36-37页 |
| 2.2.7 Westen Blot鉴定蛋白特异性 | 第37页 |
| 2.2.8 BCA试剂盒测蛋白浓度 | 第37-38页 |
| 2.3 实验结果 | 第38-42页 |
| 2.3.1 VWF-A1A2A3质粒的浓度和测序 | 第38-39页 |
| 2.3.2 VWF-A1A2A3表达结果2.3.3 VWF-A1A2A3蛋白纯化结果 | 第39-40页 |
| 2.3.3 VWF-A1A2A3 蛋白纯化结果 | 第40-42页 |
| 2.3.4 VWF-A1A2A3蛋白的浓度 | 第42页 |
| 2.4 分析讨论 | 第42-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 胶原、VWF-A1A2A3介导血小板黏附的功能鉴定 | 第44-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-47页 |
| 3.1.1 蛋白与血小板 | 第44页 |
| 3.1.2 主要试剂与材料 | 第44页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第44-47页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 孵育蛋白分子 | 第47-48页 |
| 3.2.2 血小板的提取 | 第48-49页 |
| 3.2.3 血小板与底板蛋白分子的黏附 | 第49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-53页 |
| 3.3.1 蛋白分子与血小板的特异性黏附 | 第49-51页 |
| 3.3.2 比较不同剪应力、不同蛋白分子介导的血小板黏附 | 第51-53页 |
| 3.4 分析讨论 | 第53-54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 流体剪应力下血小板表面P-选择素的表达 | 第55-65页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 蛋白与血小板 | 第55页 |
| 4.1.2 主要试剂与材料 | 第55页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第55-56页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 4.2.1 孵育蛋白分子 | 第56页 |
| 4.2.2 血小板的提取 | 第56-57页 |
| 4.2.3 胶原、VWF-A1A2A3介导血小板表面表达P-选择素 | 第57-58页 |
| 4.2.4 血小板P-选择素表达相关物理量的定义和测量 | 第58页 |
| 4.3 实验结果 | 第58-62页 |
| 4.3.1 力触发由胶原、VWF-A1A2A3介导的血小板激活和P-选择素的表达，其激活比率具有力依赖性 | 第58-60页 |
| 4.3.2 不同兴奋剂调控血小板表达P-选择素的达峰时间 | 第60页 |
| 4.3.3 流体剪应力对血小板表面P-选择素表达水平的影响 | 第60-62页 |
| 4.4 分析与讨论 | 第62-64页 |
| 4.5 本章小结 | 第64-65页 |
| 总结与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 | 第73-76页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附件 | 第78页 |
