| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第14-26页 |
| 1.1 黄瓜花叶病毒生物学特性的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.1.1 黄瓜花叶病毒的传播途径及病害分布 | 第14页 |
| 1.1.2 黄瓜花叶病毒分类地位 | 第14-15页 |
| 1.1.3 黄瓜花叶病毒的基因组结构及编码蛋白 | 第15-17页 |
| 1.2 植物光合作用 | 第17-20页 |
| 1.2.1 光合作用的光反应与暗反应 | 第17页 |
| 1.2.2 光系统 | 第17-18页 |
| 1.2.3 植物光合作用有关的几种重要蛋白质 | 第18-20页 |
| 1.3 植物病毒与寄主互作对植物症状的影响 | 第20-21页 |
| 1.4 研究蛋白互作的方法 | 第21-23页 |
| 1.4.1 酵母双杂交技术 | 第21-22页 |
| 1.4.2 免疫共沉淀技术 | 第22页 |
| 1.4.3 双分子荧光互补技术 | 第22-23页 |
| 1.5 基因功能的研究 | 第23-24页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 2 试验材料与方法 | 第26-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 菌种与质粒的来源及用途 | 第26页 |
| 2.1.3 实验常用培养基和抗生素 | 第26-27页 |
| 2.1.4 酶、试剂盒和其他常用化学试剂 | 第27页 |
| 2.1.5 实验相关引物 | 第27-28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-36页 |
| 2.2.1 植物种植条件 | 第28页 |
| 2.2.2 CMV接种缓冲液的配制和摩擦接种 | 第28-29页 |
| 2.2.3 植物叶片RNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.4 RNA的反转录 | 第29-30页 |
| 2.2.5 聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因 | 第30页 |
| 2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| 2.2.7 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 | 第30页 |
| 2.2.8 限制性内切酶切割DNA片段 | 第30-31页 |
| 2.2.9 含有相同黏性末端的目的基因与质粒的连接反应 | 第31页 |
| 2.2.10 大肠杆菌DH5α电转感受态细胞制备及转化 | 第31-32页 |
| 2.2.11 农杆菌EHA105电转感受态细胞制备及转化 | 第32-33页 |
| 2.2.12 大肠杆菌中质粒的提取方法 | 第33-34页 |
| 2.2.13 酵母菌NMY51感受态细胞的制备及转化 | 第34-35页 |
| 2.2.14 农杆菌注射菌液的活化培养与注射 | 第35页 |
| 2.2.15 激光共聚焦显微镜使用参数 | 第35页 |
| 2.2.16 生物信息学分析软件及网站 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-49页 |
| 3.1 候选光合作用相关基因与CMV CP互作的验证 | 第36-41页 |
| 3.1.1 酵母双杂交实验验证 | 第36-38页 |
| 3.1.2 双分子荧光互补实验(BIFC)验证 | 第38-41页 |
| 3.1.3 互作验证小结 | 第41页 |
| 3.2 CMV CP分段验证互作并模拟三维结构 | 第41-49页 |
| 3.2.1 BIFC分段验证CMV CP与基因完整ORF的互作情况 | 第41-46页 |
| 3.2.2 同源建模软件模拟蛋白三维结构 | 第46-48页 |
| 3.2.3 CMV CP分段验证互作小结 | 第48-49页 |
| 4 讨论与结论 | 第49-52页 |
| 4.1 讨论 | 第49-50页 |
| 4.1.1 与CMV CP互作的光反应相关蛋白 | 第49-50页 |
| 4.1.2 与CMV CP互作的暗反应相关蛋白 | 第50页 |
| 4.2 结论 | 第50-51页 |
| 4.3 下一步工作计划 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-66页 |
| 附录一 酵母双杂交结果 | 第66-68页 |
| 附录二 本研究涉及的相关溶液及配制方法 | 第68-69页 |
| 附录三 本研究使用的主要试剂主要仪器 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第72页 |
