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黄瓜花叶病毒外壳蛋白与番茄光合作用相关蛋白的互作研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
1 前言第14-26页
    1.1 黄瓜花叶病毒生物学特性的研究进展第14-17页
        1.1.1 黄瓜花叶病毒的传播途径及病害分布第14页
        1.1.2 黄瓜花叶病毒分类地位第14-15页
        1.1.3 黄瓜花叶病毒的基因组结构及编码蛋白第15-17页
    1.2 植物光合作用第17-20页
        1.2.1 光合作用的光反应与暗反应第17页
        1.2.2 光系统第17-18页
        1.2.3 植物光合作用有关的几种重要蛋白质第18-20页
    1.3 植物病毒与寄主互作对植物症状的影响第20-21页
    1.4 研究蛋白互作的方法第21-23页
        1.4.1 酵母双杂交技术第21-22页
        1.4.2 免疫共沉淀技术第22页
        1.4.3 双分子荧光互补技术第22-23页
    1.5 基因功能的研究第23-24页
    1.6 研究的目的与意义第24-26页
2 试验材料与方法第26-36页
    2.1 试验材料第26-28页
        2.1.1 植物材料第26页
        2.1.2 菌种与质粒的来源及用途第26页
        2.1.3 实验常用培养基和抗生素第26-27页
        2.1.4 酶、试剂盒和其他常用化学试剂第27页
        2.1.5 实验相关引物第27-28页
    2.2 试验方法第28-36页
        2.2.1 植物种植条件第28页
        2.2.2 CMV接种缓冲液的配制和摩擦接种第28-29页
        2.2.3 植物叶片RNA的提取第29页
        2.2.4 RNA的反转录第29-30页
        2.2.5 聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因第30页
        2.2.6 琼脂糖凝胶电泳第30页
        2.2.7 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段第30页
        2.2.8 限制性内切酶切割DNA片段第30-31页
        2.2.9 含有相同黏性末端的目的基因与质粒的连接反应第31页
        2.2.10 大肠杆菌DH5α电转感受态细胞制备及转化第31-32页
        2.2.11 农杆菌EHA105电转感受态细胞制备及转化第32-33页
        2.2.12 大肠杆菌中质粒的提取方法第33-34页
        2.2.13 酵母菌NMY51感受态细胞的制备及转化第34-35页
        2.2.14 农杆菌注射菌液的活化培养与注射第35页
        2.2.15 激光共聚焦显微镜使用参数第35页
        2.2.16 生物信息学分析软件及网站第35-36页
3 结果与分析第36-49页
    3.1 候选光合作用相关基因与CMV CP互作的验证第36-41页
        3.1.1 酵母双杂交实验验证第36-38页
        3.1.2 双分子荧光互补实验(BIFC)验证第38-41页
        3.1.3 互作验证小结第41页
    3.2 CMV CP分段验证互作并模拟三维结构第41-49页
        3.2.1 BIFC分段验证CMV CP与基因完整ORF的互作情况第41-46页
        3.2.2 同源建模软件模拟蛋白三维结构第46-48页
        3.2.3 CMV CP分段验证互作小结第48-49页
4 讨论与结论第49-52页
    4.1 讨论第49-50页
        4.1.1 与CMV CP互作的光反应相关蛋白第49-50页
        4.1.2 与CMV CP互作的暗反应相关蛋白第50页
    4.2 结论第50-51页
    4.3 下一步工作计划第51-52页
参考文献第52-66页
附录一 酵母双杂交结果第66-68页
附录二 本研究涉及的相关溶液及配制方法第68-69页
附录三 本研究使用的主要试剂主要仪器第69-70页
致谢第70-72页
攻读学位期间发表论文情况第72页

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