| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第12-17页 |
| 第一章 GDF11抗体的特异性检测 | 第17-26页 |
| 1. 材料与仪器 | 第17-18页 |
| 1.1 试剂材料 | 第17-18页 |
| 1.2 仪器设备 | 第18页 |
| 2. 方法 | 第18-21页 |
| 2.1 人源GDF11与GDF8氨基酸序列比对 | 第18页 |
| 2.2 GDF11抗体特异性检测 | 第18-20页 |
| 2.2.1 Western blot方法中溶液配制 | 第18-19页 |
| 2.2.2 SDS-PAGE电泳 | 第19页 |
| 2.2.3 Western blot | 第19-20页 |
| 2.3 探索ELISA检测GDF11含量方法 | 第20-21页 |
| 2.3.1 制备生物素(Biotin)标记GDF11抗体 | 第20-21页 |
| 2.3.2 ELISA方法标准曲线的制备 | 第21页 |
| 3. 结果 | 第21-23页 |
| 3.1 人源GDF11与GDF8氨基酸序列比对图 | 第21-22页 |
| 3.2 SDS-PAGE结果 | 第22页 |
| 3.3 GDF11抗体特异性检测结果 | 第22-23页 |
| 3.4 探索ELISA方法检测GDF11/8含量绘制标准曲线结果 | 第23页 |
| 4. 讨论 | 第23-25页 |
| 5. 小结 | 第25-26页 |
| 第二章 人血浆中GDF11、CCL11蛋白水平的检测 | 第26-32页 |
| 1. 试剂与仪器 | 第26-27页 |
| 1.1 试剂 | 第26页 |
| 1.2 仪器 | 第26页 |
| 1.3 溶液配制 | 第26-27页 |
| 2. 方法 | 第27-29页 |
| 2.1 样本采集及保存 | 第27页 |
| 2.2 Human GDF11/BMP11 ELISA | 第27-28页 |
| 2.3 Human CCL11/Eotaxin ELISA | 第28-29页 |
| 3. 实验结果 | 第29-31页 |
| 3.1 单人份血浆中GDF11蛋白水平差异结果 | 第29页 |
| 3.2 血浆中CCL11蛋白水平差异结果 | 第29-31页 |
| 4. 讨论 | 第31页 |
| 5. 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 GDF11对小鼠海马神经细胞HT22、神经干细胞C17.2增殖分化的影响 | 第32-51页 |
| 1. 材料与仪器 | 第32-34页 |
| 1.1 实验细胞 | 第32页 |
| 1.2 试剂材料 | 第32-33页 |
| 1.3 仪器设备 | 第33-34页 |
| 2. 方法 | 第34-42页 |
| 2.1 溶液配制 | 第34-35页 |
| 2.1.1 细胞培养液与冻存液 | 第34页 |
| 2.1.2 Western blot相关溶液配制 | 第34-35页 |
| 2.2 方法 | 第35-42页 |
| 2.2.1 细胞的复苏、培养、传代与冻存 | 第35页 |
| 2.2.2 细胞计数 | 第35-36页 |
| 2.2.3 细胞免疫荧光法检测HT22细胞凋亡与坏死 | 第36页 |
| 2.2.4 CCK8法检测细胞活力 | 第36页 |
| 2.2.5 qRT-PCR检测增殖分化相关基因mRNA水平变化 | 第36-39页 |
| 2.2.6 Western blot检测信号相关蛋白的磷酸化水平 | 第39-42页 |
| 2.2.7 细胞划痕损伤 | 第42页 |
| 2.2.8 统计学处理 | 第42页 |
| 3. 结果 | 第42-49页 |
| 3.1 HT22细胞形态及免疫荧光法测定凋亡与坏死情况 | 第42-44页 |
| 3.2 GDF11对细胞活力的影响 | 第44页 |
| 3.2.1 增强型CCK8检测细胞活力标准曲线的制备 | 第44页 |
| 3.2.2 增强型CCK8检测细胞活力结果 | 第44页 |
| 3.3 GDF11对HT22细胞迁移的影响 | 第44-45页 |
| 3.4 GDF11对细胞增殖分化相关基因mRNA水平表达的影响 | 第45-47页 |
| 3.4.1 GDF11对HT22细胞增殖分化相关基因mRNA水平表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.2 GDF11对C17.2细胞增殖分化相关基因mRNA水平表达的影响 | 第46-47页 |
| 3.5 GDF11对Smad2/3与CREB蛋白磷酸化的影响 | 第47-49页 |
| 3.5.1 BCA法标准曲线 | 第47-48页 |
| 3.5.2 GDF11对Smad2/3与CBER蛋白磷酸化的影响 | 第48-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-50页 |
| 5. 小结 | 第50-51页 |
| 本课题研究成果及课题后续设计 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录Ⅰ 英文缩略词表 | 第57-58页 |
| 附录Ⅱ 硕士期间发表论文 | 第58-59页 |
| 综述 | 第59-72页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
