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中间锦鸡儿CiNAC1基因的克隆与功能分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
缩略语表第11-12页
1 引言第12-21页
    1.1 NAC转录因子研究进展第12-13页
        1.1.1 NAC转录因子的发现第12页
        1.1.2 NAC转录因子的结构第12-13页
    1.2 NAC转录因子的功能第13-18页
        1.2.1 植物细胞次生壁的生成第13-14页
        1.2.2 植物器官边界和分生组织形成第14页
        1.2.3 细胞分裂第14页
        1.2.4 种子萌发第14-15页
        1.2.5 植物侧根发育第15页
        1.2.6 果实的成熟与植株的衰老第15-16页
        1.2.7 NAC转录因子在植物逆境中的作用第16-18页
    1.3 中间锦鸡儿第18-19页
    1.4 研究目的和意义第19页
    1.5 技术路线第19-21页
2 实验材料和方法第21-35页
    2.1 实验材料第21页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 菌种第21页
        2.1.3 质粒第21页
    2.2 实验药品第21-26页
        2.2.1 实验试剂及酶第21页
        2.2.2 试剂盒第21-22页
        2.2.3 引物设计第22-23页
        2.2.4 培养基及所需其他化学试剂的配制第23-26页
    2.3 实验仪器第26页
    2.4 实验方法第26-35页
        2.4.1 植物材料处理方法第26-27页
        2.4.2 植物RNA提取及cDNA的获得第27-28页
        2.4.3 基因表达量的检测第28页
        2.4.4 中间锦鸡儿CiNAC1基因全长cDNA的克隆第28-29页
        2.4.5 目的片段回收第29页
        2.4.6 目的基因与克隆载体的连接第29页
        2.4.7 大肠杆菌感受态的制备与目的片段的转化第29页
        2.4.8 质粒提取第29-30页
        2.4.9 中间锦鸡儿CiNAC1基因序列分析第30页
        2.4.10 中间锦鸡儿CiNAC1基因表达载体的构建第30-31页
        2.4.11 拟南芥的遗传转化第31-32页
        2.4.12 转基因植物的筛选第32-33页
        2.4.13 拟南芥原生质体的制备及CiNAC1的瞬时表达第33页
        2.4.14 转CiNAC1基因拟南芥侧根分析第33页
        2.4.15 萌发率的检测第33页
        2.4.16 乙烯诱导转CiNAC1基因拟南芥叶片衰老分析第33-34页
        2.4.17 叶绿素含量和离子渗透率的检测第34-35页
3 结果与分析第35-53页
    3.1 中间锦鸡儿CiNAC1基因全长cDNA的克隆第35页
    3.2 中间锦鸡儿CiNAC1基因生物信息学分析第35-39页
        3.2.1 中间锦鸡儿CiNAC1基因序列分析第35-36页
        3.2.2 CiNAC1蛋白理化性质分析第36-37页
        3.2.3 CiNAC1蛋白的二级结构预测第37页
        3.2.4 CiNAC1蛋白功能结构域预测和分析第37页
        3.2.5 CiNAC1蛋白与其他物种NAC类蛋白多重比对第37-38页
        3.2.6 CiNAC1蛋白的系统进化树分析第38-39页
    3.3 中间锦鸡儿CiNAC1基因表达特性分析第39-42页
        3.3.1 CiNAC1的组织表达特性分析第39-40页
        3.3.2 CiNAC1基因在不同胁迫处理下的表达分析第40-42页
    3.4 CiNAC1在原生质体中的亚细胞定位第42-43页
        3.4.1 CiNAC1的GFP融合表达载体的构建第42-43页
        3.4.2 CiNAC1的亚细胞定位观察第43页
    3.5 CiNAC1基因过表达纯合体的筛选及表达量的检测第43-46页
        3.5.1 过表达载体pCanG-CiNAC1的构建第43-44页
        3.5.2 过表达CiNAC1转基因株系的获得第44-45页
        3.5.3 过表达CiNAC1纯合体的鉴定第45-46页
    3.6 CiNAC1基因促进侧根生长第46-47页
    3.7 转基因拟南芥盐胁迫耐受性检测第47-48页
    3.8 转基因拟南芥渗透胁迫耐受性检测第48-49页
    3.9 过表达CiNAC1促进拟南芥叶片衰老第49-53页
4 讨论第53-56页
    4.1 通过对CiNAC1序列的分析预测其功能第53页
    4.2 CiNAC1基因促进侧根发育第53-54页
    4.3 CiNAC1基因促进叶片衰老第54-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-64页
作者简介第64页

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