摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1 引言 | 第12-21页 |
1.1 NAC转录因子研究进展 | 第12-13页 |
1.1.1 NAC转录因子的发现 | 第12页 |
1.1.2 NAC转录因子的结构 | 第12-13页 |
1.2 NAC转录因子的功能 | 第13-18页 |
1.2.1 植物细胞次生壁的生成 | 第13-14页 |
1.2.2 植物器官边界和分生组织形成 | 第14页 |
1.2.3 细胞分裂 | 第14页 |
1.2.4 种子萌发 | 第14-15页 |
1.2.5 植物侧根发育 | 第15页 |
1.2.6 果实的成熟与植株的衰老 | 第15-16页 |
1.2.7 NAC转录因子在植物逆境中的作用 | 第16-18页 |
1.3 中间锦鸡儿 | 第18-19页 |
1.4 研究目的和意义 | 第19页 |
1.5 技术路线 | 第19-21页 |
2 实验材料和方法 | 第21-35页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌种 | 第21页 |
2.1.3 质粒 | 第21页 |
2.2 实验药品 | 第21-26页 |
2.2.1 实验试剂及酶 | 第21页 |
2.2.2 试剂盒 | 第21-22页 |
2.2.3 引物设计 | 第22-23页 |
2.2.4 培养基及所需其他化学试剂的配制 | 第23-26页 |
2.3 实验仪器 | 第26页 |
2.4 实验方法 | 第26-35页 |
2.4.1 植物材料处理方法 | 第26-27页 |
2.4.2 植物RNA提取及cDNA的获得 | 第27-28页 |
2.4.3 基因表达量的检测 | 第28页 |
2.4.4 中间锦鸡儿CiNAC1基因全长cDNA的克隆 | 第28-29页 |
2.4.5 目的片段回收 | 第29页 |
2.4.6 目的基因与克隆载体的连接 | 第29页 |
2.4.7 大肠杆菌感受态的制备与目的片段的转化 | 第29页 |
2.4.8 质粒提取 | 第29-30页 |
2.4.9 中间锦鸡儿CiNAC1基因序列分析 | 第30页 |
2.4.10 中间锦鸡儿CiNAC1基因表达载体的构建 | 第30-31页 |
2.4.11 拟南芥的遗传转化 | 第31-32页 |
2.4.12 转基因植物的筛选 | 第32-33页 |
2.4.13 拟南芥原生质体的制备及CiNAC1的瞬时表达 | 第33页 |
2.4.14 转CiNAC1基因拟南芥侧根分析 | 第33页 |
2.4.15 萌发率的检测 | 第33页 |
2.4.16 乙烯诱导转CiNAC1基因拟南芥叶片衰老分析 | 第33-34页 |
2.4.17 叶绿素含量和离子渗透率的检测 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-53页 |
3.1 中间锦鸡儿CiNAC1基因全长cDNA的克隆 | 第35页 |
3.2 中间锦鸡儿CiNAC1基因生物信息学分析 | 第35-39页 |
3.2.1 中间锦鸡儿CiNAC1基因序列分析 | 第35-36页 |
3.2.2 CiNAC1蛋白理化性质分析 | 第36-37页 |
3.2.3 CiNAC1蛋白的二级结构预测 | 第37页 |
3.2.4 CiNAC1蛋白功能结构域预测和分析 | 第37页 |
3.2.5 CiNAC1蛋白与其他物种NAC类蛋白多重比对 | 第37-38页 |
3.2.6 CiNAC1蛋白的系统进化树分析 | 第38-39页 |
3.3 中间锦鸡儿CiNAC1基因表达特性分析 | 第39-42页 |
3.3.1 CiNAC1的组织表达特性分析 | 第39-40页 |
3.3.2 CiNAC1基因在不同胁迫处理下的表达分析 | 第40-42页 |
3.4 CiNAC1在原生质体中的亚细胞定位 | 第42-43页 |
3.4.1 CiNAC1的GFP融合表达载体的构建 | 第42-43页 |
3.4.2 CiNAC1的亚细胞定位观察 | 第43页 |
3.5 CiNAC1基因过表达纯合体的筛选及表达量的检测 | 第43-46页 |
3.5.1 过表达载体pCanG-CiNAC1的构建 | 第43-44页 |
3.5.2 过表达CiNAC1转基因株系的获得 | 第44-45页 |
3.5.3 过表达CiNAC1纯合体的鉴定 | 第45-46页 |
3.6 CiNAC1基因促进侧根生长 | 第46-47页 |
3.7 转基因拟南芥盐胁迫耐受性检测 | 第47-48页 |
3.8 转基因拟南芥渗透胁迫耐受性检测 | 第48-49页 |
3.9 过表达CiNAC1促进拟南芥叶片衰老 | 第49-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
4.1 通过对CiNAC1序列的分析预测其功能 | 第53页 |
4.2 CiNAC1基因促进侧根发育 | 第53-54页 |
4.3 CiNAC1基因促进叶片衰老 | 第54-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
作者简介 | 第64页 |