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中药复方体外抗TGEV诱导猪小肠黏膜上皮细胞凋亡的机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
1 前言第12-18页
    1.1 猪传染性胃肠炎概况第12-15页
        1.1.1 病原学第12-13页
        1.1.2 流行病学第13页
        1.1.3 临床症状第13-14页
        1.1.4 病理变化第14页
        1.1.5 发病机制第14-15页
    1.2 中药抗病毒研究概况第15-17页
        1.2.1 中药抗病毒的理论基础第15页
        1.2.2 中药抗病毒的作用机理第15-16页
        1.2.3 中药抗病毒的临床应用第16-17页
    1.3 中兽医对仔猪腹泻的辨证分型及本课题研究的目的和意义第17-18页
        1.3.1 中兽医对仔猪腹泻的辨证分型第17-18页
        1.3.2 本课题研究的目的和意义第18页
2 中药复方细胞毒性的筛选试验第18-24页
    2.1 材料第18-19页
        2.1.1 中药复方与细胞株第18-19页
        2.1.2 主要试剂第19页
        2.1.3 主要仪器第19页
    2.2 方法第19-20页
        2.2.1 中药复方水煎剂的制备第19页
        2.2.2 细胞的培养第19-20页
        2.2.3 中药复方最大安全浓度的筛定第20页
        2.2.4 数据分析第20页
    2.3 结果第20-23页
        2.3.1 复方参术汤对SIEC和PK-15细胞生长的影响第20-21页
        2.3.2 复方连翁汤对SIEC和PK-15细胞生长的影响第21-22页
        2.3.3 复方参附汤对SIEC和PK-15细胞生长的影响第22-23页
    2.4 讨论第23页
    2.5 小结第23-24页
3 中药复方体外抗病毒试验第24-27页
    3.1 材料第24页
        3.1.1 细胞与毒株第24页
        3.1.2 主要试剂与仪器第24页
    3.2 方法第24-25页
        3.2.1 细胞的培养第24页
        3.2.2 病毒的增殖及病毒滴度的测定第24页
        3.2.3 中药复方体外抗TGEV的作用第24-25页
    3.3 结果第25-26页
        3.3.1 Reed and Muench方法测定病毒滴度第25页
        3.3.2 中药复方体外抗TGEV的作用第25-26页
    3.4 讨论第26-27页
    3.5 小结第27页
4 中药复方干预TGEV诱导猪小肠黏膜上皮细胞细胞周期及凋亡的影响第27-40页
    4.1 材料第27-28页
        4.1.1 细胞与毒株第27页
        4.1.2 主要试剂第27页
        4.1.3 主要仪器第27-28页
    4.2 方法第28-29页
        4.2.1 中药复方干预TGEV诱导SIEC细胞周期的影响检测第28页
        4.2.2 中药复方干预TGEV诱导SIEC周期蛋白cyclinA与cyclinB1的影响检测第28-29页
        4.2.3 中药复方干预TGEV诱导SIEC凋亡的影响检测第29页
    4.3 结果第29-39页
        4.3.1 中药复方干预TGEV诱导SIEC细胞周期的影响第29-35页
        4.3.2 中药复方干预TGEV诱导SIEC周期蛋白cyclinA与cyclinB1的影响第35-38页
        4.3.3 中药复方干预TGEV诱导SIEC细胞凋亡的影响第38-39页
    4.4 讨论第39-40页
    4.5 小结第40页
5 中药复方干预TGEV诱导猪小肠黏膜上皮细胞凋亡的死亡受体和线粒体通路的影响第40-56页
    5.1 材料第40-41页
        5.1.1 主要试剂第40-41页
        5.1.2 主要仪器第41页
    5.2 方法第41-42页
        5.2.1 死亡受体和线粒体通路上主要调控因子蛋白的检测第41页
        5.2.2 凋亡调控基因的检测第41-42页
        5.2.3 TGEV相对定量的检测第42页
        5.2.4 抑制剂作用下细胞的生存情况及对caspase蛋白表达的检测第42页
    5.3 结果第42-54页
        5.3.1 中药复方干预TGEV诱导SIEC Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白水平的影响第42-44页
        5.3.2 中药复方干预TGEV诱导SIEC Fas和FasL mRNA水平的影响第44-47页
        5.3.3 中药复方干预TGEV诱导SIEC Fas和FasL蛋白表达水平的影响第47-48页
        5.3.4 中药复方干预TGEV诱导SIEC Bcl-2和Bax mRNA水平的影响第48-50页
        5.3.5 中药复方干预TGEV诱导SIEC Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响第50-51页
        5.3.6 中药复方干预TGEV诱导SIEC Cytochrome c与Bid蛋白水平的影响第51-52页
        5.3.7 中药复方干预TGEV诱导SIEC TGEV-N mRNA水平的影响第52页
        5.3.8 Caspases抑制剂对细胞凋亡所依赖的Caspase途径的影响第52-54页
    5.4 讨论第54-56页
    5.5 小结第56页
6 中药复方干预TGEV诱导猪小肠黏膜上皮细胞猪氨基肽酶N(pAPN)变化的影响第56-61页
    6.1 材料第56页
        6.1.1 主要试剂第56页
        6.1.2 主要仪器第56页
    6.2 方法第56-57页
        6.2.1 中药复方干预TGEV诱导SIEC pAPN mRNA水平的检测第56-57页
        6.2.2 中药复方干预TGEV诱导SIEC GRP78 mRNA水平的检测第57页
    6.3 结果第57-60页
        6.3.1 中药复方干预TGEV诱导SIEC pAPN mRNA水平的影响第57-59页
        6.3.2 中药复方干预TGEV诱导SIEC GRP78 mRNA水平的影响第59-60页
    6.4 讨论第60-61页
    6.5 小结第61页
7 中药复方干预TGEV诱导猪小肠黏膜上皮细胞相关抗病毒因子的影响第61-67页
    7.1 材料第61页
        7.1.1 主要试剂第61页
        7.1.2 主要仪器第61页
    7.2 方法第61-62页
        7.2.1 中药复方干预TGEV诱导SIEC TNF-α mRNA水平的检测第61页
        7.2.2 中药复方干预TGEV诱导SIEC IFN-β mRNA水平的检测第61-62页
        7.2.3 中药复方干预TGEV诱导SIEC TLR3 mRNA水平的检测第62页
        7.2.4 中药复方干预TGEV诱导SIEC NF-kB mRNA水平的检测第62页
    7.3 结果第62-67页
        7.3.1 中药复方干预TGEV诱导SIEC TNF-α mRNA水平的影响第62-63页
        7.3.2 中药复方干预TGEV诱导SIEC IFN-βmRNA水平的影响第63-65页
        7.3.3 中药复方干预TGEV诱导SIEC TLR3 mRNA水平的影响第65-66页
        7.3.4 中药复方干预TGEV诱导SIEC NF-κB mRNA水平的影响第66-67页
    7.4 讨论第67页
    7.5 小结第67页
8 结论与创新第67-70页
    8.1 结论第67-68页
    8.2 创新第68-70页
致谢第70-71页
参考文献第71-79页
作者简介第79页

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