| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第12-16页 |
| 1.1 研究背景和意义 | 第12页 |
| 1.2 线粒体自噬的研究现状及问题 | 第12-14页 |
| 1.2.1 线粒体自噬 | 第12-14页 |
| 1.2.2 线粒体自噬与阿尔茨海默病 | 第14页 |
| 1.3 研究策略与创新点 | 第14-16页 |
| 2 材料 | 第16-23页 |
| 2.1 质粒、菌株及细胞系 | 第16页 |
| 2.2 试剂盒与酶 | 第16页 |
| 2.3 耗材与试剂 | 第16-19页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.5 主要溶液的配制 | 第20-23页 |
| 2.5.1 核酸电泳缓冲液的配制 | 第20页 |
| 2.5.2 蛋白质电泳所用试剂及缓冲液的配制 | 第20-21页 |
| 2.5.3 细胞实验主要溶液配制 | 第21-22页 |
| 2.5.4 其他实验溶液配制 | 第22-23页 |
| 3 方法 | 第23-32页 |
| 3.1 技术路线 | 第23页 |
| 3.2 LC3基因引物设计 | 第23-24页 |
| 3.3 质粒的鉴定 | 第24页 |
| 3.4 细胞培养 | 第24-25页 |
| 3.4.1 U87 MG细胞的复苏 | 第24-25页 |
| 3.4.2 U87 MG细胞的培养 | 第25页 |
| 3.4.3 U87 MG细胞的冻存 | 第25页 |
| 3.5 细胞转染 | 第25-26页 |
| 3.6 Aβ42寡聚体的制备 | 第26页 |
| 3.7 细胞总RNA的提取及RT-PCR | 第26-27页 |
| 3.8 细胞总蛋白的提取与测定 | 第27页 |
| 3.9 SDS-PAGE | 第27-28页 |
| 3.10 Western blot检测LC3B、p62及Drp1表达 | 第28-29页 |
| 3.11 自噬的诱导及鉴定 | 第29页 |
| 3.12 免疫荧光 | 第29页 |
| 3.13 TEM确认自噬体超微结构 | 第29-30页 |
| 3.14 免疫电镜(IEM) | 第30页 |
| 3.15 MTT法检测细胞活力 | 第30-31页 |
| 3.16 统计学分析 | 第31-32页 |
| 4 结果 | 第32-57页 |
| 4.1 质粒的构建 | 第32-34页 |
| 4.2 细胞培养与转染 | 第34-35页 |
| 4.3 质粒的选择 | 第35-37页 |
| 4.4 Aβ42诱导细胞线粒体自噬 | 第37-49页 |
| 4.4.1 胞外Aβ42处理诱导细胞线粒体自噬 | 第37-41页 |
| 4.4.2 剂量依赖性 | 第41-42页 |
| 4.4.3 时间依赖性 | 第42页 |
| 4.4.4 不同聚合程度Aβ42诱导细胞线粒体自噬 | 第42-47页 |
| 4.4.5 3MA抑制Aβ诱导线粒体自噬 | 第47-48页 |
| 4.4.6 TEM/IEM检测自噬小体超微结构 | 第48-49页 |
| 4.5 Drp1调控Aβ42线粒体自噬的效果和机制 | 第49-57页 |
| 5 讨论 | 第57-59页 |
| 6 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 附录 英文缩略词表 | 第63-64页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65-67页 |
| 学位论文数据集 | 第67页 |
