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烟草脉带花叶病毒和马铃薯X病毒的协生作用及二者侵染本氏烟的转录组学分析

符号说明第6-11页
中文摘要第11-13页
ABSTRACT第13-15页
1 前言第16-29页
    1.1 烟草脉带花叶病毒第16-19页
        1.1.1 发生与危害第16-17页
        1.1.2 全基因组序列与结构第17-18页
        1.1.3 蛋白序列及功能的研究第18-19页
    1.2 马铃薯X病毒第19-21页
    1.3 病毒的相互作用第21-24页
        1.3.1 协生作用第21-24页
        1.3.2 拮抗作用第24页
    1.4 二代测序在植物病毒研究中的应用第24-27页
        1.4.1 二代测序技术研究病毒与寄主植物的互作第25页
        1.4.2 二代测序技术鉴定植物病毒第25-27页
    1.5 芝麻病毒病第27页
    1.6 本研究的目的意义第27-29页
2 材料与方法第29-53页
    2.1 材料第29-30页
        2.1.1 样品及毒原第29页
        2.1.2 供试植物第29页
        2.1.3 菌株第29页
        2.1.4 血清第29页
        2.1.5 生化试剂、试剂盒与酶第29-30页
        2.1.6 寡聚核苷酸引物第30页
        2.1.7 主要实验仪器第30页
    2.2 方法第30-53页
        2.2.1 侵染性克隆的接种第30-33页
        2.2.2 间接ELISA法检测病毒积累量第33-35页
        2.2.3 RT-PCR检测病毒第35-36页
        2.2.4 本氏烟的转录组数据分析第36-43页
        2.2.5 芝麻病叶的小RNA测序第43-44页
        2.2.6 验证小RNA测序结果第44-48页
        2.2.7 TVBMV芝麻分离物全基因组序列测定第48-51页
        2.2.8 TVBMV芝麻分离物全基因组序列分析第51-53页
3 结果与分析第53-98页
    3.1 TVBMV与PVX的协生第53-59页
        3.1.1 TVBMV野生型及弱毒突变体T-HCM与PVX侵染本氏烟的症状第53-57页
        3.1.2 检测TVBMV野生型及弱毒突变体与PVX侵染本氏烟病毒的积累量第57-59页
    3.2 TVBMV野生型及弱毒突变体与PVX复合侵染的转录组学分析第59-88页
        3.2.1 RNA样品的提取及质量检测第59页
        3.2.2 测序数据的初步分析第59-61页
        3.2.3 基因表达水平分析第61-62页
        3.2.4 基因差异表达分析第62-67页
        3.2.5 差异基因的GO富集分析第67-73页
        3.2.6 差异基因的KEGG富集分析第73-75页
        3.2.7 荧光定量RT-PCR验证RNA-seq数据的准确性第75页
        3.2.8 荧光定量PCR验证关键通路基因第75-78页
        3.2.9 协生引起的病害症状的相关因子第78-88页
    3.3 感病芝麻样品的小RNA测序及分析第88-91页
        3.3.1 感病芝麻样品的田间症状第88-89页
        3.3.2 RNA样品的提取及质量检测第89页
        3.3.3 序列处理第89-90页
        3.3.4 小RNA测序结果第90页
        3.3.5 RT-PCR检测芝麻样品中的TVBMV第90-91页
        3.3.6 序列测定及分析第91页
        3.3.7 Western blotting检测芝麻样品TVBMV蛋白表达水平第91页
    3.4 TVBMV芝麻分离物全基因组测序及分析第91-98页
        3.4.1 RT-PCR结果第91-92页
        3.4.2 序列测定第92页
        3.4.3 基因组结构第92-93页
        3.4.4 核苷酸和氨基酸一致率第93-94页
        3.4.5 系统进化关系第94页
        3.4.6 重组分析第94-95页
        3.4.7 生物学性状第95-96页
        3.4.8 全基因组序列第96-98页
4 讨论第98-102页
    4.1 病毒的协生作用第98-99页
    4.2 病毒复合侵染本氏烟引起的转录组变化第99-100页
    4.3 协生作用与单独侵染本氏烟的转录组数据比较第100-102页
5 结论第102-103页
参考文献第103-115页
致谢第115-116页
攻读学位期间发表论文情况第116页

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