| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-26页 |
| 1.1 几丁质与几丁质酶 | 第11-12页 |
| 1.1.1 几丁质概述 | 第11页 |
| 1.1.2 几丁质的酶解 | 第11-12页 |
| 1.2 昆虫几丁质酶 | 第12-23页 |
| 1.2.1 昆虫几丁质酶概述 | 第12-13页 |
| 1.2.2 昆虫几丁质酶功能 | 第13-14页 |
| 1.2.3 昆虫几丁质酶基因的克隆 | 第14-17页 |
| 1.2.4 昆虫几丁质酶分类 | 第17-19页 |
| 1.2.5 昆虫几丁质酶的表达 | 第19-22页 |
| 1.2.6 昆虫几丁质酶害虫防治方面的应用 | 第22-23页 |
| 1.3 培菌白蚁研究 | 第23-24页 |
| 1.4 本文的立题依据及基本思路 | 第24-26页 |
| 1.4.1 立题依据 | 第24-25页 |
| 1.4.2 本文基本思路 | 第25-26页 |
| 第二章 黄翅大白蚁肠道转录组测序几丁质酶基因分析 | 第26-32页 |
| 2.1 引言 | 第26-27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27页 |
| 2.3.1 转录组测序结果中Chitinase基因筛查 | 第27页 |
| 2.3.2 生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.4 实验结果 | 第27-30页 |
| 2.4.1 黄翅大白蚁肠道几丁质酶基因序列 | 第27-28页 |
| 2.4.2 几丁质酶基因分析 | 第28-30页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 黄翅大白蚁几丁质酶MbCht1克隆及功能性表达 | 第32-44页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料、试剂及仪器 | 第32-33页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.2.2 实验仪器及试剂 | 第32-33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.3.1 分析MbCht1的cDNA序列 | 第33页 |
| 3.3.2 获得MbCht1序列 | 第33-34页 |
| 3.3.3 克隆MbCht1到大肠杆菌JM109中表达 | 第34-36页 |
| 3.4 实验结果 | 第36-42页 |
| 3.4.1 MbCht1的cDNA序列的分析 | 第36-40页 |
| 3.4.2 MbCht1全长的获得 | 第40页 |
| 3.4.3 MbCht1在大肠杆菌JM109菌株中表达 | 第40-42页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 黄翅大白蚁几丁质基因MbCht2克隆及功能性表达 | 第44-59页 |
| 4.1 引言 | 第44-45页 |
| 4.2 实验材料、试剂及仪器 | 第45页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.2.2 菌株与质粒 | 第45页 |
| 4.2.3 试剂与仪器设备 | 第45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-49页 |
| 4.3.1 分析MbCht2的cDNA序列 | 第45-46页 |
| 4.3.2 克隆MbCht2序列 | 第46页 |
| 4.3.3 克隆MbCht2到大肠杆菌JM109中表达 | 第46页 |
| 4.3.4 克隆MbCht2到在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达 | 第46-47页 |
| 4.3.5 克隆MbCht2到毕赤酵母GS115中表达 | 第47-49页 |
| 4.4 实验结果 | 第49-57页 |
| 4.4.1 MbCht2的cDNA序列的分析 | 第49-51页 |
| 4.4.2 MbCht2全长的克隆 | 第51页 |
| 4.4.3 MbCht2在大肠杆菌JM109菌株中的表达 | 第51-53页 |
| 4.4.4 MbCht2在大肠杆菌BL21 (DE3)菌株中的表达 | 第53-55页 |
| 4.4.5 MbCht2在毕赤酵母GS115菌株中的表达 | 第55-57页 |
| 4.5 讨论与小结 | 第57-59页 |
| 第五章 黄翅大白蚁几丁质酶基因MbCht3克隆及功能性表达 | 第59-69页 |
| 5.1 引言 | 第59页 |
| 5.2 实验材料、仪器与试剂 | 第59页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第59页 |
| 5.2.2 菌株与质粒 | 第59页 |
| 5.2.3 试剂与仪器设备 | 第59页 |
| 5.3 实验方法 | 第59-61页 |
| 5.3.1 分析MbCht3的cDNA序列 | 第59-60页 |
| 5.3.2 获得MbCht3序列 | 第60页 |
| 5.3.3 克隆MbCht3到大肠杆菌JM109中表达 | 第60页 |
| 5.3.4 克隆MbCht3到大肠杆菌BL21 (DE3)中表达 | 第60-61页 |
| 5.4 实验结果 | 第61-67页 |
| 5.4.1 MbCht3的cDNA序列的分析 | 第61-63页 |
| 5.4.2 MbCht3全长的克隆 | 第63页 |
| 5.4.3 MbCht3在大肠杆菌JM109菌株中的表达 | 第63-65页 |
| 5.4.4 MbCht3在大肠杆菌BL21 (DE3)菌株中的表达 | 第65-67页 |
| 5.5 小结与讨论 | 第67-69页 |
| 第六章 MbChts在黄翅大白蚁肠道的表达情况 | 第69-76页 |
| 6.1 引言 | 第69页 |
| 6.2 实验材料、试剂及仪器 | 第69-70页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第69页 |
| 6.2.2 主要的实验仪器设备 | 第69页 |
| 6.2.3 实验试剂 | 第69-70页 |
| 6.3 实验方法 | 第70-71页 |
| 6.3.1 采集和解剖黄翅大白蚁 | 第70页 |
| 6.3.2 提取RNA | 第70页 |
| 6.3.3 定量PCR | 第70-71页 |
| 6.4 实验结果 | 第71-74页 |
| 6.4.1 黄翅大白蚁分拣和解剖 | 第71-73页 |
| 6.4.2 RNA的提取 | 第73页 |
| 6.4.3 定量PCR检测MbChts在黄翅大白蚁肠道表达位点 | 第73-74页 |
| 6.5 小结与讨论 | 第74-76页 |
| 第七章 总结与展望 | 第76-78页 |
| 附录 | 第78-89页 |
| 附录一 黄翅大白蚁肠道转录组GH18家族基因 | 第78-79页 |
| 附录二 黄翅大白蚁肠道转录组GH85家族基因 | 第79-80页 |
| 附录三 黄翅大白蚁转录组数据中12个昆虫几丁质酶的信息 | 第80-81页 |
| 附录四 文献已报道的昆虫几丁质酶Genebank基因号 | 第81-82页 |
| 附录五 系统发育进化树所用到的几丁质酶基因号 | 第82-83页 |
| 附录六 实验设备 | 第83-84页 |
| 附录七 药品和试剂 | 第84-85页 |
| 附录八 本文所有涉及到的引物 | 第85-86页 |
| 附录九 1%胶体几丁质制备方法 | 第86-87页 |
| 附录十 本文所涉及的培养基 | 第87-88页 |
| 附录十一 毕赤酵母GS115感受态细胞制备方法及电转方法 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 攻读学位期间参与发表的论文及参加的会议 | 第96-97页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第97页 |
