| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| CHAPTER 1 INTRODUCTION | 第14-24页 |
| 1. CYTOCHROMES P450 | 第14-19页 |
| 1.1 P450 Functions in insects | 第16-17页 |
| 1.2 Metabolism of Signal Molecules | 第17页 |
| 1.3 Xenobiotic Metabolism:Activation and Inactivation | 第17-18页 |
| 1.4 P450 and Host Plant Specialization | 第18页 |
| 1.5 Host Plant, Induction,and Pesticides | 第18页 |
| 1.6 Insecticide Resistance | 第18-19页 |
| 2. THE RISE OF MICRORNAS | 第19-22页 |
| 3 RESEARCH AIM AND THESIS OUTLINE | 第22-24页 |
| CHAPTER 2 CHARACTERIZATION OF P450 GENES IN C. SUPPRESSALIS | 第24-48页 |
| 2.1 INTRODUCTION | 第24-26页 |
| 2.2 MATERIAL AND METHODS | 第26-28页 |
| 2.2.1 Insects | 第26页 |
| 2.2.2 Total RNA isolation and cDNA synthesis | 第26页 |
| 2.2.3 PCR | 第26-27页 |
| 2.2.4 Rapid amplification of cDNA Ends (RACE) | 第27页 |
| 2.2.5 Sequence analysis | 第27页 |
| 2.2.6 Phylogenetic analysis | 第27-28页 |
| 2.2.7 Molecular weight, pI,and signal anchor sequence prediction | 第28页 |
| 2.3 RESULTS AND DISCUSSION | 第28-48页 |
| 2.3.1 Genome-wide identification of CYP genes in the rice stem stripped borer | 第28页 |
| 2.3.2 RACE amplification to clone 5'- and 3'-ends of CYP transcripts | 第28-29页 |
| 2.3.3 Full length or nearly full length putative P450s from the rice stripped stem borer | 第29-43页 |
| 2.3.4 Phylogenetic analysis of insect P450s | 第43-45页 |
| 2.3.5 Tandem repeat of CYP321F genes | 第45-48页 |
| CHAPTER 3 MOLECULAR CLONING AND DEVELOPMENTAL EXPRESSION PROFILE OF PHANTOM IN RICE STRIPED STEM BORER, C. SUPPRESSALIS | 第48-60页 |
| 3.1 INTRODUCTION | 第48-49页 |
| 3.2 MATERIALS AND METHODS | 第49-54页 |
| 3.2.1 Insects | 第49页 |
| 3.2.2 Total RNA isolation and cDNA synthesis | 第49-50页 |
| 3.2.3 Amplification of cDNA fragment | 第50-51页 |
| 3.2.4 Rapid amplification of cDNA ends (3' RACE and 5' RACE) | 第51-52页 |
| 3.2.5 Phylogenetic analysis | 第52-53页 |
| 3.2.6 Quantitative real time PCR analysis of gene expression | 第53-54页 |
| 3.3 RESULTS | 第54-57页 |
| 3.3.1 Molecular cloning and sequence analysis of Cs-phantom | 第54-56页 |
| 3.3.2 The spatial expression of Cs-phantom in different tissues | 第56页 |
| 3.3.3 The temporal expression of Cs-phantom in different stages | 第56-57页 |
| 3.4 DISCUSSION | 第57-60页 |
| CHAPTER 4 KNOCKDOWN OF CS-SPOOK INDUCES DELAYED LARVAL MOLTING IN RICE STRIPED STEM BORER, C. SUPPRESSALIS | 第60-76页 |
| 4.1 INTRODUCTION | 第60-61页 |
| 4.2 MATERIALS AND METHODS | 第61-70页 |
| 4.2.1 Insects | 第61页 |
| 4.2.2 Total RNA isolation and cDNA synthesis | 第61-62页 |
| 4.2.3 PCR | 第62页 |
| 4.2.4 Rapid amplification of cDNA Ends (RACE) | 第62-63页 |
| 4.2.5 Sequence analysis | 第63-64页 |
| 4.2.6 qPCR | 第64-66页 |
| 4.2.7 Preparation of dsRNA and microinjection | 第66-68页 |
| 4.2.8 Relative expression level of Cs-spook in dsRNA-treated insects | 第68页 |
| 4.2.9 20-E titer measurements | 第68-70页 |
| 4.2.10 Rescue experiments | 第70页 |
| 4.3 RESULTS | 第70-72页 |
| 4.3.1 Molecular cloning and characterization of Cs-spook | 第70页 |
| 4.3.2 Phylogenetic analysis | 第70页 |
| 4.3.3 Expression profile of Cs-spook | 第70-71页 |
| 4.3.4 dsRNA knockdown of Cs-spook | 第71页 |
| 4.3.5 Ecdysteroid titer was reduced in the Cs-spook dsRNA-treated insects | 第71页 |
| 4.3.6 20E rescues the dsRNA phenotype | 第71-72页 |
| 4.4 DISCUSSION | 第72-76页 |
| CHAPTER 5 COMPUTATIONAL PREDICTION AND VALIDATION OF MIRNAS TARGETING CS-SPOOK IN RICE STRIPED STEM BORER, C. SUPPRESSALIS | 第76-86页 |
| 5.1 INTRODUCTION | 第76-78页 |
| 5.2 MATERIALS AND METHODS | 第78-79页 |
| 5.2.1 Insects | 第78页 |
| 5.2.2 miRNA target prediction | 第78页 |
| 5.2.3 Dual luciferase reporter (DLR) assay | 第78-79页 |
| 5.2.4 qPCR | 第79页 |
| 5.2.5 miRNA mimics and inhibitor injection in vivo | 第79页 |
| 5.2.6 Statistical analysis | 第79页 |
| 5.3 RESULTS | 第79-83页 |
| 5.3.1 Prediction of miRNAs in the Cs-spook 3'UTR | 第79-80页 |
| 5.3.2 Influence of miRNAs on the expression of Cs-spook in HEK293T cells | 第80页 |
| 5.3.3 Expression Profile of miR-257 | 第80-83页 |
| 5.3.4 Inhibiting and oversupply of miR-257 in C. suppressalis | 第83页 |
| 5.4 DISCUSSION | 第83-86页 |
| SUMMARY | 第86-88页 |
| REFERENCES | 第88-102页 |
| AKNOWLDEGEMENTS | 第102-104页 |
| PUBLICATIONS | 第104页 |
