三种玉米miRNAs在猪体内、外的吸收规律研究
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 1. 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 miRNA研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.1 miRNA简介 | 第12页 |
| 1.1.2 miRNA生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.2 动植物miRNA区别 | 第13-16页 |
| 1.2.1 动植物miRNA结构 | 第13-14页 |
| 1.2.2 动植物miRNA生成过程 | 第14-15页 |
| 1.2.3 动植物miRNA作用机制 | 第15-16页 |
| 1.3 小RNA跨物种研究进展 | 第16-20页 |
| 1.3.1 miRNA跨物种传递研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.2 植物miRNA稳定性研究 | 第18-19页 |
| 1.3.3 miRNA跨物种传递机制 | 第19-20页 |
| 1.4 miRNA检测技术研究进展 | 第20-24页 |
| 1.4.1 miRNA高通量测序 | 第21-22页 |
| 1.4.2 定量-逆转录PCR(qRT-PCR) | 第22-23页 |
| 1.4.3 微滴式数字PCR(DD-PCR) | 第23-24页 |
| 1.5 翻转肠囊法 | 第24-25页 |
| 1.6 本试验目的及意义 | 第25-26页 |
| 2. 材料和方法 | 第26-33页 |
| 2.1 试验试剂和仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.1 试验仪器 | 第26页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第26-27页 |
| 2.2 试验动物 | 第27页 |
| 2.3 离体试验 | 第27-31页 |
| 2.3.1 翻转肠囊制备 | 第27-28页 |
| 2.3.2 翻转肠囊实验装置改进 | 第28-29页 |
| 2.3.3 翻转肠囊通透性检测 | 第29页 |
| 2.3.4 翻转肠囊内、外液采集 | 第29页 |
| 2.3.5 总RNA提取 | 第29-30页 |
| 2.3.7 miRNA标准品的稀释 | 第30页 |
| 2.3.8 miRNA的反转录 | 第30-31页 |
| 2.3.9 实时荧光定量PCR | 第31页 |
| 2.4 在体试验 | 第31-32页 |
| 2.4.1 血浆和组织样品采集 | 第31-32页 |
| 2.4.2 总RNA提取 | 第32页 |
| 2.4.3 miRNA的反转录 | 第32页 |
| 2.4.4 实时荧光定量PCR | 第32页 |
| 2.5 数据处理 | 第32-33页 |
| 3. 结果分析 | 第33-41页 |
| 3.1 标准曲线的建立 | 第33页 |
| 3.2 扩增产物的特异性 | 第33-34页 |
| 3.3 两种miRNA提取方法比较 | 第34-35页 |
| 3.4 翻转肠囊法研究玉米miRNA吸收规律 | 第35-38页 |
| 3.4.1 翻转肠囊通透性 | 第35-36页 |
| 3.4.2 翻转肠囊吸收动力学研究 | 第36-37页 |
| 3.4.3 翻转肠外液中玉米miRNAs变化规律 | 第37-38页 |
| 3.5 猪血浆中玉米miRNAs浓度 | 第38-39页 |
| 3.6 组织样品中玉米miRNAs分布规律 | 第39-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-45页 |
| 4.1 miRNA抽提效率的影响因素 | 第41-42页 |
| 4.2 miRNA检测方法选择 | 第42页 |
| 4.3 翻转肠囊实验装置改良 | 第42-43页 |
| 4.4 翻转肠囊内玉米miRNAs变化规律 | 第43-44页 |
| 4.5 玉米miRNAs在血浆中浓度及组织分布 | 第44-45页 |
| 5. 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第52页 |
