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甘蓝自交不亲和关联基因的克隆、表达分析及蛋白质相互作用研究

摘要第1-9页
Abstract第9-13页
第一章 文献综述第13-25页
   ·植物自交不亲和性的简介第13-14页
   ·孢子体自交不亲和性的分子研究第14-18页
     ·与S位点连锁的相关基因第14-16页
     ·与S位点非连锁的相关基因第16-18页
   ·孢子体自交不亲和的信号传导网络第18-22页
   ·酵母双杂交系统简介第22-25页
第二章 引言第25-27页
   ·研究的目的与意义第25页
   ·研究内容第25-27页
     ·甘蓝自交不亲和关联因子的筛选与克隆第25页
     ·甘蓝自交不亲和关联因子的基因表达分析第25-26页
     ·甘蓝自交不亲和关联因子的酵母载体构建和相互作用研究第26页
     ·甘蓝Exocyst复合体亚基的克隆及酵母载体的构建第26页
     ·甘蓝Exocyst复合体亚基与自交不亲和关联因子的相互作用研究第26-27页
第三章 材料与方法第27-41页
   ·实验材料第27-28页
     ·植物材料第27页
     ·菌株第27页
     ·试剂第27页
     ·主要培养基和溶液第27-28页
     ·主要仪器第28页
   ·实验方法第28-41页
     ·甘蓝总DNA的提取第28-29页
     ·甘蓝各组织总RNA的提取第29页
     ·cDNA第一链的合成第29页
     ·引物设计第29-30页
     ·PCR扩增目的片段第30页
     ·PCR产物回收第30-31页
     ·胶回收产物连接T载体并转化大肠杆菌第31页
     ·阳性克隆的鉴定与测序第31-32页
     ·生物信息学分析第32页
     ·各基因RT-PCR组织表达特异性分析第32-33页
     ·各基因时空表达特异性分析第33-35页
     ·MLPKs基因的分离与分析第35-36页
     ·酵母载体的构建第36-37页
     ·Exocyst复合体亚基的克隆第37-38页
     ·Exocyst复合体亚基酵母载体构建第38页
     ·AH109酵母感受态的制备第38-39页
     ·重组质粒转化酵母感受态第39页
     ·重组质粒的毒性检测第39页
     ·重组质粒的自激活检测第39-40页
     ·蛋白质相互作用的检测第40-41页
第四章 结果与分析第41-93页
   ·基因克隆、生物信息学分析及表达分析第41-71页
     ·BOsiP_(A1)第41-44页
     ·BPS1第44-48页
     ·KPDP第48-51页
     ·MLP423第51-54页
     ·Tubulin第54-58页
     ·Annexin第58-64页
     ·Actin第64-66页
     ·ARC1第66-69页
     ·Exo70A1第69-71页
   ·MLPKs基因的克隆与分析第71-81页
     ·MLPKs各转录本的获得第71-72页
     ·MLPKf1、MLPKf2、MLPKm、MLPKi基因的cDNA序列和氨基酸序列分析第72-76页
     ·MLPKf1、MLPKf2、MLPKi基因的gDNA序列和基因结构分析第76-78页
     ·MLPKf1、MLPKf2、MLPKm、MLPKi基因的表达分析第78-79页
     ·芸薹属中包含MLPK基因的染色体区域和拟南芥中包含APK1b基因的染色体区域的同线性分析第79-81页
   ·甘蓝自交不亲和关联因子间的相互作用研究第81-86页
     ·酵母载体的构建第81-82页
     ·酵母载体毒性检测第82-83页
     ·重组质粒的自激活检测第83-84页
     ·相互作用的检测第84-86页
   ·甘蓝Exocyst复合体亚基与自交不亲和关联因子的相互作用研究第86-93页
     ·Exocyst复合体亚基的克隆第86-87页
     ·酵母载体的构建第87页
     ·酵母载体毒性检测第87-88页
     ·重组质粒的自激活检测第88-89页
     ·相互作用的检测第89-93页
第五章 讨论第93-99页
第六章 结论与展望第99-101页
   ·结论第99-100页
     ·甘蓝自交不亲和关联因子的获得第99页
     ·甘蓝自交不亲和关联因子的基因表达分析第99页
     ·甘蓝自交不亲和关联因子酵母载体的构建及相互作用研究第99-100页
     ·Exocyst复合体亚基的克隆及与自交不亲和关联因子的互作研究第100页
   ·展望第100-101页
参考文献第101-109页
致谢第109-111页
附录第111-121页

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