| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 上篇 文献综述 | 第15-38页 |
| 第一章 转基因植物的研究进展 | 第16-24页 |
| 1 转基因技术在农业上的应用 | 第16-19页 |
| ·抗病基因工程 | 第16-17页 |
| ·抗虫基因工程 | 第17-18页 |
| ·抗除草剂基因工程 | 第18页 |
| ·抗逆境基因工程 | 第18-19页 |
| ·改良品质 | 第19页 |
| 2 转基因植物的鉴定 | 第19-24页 |
| ·外源基因整合水平的鉴定 | 第19-21页 |
| ·选择标记基因 | 第19-20页 |
| ·报告基因 | 第20页 |
| ·PCR检测 | 第20页 |
| ·Southern blot | 第20-21页 |
| ·外源基因转录水平的鉴定 | 第21页 |
| ·Northern blot | 第21页 |
| ·RT-PCR检测 | 第21页 |
| ·外源基因表达蛋白的检测 | 第21-22页 |
| ·Western blot | 第21页 |
| ·ELISA检测 | 第21-22页 |
| ·转基因植物检测的其他技术 | 第22-24页 |
| ·基因芯片技术 | 第22页 |
| ·原位杂交技术 | 第22-24页 |
| 第二章 Harpin蛋白及其编码基因 | 第24-30页 |
| 1 Harpin蛋白 | 第24页 |
| 2 Harpin蛋白在植物上的有益效应 | 第24-27页 |
| ·诱导植物抗病 | 第24-26页 |
| ·诱导植物抗虫 | 第26页 |
| ·诱导植物抗旱 | 第26页 |
| ·促进植物生长 | 第26-27页 |
| 3 Harpin蛋白在植物上的作用机理 | 第27-28页 |
| 4 Harpin蛋白编码基因在植物基因工程中的应用 | 第28-30页 |
| 第三章 活性氧与植物氧化胁迫 | 第30-38页 |
| 1 植物体内活性氧的种类和性质 | 第30-31页 |
| 2 植物体内活性氧的产生和清除 | 第31-36页 |
| ·活性氧的产生 | 第31-32页 |
| ·MV诱导的氧化胁迫 | 第32-33页 |
| ·活性氧的清除系统 | 第33-36页 |
| ·酶系统 | 第34-35页 |
| ·非酶系统 | 第35-36页 |
| 3 植物氧化胁迫研究的意义 | 第36-38页 |
| 下篇 研究内容 | 第38-112页 |
| 第一章 转popW基因烟草的鉴定和生长测定 | 第40-58页 |
| 摘要 | 第40页 |
| ABSTRACT | 第40-42页 |
| 1 材料与方法 | 第42-49页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·转基因烟草的抗性筛选 | 第42页 |
| ·转基因抗性苗的炼苗和移栽 | 第42页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第42-44页 |
| ·烟草DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·PCR扩增引物 | 第43页 |
| ·PCR反应 | 第43-44页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第44页 |
| ·转基因烟草的PCR-Southem blot | 第44-46页 |
| ·地高辛标记探针 | 第45页 |
| ·探针标记效率检测 | 第45页 |
| ·Southern blot尼龙膜的制备 | 第45-46页 |
| ·预杂交与杂交 | 第46页 |
| ·洗膜及显色 | 第46页 |
| ·转基因烟草的RT-PCR分析 | 第46-48页 |
| ·烟草RNA的提取 | 第46-47页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第47页 |
| ·PCR扩增引物 | 第47-48页 |
| ·PCR反应 | 第48页 |
| ·转基因烟草的GUS组织化学染色 | 第48-49页 |
| ·X-Gluc染色液的配制 | 第48-49页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第49页 |
| ·转基因烟草的生长测定 | 第49页 |
| ·数据分析 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-55页 |
| ·转基因烟草的抗性筛选 | 第49页 |
| ·T_3代转基因烟草的PCR检测 | 第49-50页 |
| ·T_3代转基因烟草的PCR-Southern blot | 第50-51页 |
| ·T_3代转基因烟草的RT-PCR分析 | 第51页 |
| ·T_3代转基因烟草的GUS染色 | 第51-52页 |
| ·T_3代转基因烟草的生长测定 | 第52-55页 |
| 3 讨论 | 第55-58页 |
| 第二章 转popW基因烟草对烟草花叶病毒病和青枯病的抗性测定及机理探究 | 第58-82页 |
| 摘要 | 第58页 |
| Abstract | 第58-61页 |
| 1 材料与方法 | 第61-66页 |
| ·植物和病原物 | 第61页 |
| ·供试植物 | 第61页 |
| ·病原物 | 第61页 |
| ·病原物制备及接种方法 | 第61-62页 |
| ·TMV的制备及接种 | 第61页 |
| ·青枯菌的制备及接种 | 第61-62页 |
| ·青枯菌在烟草叶片中的增殖 | 第62页 |
| ·H_2O_2的检测 | 第62页 |
| ·trypan blue染色 | 第62-63页 |
| ·防御酶活性的测定 | 第63页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定 | 第63页 |
| ·多酚氧化酶(PPO)活性测定 | 第63页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性测定 | 第63页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第63-65页 |
| ·烟草RNA的提取 | 第63页 |
| ·cDNA的合成 | 第63-64页 |
| ·PCR扩增引物 | 第64-65页 |
| ·Real-time PCR反应 | 第65页 |
| ·嫁接实验 | 第65-66页 |
| ·数据分析 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-80页 |
| ·转基因烟草对TMV的抗性测定及机理探究 | 第66-73页 |
| ·转基因烟草对TMV的抗性测定 | 第66-68页 |
| ·接种TMV后转基因烟草叶片中H_2O_2的含量变化 | 第68-69页 |
| ·接种TMV后转基因烟草叶片中防御酶活性的变化 | 第69-70页 |
| ·接种TMV后转基因烟草叶片中防卫相关基因的表达情况 | 第70-72页 |
| ·转基因烟草中抗病信号的传导 | 第72-73页 |
| ·转基因烟草对青枯病的抗性测定及机理探究 | 第73-80页 |
| ·转基因烟草对青枯病的抗性测定 | 第73-75页 |
| ·转基因烟草能抑制青枯菌的增殖 | 第75-76页 |
| ·接种青枯菌后烟草的活性氧爆发和过敏性细胞死亡 | 第76-77页 |
| ·接种青枯菌后烟草防卫基因的表达情况 | 第77-80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 第三章 转popW基因烟草对氧化胁迫的耐受性测定及其耐氧化胁迫机理探究 | 第82-98页 |
| 摘要 | 第82页 |
| ABSTRACT | 第82-84页 |
| 1 材料与方法 | 第84-88页 |
| ·实验材料 | 第84页 |
| ·H_2O_2对烟草幼苗生长的影响 | 第84-85页 |
| ·转基因烟草对氧化胁迫耐受能力的测定 | 第85页 |
| ·离体叶片对氧化胁迫的耐受性测定 | 第85页 |
| ·活体植株对氧化胁迫的耐受性测定 | 第85页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第85-86页 |
| ·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第86页 |
| ·相对电导率的测定 | 第86页 |
| ·抗坏血酸(AsA)含量的测定 | 第86页 |
| ·抗氧化酶活性的测定 | 第86-87页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第87-88页 |
| ·烟草RNA的提取 | 第87页 |
| ·cDNA的合成 | 第87页 |
| ·PCR扩增引物 | 第87-88页 |
| ·Real-time PCR反应 | 第88页 |
| ·数据分析 | 第88页 |
| 2 结果与分析 | 第88-95页 |
| ·H_2O_2对烟草幼苗生长的影响 | 第88-89页 |
| ·转基因烟草对氧化胁迫耐受能力的测定 | 第89-91页 |
| ·MV处理下MDA含量及相对电导率的变化 | 第91-92页 |
| ·转popW基因提高了烟草抗氧化酶的活性 | 第92-93页 |
| ·转popW基因提高了烟草氧化胁迫应答基因的表达 | 第93-95页 |
| 3 讨论 | 第95-98页 |
| 参考文献 | 第98-112页 |
| 附录 | 第112-116页 |
| 攻读学位期间完成的学术论文 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
