| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·真核生物内质网转运通路概论 | 第9-11页 |
| ·信号肽的结构及功能特点 | 第9页 |
| ·真核生物的内质网转位通路 | 第9-11页 |
| ·同义密码子突变对蛋白质表达的调控 | 第11-16页 |
| ·mRNA序列与蛋白质表达的关系 | 第11-12页 |
| ·密码子使用对蛋白质表达的影响 | 第12-16页 |
| ·杆状病毒表达系统简介 | 第16-18页 |
| ·杆状病毒简介 | 第16-17页 |
| ·杆状病毒表达系统简介 | 第17-18页 |
| ·研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 信号肽MRNA二级结构的预测 | 第19-21页 |
| ·方法 | 第19页 |
| ·二级结构的预测 | 第19页 |
| ·结果分析 | 第19-21页 |
| 第三章 不同信号肽对荧光素酶表达活性和分泌水平的的影响 | 第21-30页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·菌株、细胞与质粒 | 第21页 |
| ·化学试剂和工具酶 | 第21页 |
| ·缓冲液和培养基 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-25页 |
| ·含有荧光素酶的重组质粒的构建 | 第21-23页 |
| ·信号肽与荧光素酶融合表达质粒的构建 | 第23-24页 |
| ·利用杆状病毒表达荧光素酶并检测酶活和分泌水平 | 第24-25页 |
| ·结果和分析 | 第25-30页 |
| ·重组质粒pBac-FlucR和pFNCOI的构建 | 第25-26页 |
| ·信号肽和荧光素酶融合表达重组质粒的构建 | 第26-28页 |
| ·荧光素酶表达活性和分泌水平的时间进程分析 | 第28页 |
| ·不同信号肽指导下荧光素酶的表达活性和分泌水平 | 第28-30页 |
| 第四章 不同信号肽指导下报告基因转录和翻译的初步分析 | 第30-34页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·病毒和细胞 | 第30页 |
| ·化学试剂和工具酶 | 第30页 |
| ·缓冲液 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·实时定量检测不同信号肽融合的荧光素酶的转录水平 | 第30-32页 |
| ·Western blot分析荧光素酶表达量 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·不同信号肽指导下荧光素酶转录水平的差异情况 | 第32-33页 |
| ·不同信号肽指导下荧光素酶的表达总量 | 第33-34页 |
| 第五章 信号肽中高频密码子的引入导致荧光素酶的错误折叠和降解 | 第34-39页 |
| ·材料与试剂 | 第34页 |
| ·病毒和细胞 | 第34页 |
| ·化学试剂 | 第34页 |
| ·溶液配方 | 第34页 |
| ·主要仪器和设备 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-35页 |
| ·信号肽序列中密码子的使用频率统计 | 第34-35页 |
| ·MG-132的细胞毒性检测 | 第35页 |
| ·ELISA检测蛋白酶体复合体9降解通路抑制后荧光素酶的表达量 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·信号肽中密码子使用频率的统计分析 | 第35-36页 |
| ·MG-132抑制蛋白降解后对荧光素酶表达的影响 | 第36-39页 |
| 第六章 讨论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
