摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
·链霉菌概述 | 第10-11页 |
·链霉菌中的次级代谢产物 | 第11-13页 |
·链霉菌基因表达调控 | 第13-14页 |
·途径特异性调控 | 第13-14页 |
·全局调控 | 第14页 |
·生防菌密旋链霉菌Act12 | 第14-15页 |
·LuxR家族蛋白的研究现状 | 第15-16页 |
·卤代酶基因 | 第16-18页 |
·卤代酶的研究现状 | 第16页 |
·卤代酶的分类 | 第16-17页 |
·卤代酶在合成生物学中的应用 | 第17-18页 |
·课题目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 Act12次级代谢产物的分离纯化和鉴定 | 第19-31页 |
·实验仪器和材料 | 第19页 |
·实验仪器 | 第19页 |
·实验材料 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-21页 |
·链霉菌的发酵和萃取,浓缩 | 第19-20页 |
·薄层色谱(TLC)法 | 第20页 |
·高效液相色谱 | 第20页 |
·C18反相柱层析 | 第20页 |
·凝胶柱层析 | 第20-21页 |
·半制备高效液相色谱 | 第21页 |
·结果 | 第21-29页 |
·菌株发酵条件考察 | 第21-23页 |
·Act12大量发酵检测 | 第23页 |
·凝胶柱色谱 | 第23-24页 |
·半制柱HPLC制备 | 第24页 |
·HPLC图谱 | 第24-26页 |
·核磁共振检测 | 第26-28页 |
·高分辨率质谱检测 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29页 |
·小结 | 第29-31页 |
第三章 LuxR家族调控因子SPA5613功能研究 | 第31-44页 |
·实验材料与方法 | 第31-37页 |
·材料 | 第31-33页 |
·方法 | 第33-37页 |
·结果 | 第37-42页 |
·目的基因左、右侧臂基因片段的扩增 | 第37-38页 |
·载体pTKJ17的构建和验证 | 第38-39页 |
·spa5613基因敲除质粒的构建 | 第39-40页 |
·转入大肠杆菌S17-1 后质粒检测 | 第40页 |
·spa5613基因敲除突变株的构建 | 第40页 |
·互补质粒和互补菌株的构建 | 第40-41页 |
·突变株发酵液萃取物的抑菌活性检测和HPLC分析 | 第41-42页 |
·Act12(△spa5613)基因遗传互补株的构建及互补菌株的HPLC检测 | 第42页 |
·讨论 | 第42页 |
·小结 | 第42-44页 |
总结和展望 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50页 |