| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-6页 |
| 缩略词英汉对照表 | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1. NDV 一般生物学特性 | 第11-14页 |
| ·NDV 的分类、形态和结构特征 | 第11-12页 |
| ·NDV 的理化特性 | 第12页 |
| ·NDV 培养特性 | 第12-13页 |
| ·NDV 生物学活性 | 第13-14页 |
| ·血凝性 | 第13页 |
| ·细胞融合和溶血活性 | 第13页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第13-14页 |
| ·NDV 的毒力与致病性 | 第14页 |
| 2. NDV 分子生物学特征 | 第14-19页 |
| ·NDV 基因组 | 第14-15页 |
| ·NDV 的结构蛋白与功能 | 第15-19页 |
| ·F 蛋白 | 第15-16页 |
| ·HN 蛋白 | 第16-17页 |
| ·M 蛋白 | 第17-18页 |
| ·L 蛋白 | 第18页 |
| ·P 蛋白 | 第18页 |
| ·NP 蛋白 | 第18-19页 |
| 3. NDV 分子流行病学 | 第19-20页 |
| 4. NDV 实验室诊断研究进展 | 第20-23页 |
| ·病毒分离与鉴定 | 第20页 |
| ·血清学检测技术 | 第20-21页 |
| ·血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第20页 |
| ·琼脂扩散实验(AGP) | 第20页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第20-21页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第21页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第21-23页 |
| ·RT-PCR 技术 | 第21-22页 |
| ·RNA 指纹图谱法 | 第22页 |
| ·核酸探针技术 | 第22-23页 |
| 5. 本研究的目的意义 | 第23-24页 |
| 第二章 鸭源新城疫病毒 HN 基因的克隆与原核表达 | 第24-43页 |
| 1. 材料与方法 | 第24-35页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·主要材料及试验动物 | 第24页 |
| ·主要耗材 | 第24页 |
| ·质粒及受菌体 | 第24页 |
| ·主要试剂及配方 | 第24-25页 |
| ·主要设备及仪器 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-35页 |
| ·病毒的扩增 | 第26页 |
| ·引物设计与合成 | 第26页 |
| ·病毒总 RNA 提取 | 第26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第27页 |
| ·HN 基因与载体 pET-30a 的酶切与连接 | 第27-28页 |
| ·DH5α感受态细饱的制备 | 第28页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第28页 |
| ·阳性重组质粒的筛选与鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 pET-HN 的诱导及原核表达 | 第29-30页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳分析 | 第30-31页 |
| ·诱导表达条件的筛选及优化 | 第31-32页 |
| ·可溶性 HN 蛋白的制备及纯化 | 第32-33页 |
| ·目的蛋白的 Western blot 检测 | 第33页 |
| ·BCA 法测定蛋白浓度 | 第33-34页 |
| ·鸭 NDV HN 蛋白多克隆抗体的制备 | 第34-35页 |
| 2. 结果与分析 | 第35-40页 |
| ·HN 基因 RT-PCR 扩增结果 | 第35页 |
| ·重组质粒 pET-HN 鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒 pET-HN 初步鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒 pET-HN 酶切鉴定 | 第36页 |
| ·重组表达蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第36-38页 |
| ·可溶性 HN 蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| ·Western blot 检测 | 第39页 |
| ·纯化蛋白浓度测定 | 第39-40页 |
| ·鸭 NDV HN 蛋白多克隆抗体的制备与鉴定 | 第40页 |
| 3. 讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 间接 ELISA 方法的初步建立与应用 | 第43-53页 |
| 1. 材料与方法 | 第43-46页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·主要材料及试验动物 | 第43页 |
| ·主要耗材 | 第43页 |
| ·主要试剂及配方 | 第43页 |
| ·主要设备及仪器 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·ELISA 方法的基本操作程序 | 第43-44页 |
| ·抗原最佳包被浓度以及血清最佳稀释度的选择 | 第44页 |
| ·抗原包被液的选择 | 第44页 |
| ·封闭液的选择 | 第44页 |
| ·阴阳性血清最佳作用时间的确定 | 第44-45页 |
| ·酶标二抗最佳作用时间的确定 | 第45页 |
| ·临界值的确定 | 第45页 |
| ·重复性试验 | 第45页 |
| ·特异性试验 | 第45-46页 |
| ·间接 ELISA 方法的初步应用 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-51页 |
| ·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择 | 第46-47页 |
| ·包被液的选择 | 第47页 |
| ·封闭液的选择 | 第47-48页 |
| ·阴阳性血清最佳作用时间的确定 | 第48页 |
| ·酶标抗体最佳作用时间的确定 | 第48页 |
| ·ELISA 临界值的确定及结果的判定 | 第48-49页 |
| ·重复性试验 | 第49-50页 |
| ·批内重复性试验 | 第49页 |
| ·批间重复性试验 | 第49-50页 |
| ·特异性试验 | 第50-51页 |
| ·间接 ELISA 方法的初步应用 | 第51页 |
| 3. 讨论 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 导师简介 | 第62-63页 |