| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 1 新孢子虫病原学研究 | 第10页 |
| 2 新孢子虫病的危害 | 第10-11页 |
| 3 新孢子虫病的防治 | 第11-12页 |
| 4 本研究目的及意义 | 第12-13页 |
| 试验研究 | 第13-25页 |
| 1 试验材料 | 第13-17页 |
| ·试验用虫株与菌株 | 第13页 |
| ·试验用载体 | 第13页 |
| ·试验用主要试剂 | 第13页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第13-15页 |
| ·主要仪器设备 | 第15-17页 |
| 2 方法 | 第17-25页 |
| ·虫体DNA的提取 | 第17页 |
| ·引物的设计与合成 | 第17页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第17-18页 |
| ·PCR产物的纯化纯化回收 | 第18-19页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第19页 |
| ·GRA7基因与pMD 18-T Simple克隆载体的连接 | 第19-20页 |
| ·克隆质粒DNA的转化与阳性克隆筛选 | 第20页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第20页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第20-21页 |
| ·序列测定及分析 | 第21页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第22-23页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第23页 |
| ·表达蛋白SDS-PAGE | 第23-24页 |
| ·表达蛋白Western-blotting分析 | 第24-25页 |
| 试验结果 | 第25-31页 |
| 1 PCR扩增 | 第25页 |
| 2 目的基因的克隆及重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·目的基因的克隆 | 第25页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第25-26页 |
| 3 pMD18-T-GPA7重组质粒的基因序列测定及序列分析 | 第26-27页 |
| 4 GRA7蛋白结构预测 | 第27-28页 |
| 5 重组表达质粒的鉴定 | 第28-29页 |
| 6 重组表达质粒的序列测定 | 第29页 |
| 7 重组质粒pGEX-GRA7的表达 | 第29页 |
| 8 融合蛋白Western-blotting分析 | 第29-31页 |
| 讨论 | 第31-34页 |
| 结论 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 作者简介 | 第43页 |