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3-羟基丙醛影响克雷伯氏菌代谢及基因工程菌的构建研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-9页
主要符号对照表第9-10页
1 前言第10-29页
   ·1,3-丙二醇的性质及主要应用第10-12页
     ·1,3-丙二醇的物理性质第10页
     ·1,3-丙二醇的化学性质第10页
     ·1,3-丙二醇的主要应用第10-12页
   ·1,3-丙二醇的生产方法第12-19页
     ·化学合成法第13-15页
     ·生物合成法第15-19页
   ·3-羟基丙醛积累影响克雷伯氏菌代谢的研究第19-21页
     ·中间代谢产物3-羟基丙醛积累第19-20页
     ·降低3-羟基丙醛积累的研究第20-21页
   ·聚羟基脂肪酸酯(PHA)的简介第21-22页
     ·PHA的性质及分类第21-22页
     ·PHA的分类第22页
   ·PHB的合成与生物抗逆第22-27页
     ·合成PHB的微生物第22-23页
     ·微生物合成PHA的途径第23-26页
     ·PHA与生物抗逆第26-27页
   ·课题研究的目的意义第27-29页
     ·研究目的及意义第27页
     ·论文的主要研究内容第27-29页
2 材料与方法第29-41页
   ·实验材料第29-34页
     ·菌株与质粒第29页
     ·培养基第29-31页
     ·主要实验设备及仪器第31-32页
     ·主要试剂第32-34页
   ·实验方法第34-41页
     ·培养方法第34页
     ·生物量的测定第34页
     ·发酵液中的底物与产物浓度测定第34-35页
     ·3-羟基丙醛含量的测定第35页
     ·关键酶活性的测定第35-37页
     ·NAD~+及NADH_2的测定第37页
     ·质粒的提取,酶切,切胶回收及连接方法第37页
     ·感受态细胞的制备第37-38页
     ·感受态细胞的转化第38页
     ·SDS-PAGE电泳第38-39页
     ·PHB的测定方法第39-41页
3 结果与讨论第41-62页
   ·3-羟基丙醛积累对克雷伯氏菌1,3-丙二醇代谢的影响第41-50页
     ·克雷伯氏菌HR521发酵生产1,3-丙二醇第41-42页
     ·添加盐酸氨基脲对克雷伯氏菌3-羟基丙醛积累的影响第42-48页
     ·3-羟基丙醛对克雷伯氏菌1,3-丙二醇合成关键酶的影响第48-50页
     ·小节第50页
   ·PHB路径在克雷伯氏菌中的构建第50-56页
     ·重组载体pDK6-CAB的构建第50-54页
     ·PHB路径在大肠杆菌中的构建第54-55页
     ·PHB路径在克雷伯氏菌中的构建第55-56页
     ·小结第56页
   ·工程菌1,3-丙二醇发酵特性第56-62页
     ·工程菌PHB含量的测定第56-57页
     ·工程菌和野生菌发酵特性对比第57-60页
     ·工程菌耐3-羟基丙醛性能对比第60-61页
     ·小节第61-62页
4 结论第62-63页
5 展望第63-64页
6 参考文献第64-72页
7 攻读学位期间发表论文情况第72-73页
8 致谢第73-74页
附录A HPLC测定标准曲线第74-75页
附录B NADH_2和NAD~+测定标准曲线第75-76页
附录C phbCAB基因序列第76-79页

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