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氟苯虫酰胺和NK130102对亚洲玉米螟的分子作用机理研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
英文缩略表第12-13页
第一章 文献综述第13-33页
   ·鱼尼丁受体杀虫剂的研究进展第15-22页
     ·具鱼尼丁受体抑制剂活性的天然源物质第15-16页
     ·具鱼尼丁受体抑制剂活性的化学合成物质第16-22页
   ·鱼尼丁受体第22-31页
     ·鱼尼丁受体的结构第23-24页
     ·鱼尼丁受体的功能第24-26页
     ·鱼尼丁受体的调节第26-29页
     ·昆虫鱼尼丁受体第29-31页
   ·研究思路第31-33页
     ·立题依据第31页
     ·研究内容第31-33页
第二章 NK130102 和氟苯虫酰胺处理的亚洲玉米螟转录组测序第33-57页
   ·材料与方法第33-37页
     ·供试昆虫第33页
     ·NK130102 和氟苯虫酰胺对亚洲玉米螟 2 龄幼虫的毒力测定第33-34页
     ·亚洲玉米螟 cDNA 文库的构建和 PGM 测序第34-36页
     ·亚洲玉米螟转录组的生物信息学分析第36-37页
   ·结果与分析第37-45页
     ·PGM 测序和组装第37-38页
     ·亚洲玉米螟转录组和其他昆虫的同源比对第38-40页
     ·亚洲玉米螟 unigenes 的功能注释与分类第40-41页
     ·亚洲玉米螟中重要的解毒代谢酶基因鉴定第41-42页
     ·亚洲玉米螟中重要的杀虫剂靶标基因鉴定第42页
     ·NK130102 和氟苯虫酰胺对亚洲玉米螟基因表达量的影响第42-45页
   ·讨论第45-57页
第三章 亚洲玉米螟鱼尼丁受体 cDNA 克隆与序列分析第57-82页
   ·实验材料第57-59页
     ·实验昆虫第57页
     ·实验仪器第57页
     ·实验试剂第57-58页
     ·常用培养基及溶液配制第58-59页
   ·实验方法第59-68页
     ·总 RNA 的提取第59页
     ·cDNA 第一链的合成第59-60页
     ·引物设计第60-62页
     ·PCR 扩增目的片段第62页
     ·cDNA 末端快速扩增(3'RACE)第62-63页
     ·PCR 产物纯化回收第63-64页
     ·DNA 的连接第64页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(Inoue 方法)第64-65页
     ·大肠杆菌感受态细胞的热激转化第65页
     ·重组质粒鉴定第65-66页
     ·目的片段测序与软件分析第66页
     ·诊断 PCR 分析鱼尼丁受体 cDNA 的可变剪接第66-67页
     ·亚洲玉米螟鱼尼丁受体在玉米螟不同龄期中的表达第67-68页
   ·结果与分析第68-79页
     ·总 RNA 提取第68-69页
     ·反转录 PCR 扩增目的片段(RT-PCR)第69-70页
     ·序列分析第70-76页
     ·选择性外显子的发育调控第76页
     ·鱼尼丁受体基因在亚洲玉米螟不同龄期中的表达第76-79页
   ·讨论第79-82页
第四章 NK130102 和氟苯虫酰胺对亚洲玉米螟 RyR mRNA 表达量的影响第82-88页
   ·实验材料第82页
     ·实验昆虫第82页
     ·实验仪器、供试药剂及实验试剂第82页
   ·实验方法第82-83页
     ·药剂处理亚洲玉米螟 2 龄幼虫第82-83页
     ·总 RNA 的提取第83页
     ·RNA 反转录成 cDNA第83页
     ·实时荧光定量 PCR第83页
   ·结果与分析第83-86页
     ·三种杀虫剂对亚洲玉米螟生长的影响第83-85页
     ·二酰胺类杀虫剂对亚洲玉米螟 2 龄幼虫的毒力测定结果第85页
     ·三种药剂对亚洲玉米螟鱼尼丁受体表达量的影响第85页
     ·不同浓度的氟苯虫酰胺对亚洲玉米螟鱼尼丁受体表达量的影响第85-86页
   ·讨论第86-88页
第五章 亚洲玉米螟鱼尼丁受体 gDNA 克隆及序列分析第88-97页
   ·实验材料第88-89页
     ·实验昆虫第88页
     ·实验仪器第88页
     ·实验试剂第88页
     ·常用培养基及溶液配制第88-89页
   ·实验方法第89-95页
     ·DNA 的提取第89页
     ·引物的设计第89-92页
     ·PCR 反应第92-93页
     ·溶液 DNA 回收第93-94页
     ·PCR 产物加 A第94页
     ·PCR 产物与载体连接第94页
     ·大肠杆菌感受态细胞的热激转化第94-95页
     ·重组质粒鉴定第95页
     ·目的片段测序与序列拼接第95页
   ·结果与分析第95-96页
     ·DNA 的提取第95-96页
     ·亚洲玉米螟鱼尼丁受体 gDNA 序列拼接及分析第96页
   ·讨论第96-97页
第六章 全文结论第97-99页
参考文献第99-108页
附录一第108-117页
附录二第117-136页
致谢第136-138页
作者简历第138-139页

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