嗜水气单胞菌噬菌体的生物学特性及基因组学研究
| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-30页 |
| 第一章 气单胞菌的研究进展 | 第12-20页 |
| 1 气单胞菌的分类及生物学特性 | 第12-13页 |
| 2 气单胞菌的致病性 | 第13-14页 |
| ·鱼类败血症 | 第13页 |
| ·人体内的感染 | 第13-14页 |
| 3 气单胞菌毒力因子 | 第14-16页 |
| ·胞外毒素 | 第14页 |
| ·胞外蛋白酶 | 第14-15页 |
| ·黏附因子 | 第15-16页 |
| 参考文献 | 第16-20页 |
| 第二章 气单胞菌噬菌体的研究进展 | 第20-30页 |
| 1 气单胞菌噬菌体的分类和形态结构 | 第20-21页 |
| ·尾病毒目 | 第20-21页 |
| ·肌尾病毒科 | 第21页 |
| ·短尾病毒科 | 第21页 |
| 2 气单胞菌噬菌体的生活周期 | 第21-22页 |
| ·烈性噬菌体的增殖 | 第21-22页 |
| ·溶源性噬菌体的传代 | 第22页 |
| 3 噬菌体的应用 | 第22-24页 |
| ·细菌分型 | 第22页 |
| ·疾病诊断 | 第22-23页 |
| ·分子生物学的研究工具 | 第23页 |
| ·细菌感染的治疗 | 第23-24页 |
| 4 噬菌体溶菌酶的研究 | 第24-25页 |
| ·T4溶菌酶的特性 | 第24页 |
| ·T7溶菌酶的特性 | 第24-25页 |
| 5 气单胞菌噬菌体基因组的研究 | 第25-28页 |
| ·气单胞菌噬菌体基因组的研究现状 | 第25页 |
| ·气单胞菌噬菌体基因组的组成 | 第25页 |
| ·气单胞菌噬菌体基因组的结构和功能特征 | 第25页 |
| ·噬菌体基因组的进化分析 | 第25-28页 |
| 参考文献 | 第28-30页 |
| 第二篇 试验研究 | 第30-70页 |
| 第三章 两株嗜水气单胞菌噬菌体的生物学特性研究 | 第30-48页 |
| 摘要 | 第30-31页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| ·菌株 | 第31页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第31页 |
| ·噬菌体分离与纯化 | 第31-32页 |
| ·噬菌体的保存 | 第32页 |
| ·噬菌体形态的电镜观察 | 第32页 |
| ·宿主范围的测定 | 第32页 |
| ·最适感染复数 | 第32页 |
| ·吸附速率测定 | 第32-33页 |
| ·一步生长曲线 | 第33页 |
| ·热稳定性 | 第33页 |
| ·pH稳定性 | 第33页 |
| ·核酸类型的测定 | 第33-34页 |
| ·滤液中噬菌体核酸的提取 | 第33-34页 |
| ·噬菌体核酸的酶解鉴定 | 第34页 |
| ·酶切图谱分析 | 第34页 |
| ·噬菌体颗粒SDS-PAGE分析 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-42页 |
| ·噬菌体的分离与纯化 | 第35页 |
| ·噬菌体形态 | 第35-36页 |
| ·宿主范围 | 第36-37页 |
| ·最适感染复数 | 第37-38页 |
| ·吸附速率 | 第38-39页 |
| ·一步生长曲线 | 第39页 |
| ·热稳定性 | 第39-40页 |
| ·pH稳定性 | 第40-41页 |
| ·核酸类型的测定及酶切图谱分析 | 第41-42页 |
| ·SDS-PAGE | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| Abstract | 第46-48页 |
| 第四章 噬菌体CC2基因组的生物信息学分析 | 第48-60页 |
| 摘要 | 第48-49页 |
| 1 材料与方法 | 第49-50页 |
| ·噬菌体DNA的提取 | 第49页 |
| ·噬菌体全基因组序列的测定,序列拼接 | 第49页 |
| ·基因组ORF的预测和序列的比对 | 第49-50页 |
| ·系统发生树分析 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-55页 |
| ·基因组结构的一般特征 | 第50页 |
| ·各ORF功能的预测 | 第50-53页 |
| ·系统发生树分析 | 第53-55页 |
| ·末端酶进化树的构建 | 第53页 |
| ·尾管蛋白进化树的构建 | 第53-54页 |
| ·DNA聚合酶进化树的构建 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-58页 |
| Abstract | 第58-60页 |
| 第五章 噬菌体CC2溶菌酶的表达纯化及活性检测 | 第60-70页 |
| 摘要 | 第60-61页 |
| 1 材料与方法 | 第61-63页 |
| ·菌株和质粒 | 第61页 |
| ·主要酶和试剂 | 第61页 |
| ·噬菌体原液的制备 | 第61页 |
| ·引物设计与合成和PCR反应 | 第61-62页 |
| ·噬菌体CC2溶菌酶基因的克隆 | 第62页 |
| ·pET-LysC表达载体的构建 | 第62页 |
| ·LysC蛋白的诱导表达 | 第62页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第62页 |
| ·LysC蛋白的纯化 | 第62-63页 |
| ·平板裂解法检测溶菌酶活性 | 第63页 |
| ·比浊法测定溶菌酶的裂解活性 | 第63页 |
| 2 结果 | 第63-66页 |
| ·lysC基因的克隆 | 第63页 |
| ·重组质粒pET-LysC的酶切图谱 | 第63-64页 |
| ·测序鉴定 | 第64页 |
| ·LysC蛋白表达产物的鉴定 | 第64-65页 |
| ·LysC对菌株的裂解效率试验 | 第65-66页 |
| ·平板裂解试验 | 第65页 |
| ·比浊法试验 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-68页 |
| Abstract | 第68-70页 |
| 全文总结 | 第70-72页 |
| 附录 | 第72-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
