摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
第一章 前言 | 第14-51页 |
第一节 肿瘤干细胞研究进展 | 第15-27页 |
·肿瘤干细胞认知之路 | 第15-16页 |
·肿瘤干细胞的起源 | 第16-17页 |
·肿瘤干细胞与肿瘤 | 第17-22页 |
·肿瘤干细胞在临床治疗中的意义 | 第22-27页 |
第二节 肿瘤干细胞与微环境 | 第27-34页 |
·神经胶质瘤干细胞的环血管微环境 | 第28-30页 |
·结肠癌中的千细胞龛 | 第30-31页 |
·肿瘤干细胞,去分化和上皮间充质转化(EMT) | 第31-32页 |
·肿瘤预转移(premetastatic)微环境 | 第32-33页 |
·结论 | 第33-34页 |
第三节 CD44与肿瘤干细胞 | 第34-43页 |
·CD44分子的结构 | 第34-36页 |
·CD44是干细胞和肿瘤干细胞的细胞表面标志物 | 第36-37页 |
·CD44与肿瘤干细胞调控 | 第37-43页 |
第四节 肿瘤相关巨噬细胞与肿瘤发展 | 第43-51页 |
·肿瘤组织从血液循环中募集单核细胞 | 第43-46页 |
·M1型和M2型巨噬细胞 | 第46-48页 |
·肿瘤相关巨噬细胞属于M2型巨噬细胞 | 第48-50页 |
·展望 | 第50-51页 |
第二章 材料与方法 | 第51-69页 |
第一节 实验试剂与配置方法 | 第51-54页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·部分常用试剂的配制 | 第51-54页 |
第二节 实验方法 | 第54-69页 |
·细胞培养 | 第54页 |
·原代肿瘤细胞分离与培养 | 第54-55页 |
·细胞转染 | 第55-56页 |
·流式细胞仪分选与分析 | 第56页 |
·免疫印迹(Western Blot) | 第56-58页 |
·细胞免疫荧光 | 第58页 |
·免疫组化和免疫组织荧光 | 第58-60页 |
·反转录PCR(RT-PCR) | 第60-61页 |
·实时定量PCR(Real-time PCR) | 第61-62页 |
·单克隆形成实验 | 第62-63页 |
·裸鼠体内肿瘤形成实验 | 第63页 |
·细胞迁移与侵袭实验 | 第63-64页 |
·质粒提取 | 第64-66页 |
·寡核苷酸的设计与合成 | 第66页 |
·包装病毒感染细胞 | 第66页 |
·构建GST-OPN重组质粒 | 第66-67页 |
·体外蛋白质表达与纯化 | 第67-68页 |
·氯膦酸二钠脂质体制备(参考Van Rooijen的方法) | 第68-69页 |
第三章 实验结果 | 第69-90页 |
第一节 肿瘤相关的巨噬细胞能够促进小鼠异源移植肿瘤的生长并表达大量的OPN分子 | 第69-74页 |
第二节 CD44阳性的结肠癌细胞能够促进巨噬细胞分泌OPN | 第74-79页 |
第三节 巨噬细胞分泌的OPN促进肿瘤细胞克隆形成能力 | 第79-82页 |
第四节 OPN激活肿瘤细胞内JNK信号通路 | 第82-84页 |
第五节 OPN与CD44v6的表达水平与结肠癌病人预后相关 | 第84-90页 |
第四章 讨论 | 第90-95页 |
参考文献 | 第95-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
个人简历 在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第111页 |