| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-18页 |
| ·肿瘤的基本概念 | 第12页 |
| ·什么是肿瘤 | 第12页 |
| ·良性肿瘤和恶性肿瘤 | 第12页 |
| ·肿瘤的概况和种类 | 第12-13页 |
| ·肿瘤的致癌因素和发病机制 | 第13-14页 |
| ·肿瘤的治疗和预防 | 第14-15页 |
| ·肿瘤的治疗 | 第14-15页 |
| ·肿瘤的预防 | 第15页 |
| ·乳腺癌 | 第15-16页 |
| ·乳腺癌概况 | 第15-16页 |
| ·乳腺癌的治疗 | 第16页 |
| ·子宫内膜癌 | 第16-18页 |
| ·子宫内膜癌概况 | 第16-17页 |
| ·子宫内膜癌的治疗 | 第17-18页 |
| 第二章 Artemin受HER2调节,通过促进肿瘤干细胞行为介导乳腺癌细胞的赫赛汀耐药性 | 第18-53页 |
| ·引言 | 第18-21页 |
| ·HER2概况和生物学背景 | 第18-19页 |
| ·ARTN概况和生物学背景 | 第19-20页 |
| ·HER2、ARTN与肿瘤干细胞的联系及相关研究 | 第20-21页 |
| ·实验材料和方法 | 第21-37页 |
| ·细胞培养 | 第21-22页 |
| ·建立稳转细胞系 | 第22-23页 |
| ·建立赫赛汀耐药性细胞株 | 第23页 |
| ·细胞的药物刺激处理 | 第23页 |
| ·Western Blot检测细胞蛋白水平 | 第23-28页 |
| ·实时定量PCR | 第28-30页 |
| ·细胞活力检测MTT | 第30-31页 |
| ·Soft Agar软琼脂克隆形成实验 | 第31页 |
| ·三维细胞培养(3D-culture) | 第31-32页 |
| ·小鼠体内成瘤实验 | 第32-33页 |
| ·免疫组织化学(IHC) | 第33-35页 |
| ·末端转移酶脱氧尿苷三磷酸末端标记(terminal transferase deoxyuri dinetriphosphate nick end labelling)(TUNEL)实验 | 第35-36页 |
| ·Mammosphere球囊形成实验 | 第36页 |
| ·流式细胞术 | 第36-37页 |
| ·临床样本分析 | 第37页 |
| ·实验结果 | 第37-53页 |
| ·通过表皮生长因子(EGF)以及神经生长因子(Heregul in) (HRG)激活HER2基因,ARTN的表达显著增加 | 第37-40页 |
| ·用赫赛汀抑制HER2能够导致ARTN表达水平的下降 | 第40-41页 |
| ·在体外细胞实验中,过表达ARTN能够降低乳腺癌细胞对于赫赛汀的敏感性 | 第41-43页 |
| ·在体外细胞实验中,敲除内源ARTN能够增加乳腺癌细胞对于赫赛汀的敏感性 | 第43-44页 |
| ·在体内小鼠成瘤实验中,过表达ARTN能够降低乳腺癌细胞对于赫赛汀的敏感性 | 第44-46页 |
| ·ARTN介导了乳腺癌细胞的赫赛汀获得性耐药性 | 第46-48页 |
| ·在赫赛汀耐药性乳腺癌细胞中ARTN调节了肿瘤干细胞(CSC)的群体比例 | 第48-51页 |
| ·在三维基质胶中,ARTN调节了赫赛汀耐药性乳腺癌细胞中肿瘤干细胞的生长 | 第51-53页 |
| 第三章 自分泌催乳素促进子宫内膜癌的生长、转移并降低对化疗药物的敏感性 | 第53-85页 |
| ·引言 | 第53-54页 |
| ·子宫内膜癌概论 | 第53页 |
| ·催乳素概况和生物学背景 | 第53页 |
| ·CD24概况和生物学背景 | 第53-54页 |
| ·我们的工作解决的问题 | 第54页 |
| ·实验材料和方法 | 第54-65页 |
| ·分子克隆质粒构建 | 第54-59页 |
| ·细胞培养 | 第59页 |
| ·建立稳转细胞系 | 第59页 |
| ·瞬时转染 | 第59-60页 |
| ·半定量PCR(普通PCR)以及实时定量PCR | 第60页 |
| ·Western Blot检测细胞蛋白水平 | 第60页 |
| ·细胞功能实验 | 第60-61页 |
| ·细胞计数实验 | 第61页 |
| ·5-溴脱氧尿嘧啶插入实验(BrdU) | 第61-62页 |
| ·细胞末端转移酶脱氧尿苷三磷酸末端标记(terminal transferasedeoxyuridine triphosphate nick end labelling)(TUNEL)实验 | 第62页 |
| ·Confocal激光共聚焦检测细胞骨架 | 第62-63页 |
| ·细胞分散实验 | 第63页 |
| ·Transwell(Migration,Invasion)细胞转移和侵袭实验 | 第63-64页 |
| ·Wound healing划痕愈合实验 | 第64页 |
| ·小鼠体内成瘤 | 第64-65页 |
| ·小鼠尾静脉注射肿瘤细胞检测细胞转移 | 第65页 |
| ·流式细胞术检测CD24 | 第65页 |
| ·实验结果 | 第65-85页 |
| ·自分泌催乳素促进子宫内膜癌的细胞增殖和致肿瘤性 | 第65-71页 |
| ·敲除内源催乳素降低子宫内膜癌的细胞增殖和致肿瘤性 | 第71-74页 |
| ·自分泌催乳素促进子宫内膜癌细胞的转移 | 第74-76页 |
| ·自分泌催乳素促进子宫内膜癌细胞在小鼠体内的生长和转移 | 第76-78页 |
| ·自分泌催乳素降低了子宫内膜癌细胞对于阿霉素和紫杉醇的敏感性 | 第78-82页 |
| ·催乳素通过CD24的调节降低子宫内膜癌细胞对于阿霉素和紫杉醇的敏感性 | 第82-85页 |
| 第四章 结论和讨论 | 第85-90页 |
| ·Artemin受HER2调节,通过促进肿瘤干细胞行为介导乳腺癌细胞的赫赛汀耐药性 | 第85-87页 |
| ·自分泌催乳素促进子宫内膜癌的生长、转移并降低对化疗药物的敏感性 | 第87-90页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
| 附录1 实时定量PCR引物 | 第97-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第102页 |
