| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 植物在各种非生物胁迫下的调节途径 | 第12-14页 |
| 2 植物耐逆相关基因的功能研究 | 第14-16页 |
| 3 ABA在植物非生物胁迫信号传递中的作用 | 第16-19页 |
| 4 植物钾转运蛋白和调控蛋白的研究进展 | 第19-22页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 拟南芥非生物胁迫敏感突变体的筛选 | 第24-46页 |
| 1 材料与方法 | 第24-30页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·逆境相关基因的筛选 | 第25页 |
| ·拟南芥的培养 | 第25页 |
| ·突变体的PCR鉴定 | 第25-27页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| ·突变体中的纯合体的PCR鉴定 | 第26-27页 |
| ·纯合突变体RT-PCR检测 | 第27-28页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第27页 |
| ·反转录合成cDNA | 第27页 |
| ·RT-PCR分析 | 第27-28页 |
| ·突变体的耐逆性分析 | 第28-30页 |
| ·突变体的耐热性分析 | 第28页 |
| ·突变体的耐盐性分析 | 第28-29页 |
| ·突变体的耐旱性分析 | 第29页 |
| ·突变体耐受渗透胁迫分析 | 第29页 |
| ·突变体的耐冷性分析 | 第29页 |
| ·离体叶片失水率的测定 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-44页 |
| ·从水稻高温胁迫后的表达谱中筛选耐热相关基因 | 第30-31页 |
| ·突变体的DNA分子鉴定 | 第31-33页 |
| ·突变体的突变基因表达鉴定 | 第33页 |
| ·突变体的耐逆性鉴定 | 第33-42页 |
| ·高温胁迫对突变体幼苗的影响 | 第33-37页 |
| ·高盐胁迫对突变体幼苗的影响 | 第37-40页 |
| ·干旱胁迫对突变体植株的影响 | 第40-41页 |
| ·突变体叶片失水速率比较 | 第41页 |
| ·渗透胁迫对突变体幼苗的影响 | 第41-42页 |
| ·低温胁迫对突变体幼苗的影响 | 第42页 |
| ·突变体SALK_010430C在正常条件下生长受到抑制 | 第42-44页 |
| 3. 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 拟南芥UNC-93基因的功能分析 | 第46-106页 |
| 1 材料与方法 | 第46-55页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·菌株和质粒 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·拟南芥内源UNC-93基因表达分析的胁迫处理和材料准备 | 第46-47页 |
| ·遗传转化载体的构建与转化 | 第47-49页 |
| ·UNC-93过量表达载体的构建 | 第47页 |
| ·GUS和GFP融合表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·农杆菌的感受态制备及转化 | 第48-49页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化及阳性植株鉴定 | 第49页 |
| ·GUS检测 | 第49-50页 |
| ·GUS染色剂 | 第49-50页 |
| ·GUS染色 | 第50页 |
| ·UNC-93蛋白的亚细胞定位分析 | 第50页 |
| ·拟南芥DNA提取及PCR检测 | 第50页 |
| ·拟南芥总RNA提取、反转录及RT-PCR分析 | 第50-51页 |
| ·Real-time PCR | 第51-52页 |
| ·拟南芥生长发育表型观察与比较 | 第52-53页 |
| ·拟南芥茎结构的石蜡切片观察 | 第53页 |
| ·拟南芥耐逆性实验 | 第53页 |
| ·拟南芥ABA表型实验 | 第53-54页 |
| ·种子萌发实验 | 第53页 |
| ·幼苗生长实验 | 第53-54页 |
| ·钾营养缺陷对突变体、UNC-93过量表达和野生型拟南芥的影响分析 | 第54-55页 |
| ·突变体、UNC-93过量表达和野生型植株在不同钾营养条件下的培养 | 第54页 |
| ·植株的根冠钾含量测定 | 第54-55页 |
| ·低钾、低钾低铵MS培养基的配置 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-102页 |
| ·UNC-93基因的扩增与序列分析 | 第55-58页 |
| ·UNC-93的表达模式分析 | 第58-61页 |
| ·UNC-93在非生物胁迫和ABA处理后的表达量分析 | 第58-59页 |
| ·UNC-93在不同组织的表达模式 | 第59页 |
| ·UNC-93promoter：：GUS染色鉴定 | 第59-61页 |
| ·UNC-93亚细胞定位 | 第61-62页 |
| ·UNC-93基因的过量表达载体的构建 | 第62-63页 |
| ·遗传转化和转基因植株的阳性检测 | 第63-64页 |
| ·突变体和UNC-93过量表达转基因植株的耐逆性分析 | 第64-81页 |
| ·突变体和UNC-93过量表达转基因植株的耐盐性分析 | 第64-69页 |
| ·突变体和UNC-93过量表达转基因植株的耐受渗透胁迫能力分析 | 第69-72页 |
| ·突变体和UNC-93过量表达转基因植株的耐热性分析 | 第72-75页 |
| ·突变体和UNC-93过量表达转基因植株的耐冷性分析 | 第75-76页 |
| ·突变体和UNC-93过量表达转基因植株的耐旱性分析 | 第76页 |
| ·突变体和UNC-93过量表达转基因植株叶片失水速率分析 | 第76-78页 |
| ·耐逆相关基因在突变体和UNC-93过量表达转基因植株中的表达分析 | 第78-81页 |
| ·突变体和UNC-93过量表达转基因植株对ABA的敏感性分析 | 第81-86页 |
| ·ABA对突变体和UNC-93过量表达转基因植株在幼苗生长阶段的影响 | 第81页 |
| ·ABA对突变体和UNC-93过量表达转基因株系在种子萌发阶段的影响 | 第81-84页 |
| ·ABA响应基因在突变体和UNC-93过量表达转基因植株中的表达变化 | 第84-86页 |
| ·突变体、UNC-93过量表达和野生型植株正常生长的表型差异 | 第86-92页 |
| ·突变体、UNC-93过量表达和野生型植株在幼苗生长上的表型分析 | 第86页 |
| ·突变体、UNC-93过量表达和野生型植株在抽薹开花后生长上的表型分析 | 第86页 |
| ·突变体、UNC-93过量表达和野生型植株茎细胞结构观察 | 第86-90页 |
| ·突变体、UNC-93过量表达和野生型根和下胚轴的生长差异 | 第90-92页 |
| ·钾营养缺陷对突变体、UNC-93过量表达和野生型植株的影响 | 第92-99页 |
| ·钾营养缺陷条件下突变体、UNC-93过量表达和野生型植株的生物量比较 | 第92-93页 |
| ·突变体、UNC-93过量表达和野生型植株的根冠钾含量比较 | 第93-94页 |
| ·不同浓度K~+或者NH_4~+对突变体、UNC-93过量表达和野生型植株生长的影响 | 第94-96页 |
| ·低钾条件下,不同浓度NH_4~+对突变体、UNC-93过量表达和野生型种子萌发和幼苗生长的影响 | 第96页 |
| ·拟南芥钾通道基因在突变体、UNC-93过量表达和野生型植株中的表达分析 | 第96-99页 |
| ·突变体遗传互补后的功能分析 | 第99-102页 |
| ·互补载体的遗传转化及检测 | 第99-100页 |
| ·互补株系的耐逆性检测 | 第100-101页 |
| ·互补株系在株型上的恢复 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-106页 |
| ·UNC-93受逆境诱导表达并具有组织表达特异性 | 第102-103页 |
| ·UNC-93对提高植物幼苗生长时期的耐逆性具有重要作用 | 第103-104页 |
| ·UNC-93可能参与ABA的信号转导 | 第104页 |
| ·UNC-93能调控植物对钾的运输并促进植株生长 | 第104-105页 |
| ·遗传互补的功能验证 | 第105-106页 |
| 全文总结 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 作者简历 | 第121页 |
