西瓜检疫性病害PCR检测体系建立
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文章综述 | 第11-23页 |
| 1 黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的研究进展 | 第11-17页 |
| ·CGMMV的分布与危害 | 第11-12页 |
| ·CGMMV的分类 | 第12页 |
| ·CGMMV的基因组结构和功能 | 第12-13页 |
| ·CGMMV的传播方式 | 第13页 |
| ·CGMMV的检测 | 第13-17页 |
| ·生物学检测法 | 第14页 |
| ·电镜检测法 | 第14-15页 |
| ·血清学检测法 | 第15页 |
| ·分子生物学检测法 | 第15-17页 |
| 2 BFB的研究进展 | 第17-22页 |
| ·BFB的分布与危害 | 第17页 |
| ·病原菌的生物学特性 | 第17-18页 |
| ·BFB的防治 | 第18页 |
| ·BFB检测技术研究进展 | 第18-22页 |
| ·传统检测法 | 第19页 |
| ·血清学检测法 | 第19-20页 |
| ·分子生物学检测法 | 第20-22页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 CGMMV的分子生物学快速检测体系的建立 | 第23-33页 |
| 1 材料、试剂和设备 | 第23页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-28页 |
| ·CGMMV的初步鉴定 | 第23-24页 |
| ·CGMMV的分子生物学鉴定 | 第24-26页 |
| ·RT-PCR引物的设计与合成 | 第24页 |
| ·病叶及种子总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR | 第25页 |
| ·PCR产物的检测 | 第25-26页 |
| ·CGMMV的分子生物学的确定 | 第26-27页 |
| ·目标片段的连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第26页 |
| ·转化 | 第26页 |
| ·菌落PCR检测 | 第26-27页 |
| ·质粒的制备 | 第27页 |
| ·目标片段测序 | 第27页 |
| ·快速检测标准体系的建立 | 第27-28页 |
| ·总RNA的提取 | 第28页 |
| ·分子生物学的检测 | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-33页 |
| ·CGMMV的生物学初步鉴定 | 第28-29页 |
| ·CGMMV的RT-PCR检测 | 第29-31页 |
| ·总RNA的提取 | 第29页 |
| ·RT-PCR检测结果 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR检测结果的确认 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR快速检测体系的建立 | 第31-33页 |
| 第三章 西瓜果斑病种子带菌PCR检测体系的建立 | 第33-40页 |
| 1 材料 | 第33页 |
| ·研究材料 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·仪器设备 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-36页 |
| ·细菌性果斑病的初步确定 | 第33页 |
| ·细菌性果斑病的分子生物学检测 | 第33-35页 |
| ·引物的设计 | 第33-34页 |
| ·材料总DNA的提取 | 第34页 |
| ·PCR | 第34页 |
| ·PCR产物检测 | 第34页 |
| ·分子生物学检测结果确定 | 第34-35页 |
| ·大批量种子BFB快速检测体系的建立 | 第35-36页 |
| ·模板的制备 | 第35页 |
| ·PCR扩增 | 第35-36页 |
| ·PCR结果检测 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-40页 |
| ·细菌性果斑病的初步确定 | 第36页 |
| ·细菌性果斑病的分子生物学检测 | 第36-38页 |
| ·总DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增及电泳 | 第37-38页 |
| ·分子生物学检测结果的确定 | 第38页 |
| ·大批量种子BFB快速检测体系的建立 | 第38-40页 |
| ·不同带菌率对检测的影响 | 第38-39页 |
| ·不同浸提时间对检测的影响 | 第39-40页 |
| 第四章 PCR检测体系的应用 | 第40-43页 |
| 1 材料、试剂及仪器 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·仪器 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41页 |
| ·总RNA及模板的制备 | 第41页 |
| ·引物的合成 | 第41页 |
| ·RT-PCR和PCR | 第41页 |
| ·电泳 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-43页 |
| 第五章 讨论与小结 | 第43-47页 |
| 1 讨论 | 第43-45页 |
| 2 小结 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
