| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-21页 |
| ·富组氨酸糖蛋白的结构特点 | 第12-15页 |
| ·富组氨酸糖蛋白（HRG）的生物活性 | 第15-19页 |
| ·调节血管新生 | 第15-17页 |
| ·调节免疫复合物的清除和 FcγR 介导的吞噬作用 | 第17页 |
| ·调节凝血和纤溶功能 | 第17-18页 |
| ·调节细胞增殖和吸附 | 第18页 |
| ·pH 感受器和锌离子检测器 | 第18-19页 |
| ·抑菌活性 | 第19页 |
| ·结语 | 第19-21页 |
| 2 生物信息学分析 | 第21-25页 |
| ·数据库与软件 | 第21页 |
| ·方法 | 第21页 |
| ·一级结构分析 | 第21页 |
| ·二级结构预测 | 第21页 |
| ·结果 | 第21-25页 |
| ·野生型 Lj-RGD3 一级结构分析 | 第21-22页 |
| ·野生型 Lj-RGD3 信号肽分析及其二级结构 | 第22-25页 |
| 3 野生型 rLj-RGD3 及其突变体蛋白的基因合成、蛋白的诱导表达、纯化及鉴定 | 第25-36页 |
| ·材料、试剂 | 第25页 |
| ·rLj-RGD3 重组蛋白及其六种突变体蛋白的制备 | 第25-29页 |
| ·六种突变体目的基因片段的合成 | 第25页 |
| ·六种突变体重组质粒的提取 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| ·重组质粒转化入 E.coli BL21 表达菌中 | 第26-27页 |
| ·提取质粒做基因测序检验 | 第27页 |
| ·IPTG 诱导表达蛋白 | 第27页 |
| ·七种重组蛋白的表达及提纯 | 第27-28页 |
| ·Tricine-SDS PAGE 电泳 | 第28-29页 |
| ·用考马斯亮蓝 G-250 法测定纯化蛋白的浓度 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-34页 |
| ·野生型 Lj-RGD3 的蛋白序列比对分析 | 第29-30页 |
| ·七种重组蛋白的 cDNA 序列合成及其推导的氨基酸序列 | 第30-32页 |
| ·目的基因质粒的提取及表达菌的转化 | 第32-33页 |
| ·七种重组蛋白的 IPTG 诱导表达 | 第33页 |
| ·七种重组蛋白的纯化及鉴定 | 第33页 |
| ·七种重组蛋白的蛋白质浓度测定 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·结论 | 第35-36页 |
| 4 rLj-RGD3 与其六种突变体蛋白抗血管新生活性的比较 | 第36-51页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·细胞培养 | 第36页 |
| ·细胞增殖实验 | 第36-37页 |
| ·鸡胚绒毛尿囊膜实验 | 第37页 |
| ·HUVEC 细胞的迁移实验 | 第37-38页 |
| ·HUVEC 细胞的浸润实验 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-48页 |
| ·对 bFGF 诱导的 HUVEC 细胞增殖的抑制作用 | 第38-41页 |
| ·对 bFGF 诱导的鸡绒毛尿囊膜（CAM）血管新生的抑制作用 | 第41-44页 |
| ·HUVEC 细胞的迁移和浸润实验 | 第44-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| 5 rLj-RGD3 与其突变体蛋白抗真菌活性的比较 | 第51-63页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-53页 |
| ·用牛津杯法检测 rLj-RGD3 及突变体蛋白的抑菌活性 | 第51-52页 |
| ·用稀释法测定 rLj-112 的最小抑菌浓度（MIC）及抑菌率 | 第52页 |
| ·测定 rLj-112 的杀菌动力学（Time-kill）曲线 | 第52-53页 |
| ·rLj-RGD3 及突变体处理后白色念珠菌的扫描电镜观察 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-61页 |
| ·用牛津杯法比较 rLj-RGD3 及各突变体蛋白的抑菌活性 | 第53-55页 |
| ·用牛津杯法测定浓度梯度的突变体 rLj-112 的抑菌活性 | 第55-57页 |
| ·最小抑菌浓度（MIC）及抑菌率的测定 | 第57-59页 |
| ·测定 rLj-112 的杀菌动力学（Time-kill）曲线 | 第59-60页 |
| ·rLj-RGD3 及突变体处理后白色念珠菌的扫描电镜观察 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 结论及展望 | 第63-64页 |
| 本论文创新点 | 第64页 |
| 下一步研究计划 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
