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GGPS基因在番茄中的无选择标记遗传转化研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-24页
   ·番茄红素的研究进展第12-19页
     ·番茄红素的理化特性第12-13页
     ·番茄红素的功能特性第13页
     ·番茄红素的生物合成第13-18页
     ·番茄红素的提取和检测方法第18-19页
   ·无选择标记转基因作物的研究进展第19-22页
     ·转基因作物的种植情况第19-20页
     ·标记基因的安全性问题第20页
     ·无选择标记的转基因技术第20-22页
   ·研究目的意义及技术路线第22-24页
     ·研究目的和意义第22-23页
     ·技术路线第23-24页
第二章 多毛番茄 GGPS 基因无选择标记载体的构建第24-32页
   ·材料第24页
     ·菌株与载体第24页
     ·试剂第24页
   ·方法第24-28页
     ·pBI121-GGPS 质粒和 pBINMF-GUS 质粒的提取第25页
     ·XmaⅠ、XbaⅠ双酶切载体 pBI121-GGPS 和 pBINMF-GUS第25-26页
     ·GGPS 基因连接到载体 pBINMF-GUS 及大肠杆菌的转化第26页
     ·PCR 筛选 GGPS 阳性克隆第26-27页
     ·XmaⅠ/XbaⅠ双酶切鉴定重组质粒第27页
     ·农杆菌 EHA105、C58 感受态的制备第27页
     ·冻融法转化农杆菌及鉴定第27-28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·目的基因 GGPS 及线性化载体 pBINMF-GUS 的获得第28页
     ·GGPS 连接到无选择标记表达载体 pBINMF-GUS 及 PCR 鉴定第28-29页
     ·XmaⅠ/XbaⅠ双酶切检测大肠杆菌重组质粒第29页
     ·重组质粒 pBINMF-GGPS 导入农杆菌 EHA105、C58第29-31页
   ·讨论第31-32页
第三章 多毛番茄 GGPS 基因对番茄的无标记遗传转化第32-41页
   ·材料和方法第32-37页
     ·材料第32-33页
     ·优化番茄再生体系第33页
     ·农杆菌菌液的准备第33页
     ·番茄子叶外植体的准备与侵染、诱导与分化第33-34页
     ·番茄再生苗 DNA 的提取第34页
     ·阳性转基因植株的筛选第34-36页
     ·GUS 化学染色检测转基因植株第36页
     ·半定量 RT-PCR第36-37页
   ·结果与分析第37-40页
     ·不同激素组合对番茄不定芽的形成及分化的影响第37-38页
     ·农杆菌菌株 EHA105、C58 对番茄子叶转化率的影响第38页
     ·转基因番茄目的基因 GGPS 的 PCR 及 RT-PCR 鉴定第38-39页
     ·转基因番茄植株的 GUS 化学染色检测第39-40页
   ·讨论第40-41页
     ·影响番茄离体再生的主要因素第40页
     ·影响番茄转化效率的因素第40-41页
第四章 转基因植株类胡萝卜素的测定第41-47页
   ·材料与方法第41-43页
     ·材料第41页
     ·主要试剂第41页
     ·浸提法提取转基因番茄叶片叶绿素第41-42页
     ·高效液相色谱法测定转基因番茄果实类胡萝卜素第42-43页
   ·结果与分析第43-46页
     ·转基因番茄植株叶片叶绿素的测定第43页
     ·转基因植株果实类胡萝卜素的测定第43-46页
   ·讨论第46-47页
第五章 全文结论第47-48页
参考文献第48-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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