| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| ·口服疫苗的研究进展 | 第13-17页 |
| ·人用口服疫苗的研究进展 | 第13页 |
| ·兽用口服疫苗的研究进展 | 第13-14页 |
| ·水产口服免疫研究进展 | 第14-17页 |
| ·水产口服免疫佐剂 | 第17-19页 |
| ·口服疫苗免疫佐剂作用机理 | 第17页 |
| ·几种主要的水产口服免疫佐剂 | 第17-18页 |
| ·细胞因子 | 第18-19页 |
| ·其他口服免疫佐剂 | 第19页 |
| ·LTB的研究进展 | 第19-22页 |
| ·LT的结构和组成 | 第19-20页 |
| ·LT的免疫原性及机理 | 第20-21页 |
| ·LTB的佐剂作用 | 第21-22页 |
| ·研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的表达纯化及其毒性研究 | 第23-31页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·细菌 | 第23页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·主要试剂及材料 | 第23页 |
| ·主要试剂及培养基的配置 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的表达纯化 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的毒性研究 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-29页 |
| ·重组LTB蛋白的最佳表达时间 | 第27页 |
| ·重组LTB的纯化浓缩结果 | 第27-28页 |
| ·LTB的毒性 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| ·LTB的表达 | 第29-30页 |
| ·LTB的毒性 | 第30-31页 |
| 3 罗非鱼抗体检测间接ELISA方法的建立 | 第31-45页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·实验鱼 | 第31页 |
| ·细菌 | 第31页 |
| ·疫苗 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·主要试剂及材料 | 第31页 |
| ·主要溶液的配置 | 第31-33页 |
| ·方法 | 第33-36页 |
| ·罗非鱼IgM的纯化及多克隆抗体的制备 | 第33-35页 |
| ·罗非鱼抗体间接ELISA方法的建立 | 第35-36页 |
| ·实验结果 | 第36-42页 |
| ·提纯后IgM的浓度 | 第36-37页 |
| ·罗非鱼提纯IgM SDS-PAGE电泳以及Westen Blotting结果 | 第37-38页 |
| ·抗原浓度测定结果 | 第38页 |
| ·最适反应温度 | 第38-39页 |
| ·抗原最适包被时间 | 第39页 |
| ·抗原及待测血清浓度的最佳稀释度 | 第39-40页 |
| ·兔抗罗非鱼及酶标二抗的最佳稀释度 | 第40-41页 |
| ·粘膜抗体检测抗体检测条件的优化 | 第41-42页 |
| ·最终ELISA优化结果 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·关于罗非鱼IgM的提纯 | 第42-43页 |
| ·ELISA方法的建立 | 第43-45页 |
| 4 LTB对罗非鱼链球菌疫苗的免疫增强效应研究 | 第45-61页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·实验鱼 | 第45页 |
| ·LTB | 第45页 |
| ·联合疫苗的制作 | 第45-46页 |
| ·细菌 | 第46页 |
| ·实验试剂 | 第46页 |
| ·方法 | 第46页 |
| ·罗非鱼的免疫 | 第46页 |
| ·免疫保护率的检测 | 第46页 |
| ·血清及粘膜抗体采集及检测 | 第46页 |
| ·血清非特异性免疫指标检测 | 第46页 |
| ·数据分析 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-58页 |
| ·免疫保护率结果 | 第46-48页 |
| ·血清抗体检测结果 | 第48-50页 |
| ·肠道粘膜抗体检测结果 | 第50-51页 |
| ·溶菌酶活力检测结果 | 第51-53页 |
| ·LTB对超氧化物歧化酶(SOD)的影响 | 第53-55页 |
| ·LTB对酸性磷酸酶(ACP)的影响 | 第55-57页 |
| ·LTB对碱性磷酸酶(AKP)的影响 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| ·LTB的佐剂活性 | 第58-60页 |
| ·关于LTB的非特异性免疫效应研究 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第72页 |
