| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 第一部分 肝素抗体双夹心ELISA法检测MK的建立 | 第19-31页 |
| 一、 实验材料与方法 | 第19-23页 |
| （一） 实验材料 | 第19-20页 |
| 1、 主要化学药品和生物试剂 | 第19页 |
| 2、 血液样本的收集和处理 | 第19页 |
| 3、 ELISA溶液配制 | 第19-20页 |
| 4、 主要实验仪器 | 第20页 |
| （二） 实验方法 | 第20-23页 |
| 1、 ELISA检测MK的操作步骤 | 第20-21页 |
| 2、 检测条件优化 | 第21页 |
| 3、 检测性能评价 | 第21页 |
| 4、 方法学比较 | 第21页 |
| 5、 血清MK含量检测 | 第21页 |
| 6、 MK和PTN双因子总量检测的初步研究 | 第21-22页 |
| 7、 统计分析方法 | 第22-23页 |
| 二、 实验结果 | 第23-28页 |
| （一） 生物素化肝素与MK单克隆抗体工作浓度的优化 | 第23页 |
| （二） 标准曲线的绘制 | 第23-24页 |
| （三） 检测性能评价 | 第24-26页 |
| 1、 分析灵敏度 | 第24页 |
| 2、 回收试验 | 第24-25页 |
| 3、 线性 | 第25-26页 |
| 4、 精密度试验 | 第26页 |
| （四） 与市售MK试剂盒比较 | 第26-27页 |
| （五） MK和PTN双因子总量检测结果 | 第27页 |
| （六） 肝癌血清MK含量检测结果 | 第27-28页 |
| 三、 讨论 | 第28-31页 |
| 第二部分 MK诱导EMT促进肝癌细胞侵袭、转移的初步研究 | 第31-47页 |
| 一、 实验材料与方法 | 第31-39页 |
| （一） 实验材料 | 第31-34页 |
| 1、 主要化学药品和生物试剂 | 第31-32页 |
| 2、 细胞系 | 第32页 |
| 3、 组织切片 | 第32页 |
| 4、 主要溶液配制 | 第32-33页 |
| 5、 主要实验器材 | 第33-34页 |
| （二） 实验方法 | 第34-39页 |
| 1、 MK诱导肝癌细胞EMT的实验研究 | 第34-36页 |
| 2、 临床肝癌样本MK、EMT分子标志物和CTCs的检测 | 第36-38页 |
| 3、 统计分析方法 | 第38-39页 |
| 二、 结果 | 第39-44页 |
| （一） MK诱导肝癌细胞发生EMT的实验研究 | 第39-41页 |
| 1、 MK可促进肝癌细胞增殖、侵袭 | 第39-40页 |
| 2、 MK可诱导肝癌细胞发生EMT | 第40-41页 |
| （二） 临床肝癌标本MK表达与EMT标志物表达、CTCs和临床病理学指标的相关性分析 | 第41-44页 |
| 1、 肝癌组织MK表达高于癌旁肝组织 | 第41页 |
| 2、 肝癌血清MK含量与肝癌组织MK表达正相关 | 第41-42页 |
| 3、 肝癌组织高表达MK与TNM分期和肝内转移有关 | 第42-43页 |
| 4、 肝癌组织MK表达与Ecadherin表达负相关 | 第43页 |
| 5、 肝癌组织MK表达与肝癌CTCs正相关 | 第43-44页 |
| 三、 讨论 | 第44-47页 |
| 全文小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 综述 | 第53-63页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
