| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 1 副猪嗜血杆菌研究进展 | 第14-22页 |
| ·副猪嗜血杆菌的生物学特性 | 第14-16页 |
| ·形态学特征 | 第14页 |
| ·理化特性 | 第14-15页 |
| ·培养特性 | 第15页 |
| ·血清型研究进展 | 第15-16页 |
| ·副猪嗜血杆菌的危害及防治 | 第16-17页 |
| ·流行病学 | 第16-17页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的防治 | 第17页 |
| ·诊断方法 | 第17-18页 |
| ·毒力因子的研究现状 | 第18-21页 |
| ·主要毒力因子及其致病机制 | 第18-19页 |
| ·外膜蛋白的相关研究 | 第19-21页 |
| ·生物信息学研究进展 | 第21-22页 |
| ·生物信息学产生背景及发展现状 | 第21页 |
| ·生物信息学的研究课题 | 第21页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| 2 实验目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 副猪嗜血杆菌的分离鉴定与耐药性检测 | 第23-34页 |
| 1 实验材料 | 第23-25页 |
| ·病料来源 | 第23页 |
| ·实验动物 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要溶液的配制 | 第24页 |
| ·主要培养基及其配制 | 第24-25页 |
| ·PCR鉴定的引物设计合成 | 第25页 |
| ·主要实验器材 | 第25页 |
| 2 实验方法和步骤 | 第25-28页 |
| ·病原菌分离纯化 | 第25-26页 |
| ·分离株的微生物特性 | 第26-27页 |
| ·细菌形态观察 | 第26页 |
| ·NAD试验 | 第26页 |
| ·CAMP试验 | 第26页 |
| ·生化试验 | 第26页 |
| ·药敏试验 | 第26-27页 |
| ·16SrDNA PCR方法的鉴定 | 第27页 |
| ·血清型鉴定 | 第27页 |
| ·HPS菌株保种 | 第27页 |
| ·致病性试验 | 第27-28页 |
| ·活菌计数 | 第27-28页 |
| ·动物接种 | 第28页 |
| 3 结果分析 | 第28-32页 |
| ·病死猪的临床症状及剖检病理变化 | 第28-29页 |
| ·细菌的分离培养及微生物特性 | 第29页 |
| ·生化实验鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·药敏试验 | 第30-31页 |
| ·16SrDNA PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·血清型鉴定 | 第32页 |
| ·致病力试验 | 第32页 |
| 4 讨论与结论 | 第32-34页 |
| 第三章 副猪嗜血杆菌ompP2基因的克隆 | 第34-43页 |
| 1 实验材料 | 第34-35页 |
| ·菌株和质粒 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·培养基的制备 | 第34-35页 |
| ·主要溶液的配制 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-40页 |
| ·副猪嗜血杆菌外膜蛋白ompP2基因的PCR扩增 | 第35-37页 |
| ·引物设计与合成 | 第35页 |
| ·HPS菌种复苏 | 第35-36页 |
| ·ompP2基因的PCR扩增 | 第36页 |
| ·PCR扩增产物电泳检测 | 第36-37页 |
| ·目的基因的克隆 | 第37-40页 |
| ·ompP2基因PCR产物纯化回收 | 第37页 |
| ·CaCl_2法制备DH5α感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| ·PCR纯化产物与T载体的连接 | 第38页 |
| ·重组质粒转化感受态细胞 | 第38页 |
| ·PCR产物重组质粒的鉴定 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-41页 |
| ·ompP2基因PCR扩增结果 | 第40页 |
| ·pMD-ompP2重组质粒的构建结果 | 第40-41页 |
| ·重组质粒双酶切鉴定结果 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 副猪嗜血杆菌ompP2基因的生物信息学分析 | 第43-57页 |
| 1 实验材料 | 第43页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·主要生物信息学分析软件 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-46页 |
| ·序列测定 | 第43页 |
| ·ompP2基因的核苷酸序列同源性和进化树分析 | 第43-45页 |
| ·ompP2成熟蛋白的氨基酸序列推导及其同源性和进化树分析 | 第45页 |
| ·ompP2成熟蛋白的跨膜区、表面性、亲水性与抗原性预测 | 第45页 |
| ·ompP2成熟蛋白二级结构预测 | 第45-46页 |
| 3 结果分析 | 第46-56页 |
| ·开放阅读框(ORF)特征 | 第46页 |
| ·ompP2基因的信号肽分析结果 | 第46-47页 |
| ·推导的ompP2成熟蛋白的氨基酸序列 | 第47-48页 |
| ·同源性和进化树分析结果 | 第48-52页 |
| ·ompP2成熟蛋白的跨膜区、表面性、亲水性与抗原性预测结果 | 第52-54页 |
| ·plpE成熟蛋白二级结构预测结果 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| ·关于生物信息学 | 第56页 |
| ·ompP2基因的分子特性分析 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
