摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 穿膜蛋白Tat研究进展 | 第12-16页 |
·穿膜蛋白概述 | 第12页 |
·Tat蛋白简介 | 第12-13页 |
·Tat蛋白的转导机理 | 第13-14页 |
·Tat蛋白的应用 | 第14-16页 |
2 FLP重组酶的研究进展 | 第16-20页 |
·特异位点重组酶的概述 | 第16页 |
·FLP的简介 | 第16-17页 |
·Frt的简介 | 第17-18页 |
·FLP/Frt系统的作用方式 | 第18页 |
·FLP/Frt的应用 | 第18-20页 |
3 背景介绍 | 第20页 |
4 研究目的及意义 | 第20-21页 |
5 技术路线 | 第21-22页 |
第二章 原核表达载体与酶活鉴定载体的构建 | 第22-31页 |
1 试剂与仪器 | 第22-23页 |
·菌种与质粒 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·仪器设备 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-29页 |
·材料 | 第23页 |
·方法 | 第23-29页 |
·pET28a-Tat-FLPe的构建 | 第23-25页 |
·pET22b-Tat-FLPe、pET30a-Tat-FLPe、pET32a-Tat-FLPe载体的构建 | 第25-26页 |
·酶活鉴定载体的构建 | 第26页 |
·原核表达检验 | 第26-29页 |
3 结果与分析 | 第29-31页 |
第三章 pET32-Tat-FLPe表达条件优化 | 第31-38页 |
1 试剂与仪器 | 第31页 |
·菌种与质粒 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·仪器设备 | 第31页 |
2 材料与方法 | 第31-33页 |
·密码子优化 | 第31-33页 |
·诱导条件优化 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-38页 |
第四章 Tat-FLPe纯化与活性鉴定 | 第38-46页 |
1 仪器与试剂 | 第38页 |
·主要试剂材料 | 第38页 |
·仪器设备 | 第38页 |
2 材料与方法 | 第38-42页 |
Tat-FLPe的纯化 | 第38-42页 |
3 结果与分析 | 第42-46页 |
第五章 讨论 | 第46-49页 |
1 FLPe的优势 | 第46页 |
2 原核表达载体的选择 | 第46页 |
3 密码子优化 | 第46-47页 |
4 诱导条件优化 | 第47页 |
5 纯化步骤 | 第47-48页 |
6 进一步工作重点 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55页 |