| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 目次 | 第11-15页 |
| 图清单 | 第15-17页 |
| 表清单 | 第17-18页 |
| 1 绪论 | 第18-33页 |
| ·农用抗生素 | 第18-23页 |
| ·农用抗生素的发展 | 第18-19页 |
| ·农抗的作用机理 | 第19-23页 |
| ·核苷类抗生素概况 | 第23-25页 |
| ·丰加霉素的研究现状 | 第25页 |
| ·链霉菌遗传转化方法 | 第25-27页 |
| ·PEG-介导的原生质体转化 | 第26页 |
| ·电击转化 | 第26-27页 |
| ·接合转移 | 第27页 |
| ·适用于链霉菌外源基因表达的启动子 | 第27-28页 |
| ·透明颤菌血红蛋白及其基因的研究进展 | 第28-31页 |
| ·透明颤菌血红蛋白简介 | 第28-29页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的表达与调控 | 第29-30页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的作用机制 | 第30页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的应用 | 第30-31页 |
| ·本论文研究的内容及意义 | 第31-33页 |
| 2 S. diastatochromogenes 1628遗传转化条件的优化 | 第33-53页 |
| ·材料 | 第33-37页 |
| ·菌种与质粒 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-35页 |
| ·抗生素和氨基酸 | 第35页 |
| ·缓冲液 | 第35-36页 |
| ·试剂 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-42页 |
| ·大肠杆菌质粒 DNA 的提取 | 第37页 |
| ·链霉菌总 DNA 的提取 | 第37页 |
| ·链霉菌质粒 DNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及 DNA 转化 | 第38页 |
| ·淀粉酶产色链霉菌对抗生素的敏感性 | 第38页 |
| ·链霉菌原生质体的制备及转化 | 第38-40页 |
| ·电击转化 | 第40-41页 |
| ·接合转移 | 第41页 |
| ·转化子的检测 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-52页 |
| ·S. diastatochromogenes 1628 对抗生素的敏感性 | 第42-43页 |
| ·S. diastatochromogenes 1628 原生质体的制备与再生 | 第43-47页 |
| ·PEG-介导的质粒转化 S. diastatochromogenes 1628 原生质体 | 第47-48页 |
| ·电击转化 | 第48-50页 |
| ·接合转移 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 3 绿色荧光蛋白基因gfp在大肠杆菌和1628中的克隆与表达 | 第53-63页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·菌种与质粒 | 第53-54页 |
| ·培养基及主要仪器 | 第54页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·PCR 扩增 gfp 基因和 apr 基因 | 第54-55页 |
| ·割胶回收 | 第55页 |
| ·连接 | 第55页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第55页 |
| ·SDS-PAGE | 第55-56页 |
| ·接合转移实验 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-62页 |
| ·重组质粒 pET28a-gfp 的构建 | 第56-58页 |
| ·绿色荧光蛋白在大肠杆菌中的表达及验证 | 第58-59页 |
| ·重组质粒 pIB139-gfp 的构建 | 第59-61页 |
| ·重组菌 1628-GFP 的荧光检测 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| 4 透明颤菌血红蛋白基因vgb在1628中的表达及对丰加霉素产量的影响 | 第63-78页 |
| ·引言 | 第63页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·菌种与质粒 | 第63页 |
| ·培养基，主要仪器及试剂 | 第63-64页 |
| ·工具酶 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-67页 |
| ·透明颤菌血红蛋白基因（vgb）的扩增 | 第64页 |
| ·割胶回收，连接 | 第64页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第64-65页 |
| ·质粒的提取 | 第65页 |
| ·酶切 | 第65页 |
| ·CO-差光色谱法检测 VHb | 第65-66页 |
| ·丰加霉素的 HPLC 检测 | 第66-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-77页 |
| ·重组质粒 pET28a-vgb 的构建 | 第67-69页 |
| ·vgb 在大肠杆菌中的表达及检测 | 第69-71页 |
| ·重组质粒 pIB139-vgb 的构建 | 第71-72页 |
| ·重组菌 1628-VHB 的构建、筛选及鉴定 | 第72-73页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的表达对 1628 菌体生长的影响 | 第73-74页 |
| ·透明颤菌血红蛋白的表达对丰加霉素产量的影响 | 第74-75页 |
| ·高产丰加霉素基因工程菌的筛选 | 第75-77页 |
| ·转化子 1628-VHB 的遗传稳定性 | 第77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| 5 总结、创新与展望 | 第78-81页 |
| ·全文总结 | 第78-79页 |
| ·创新点 | 第79页 |
| ·课题展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 作者简历 | 第87页 |
