摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
符号及縮略语 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 RopGEFs的结构和功能 | 第11-18页 |
·RopGEFs的发现 | 第11-13页 |
·RopGEFs的结构 | 第13-14页 |
·RopGEFs调节ROP的机制 | 第14-16页 |
·RopGEFs的生理功能 | 第16-18页 |
2 脱落酸(ABA)的生理功能和信号转导机制进展 | 第18-23页 |
·ABA的生理作用 | 第18-19页 |
·ABA信号转导机制研究进展 | 第19-23页 |
第二章 拟南芥中RopGEF4/8基因表达模式的分析 | 第23-47页 |
摘要 | 第23页 |
0 引言 | 第23-24页 |
1 材料与方法 | 第24-36页 |
·植物材料和培养 | 第24页 |
·质粒和菌株 | 第24页 |
·实验试剂和药品 | 第24-25页 |
·Trizol法提取拟南芥各组织总RNA | 第25-26页 |
·荧光定量qRT-PCR | 第26-27页 |
·拟南芥叶片DNA小量制备方法 | 第27-28页 |
·RopGEF4和RopGEF8启动子的克隆 | 第28-29页 |
·RopGEF4和RopGEF8启动子产物回收和T载体连接 | 第29页 |
·大肠杆菌DH5a热激感受态细胞的制备及转化 | 第29-30页 |
·大肠杆菌中质粒DNA的小量提取(碱裂解法) | 第30页 |
·菌落PCR、酶切鉴定阳性菌株并测序保菌 | 第30-31页 |
·农杆菌C58C1电击感受态的制备和转化 | 第31-32页 |
·拟南芥的转化与筛选 | 第32-33页 |
·GUS报告基因的检测 | 第33页 |
·RopGEF4基因克隆和与GFP瞬时表达载体的连接 | 第33-34页 |
·质粒的大量提取和纯化 | 第34-35页 |
·拟南芥叶肉原生质体的制备和PEG转化 | 第35-36页 |
·激光共聚焦观察 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-45页 |
·qRT-PCR分析RopGEF4和RopGEF8基因表达模式 | 第36-37页 |
·RopGEF4和RopGEF8组织表达分析 | 第37-42页 |
·35S启动子驱动的拟南芥RopGEF4基因在原生质体中的亚细胞定位 | 第42-44页 |
·拟南芥RopGEF4自身启动子驱动的YFP在原生质体中的亚细胞定位 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
第三章 拟南芥RopGEF4/8响应外源植物激素ABA的表型分析 | 第47-57页 |
摘要 | 第47页 |
0 引言 | 第47-48页 |
1 材料与方法 | 第48-50页 |
·植物材料的培养 | 第48页 |
·化学试剂 | 第48页 |
·qRT-PCR和GUS染色法分析ABA对RopGEF4和RopGEF8基因表达变化的影响 | 第48-49页 |
·T-DNA插入突变体的鉴定 | 第49页 |
·气孔开度的测定 | 第49页 |
·种子萌发率测定 | 第49-50页 |
·子叶发生情况观察 | 第50页 |
·主根长的测量 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-55页 |
·qRT-PCR和GUS染色法分析ABA对RopGEF4和RopGEF8基因表达变化的影响 | 第50-52页 |
·拟南芥ropgefs纯和突变体的鉴定 | 第52-53页 |
·ABA和PA对突变体材料气孔开度的影响 | 第53页 |
·ABA对拟南芥ropgef4和ropgef8突变体种子萌发率的影响 | 第53-54页 |
·ABA对拟南芥ropgef4和ropgef8突变体子叶形成的影响 | 第54-55页 |
·ABA对拟南芥ropgef4和ropgee8突变体主根伸长的影响 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
全文结论 | 第57-59页 |
不足之处 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69页 |