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拟南芥鸟苷酸交换因子RopGEF4/8基因表达及其响应ABA信号的初步分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
符号及縮略语第10-11页
第一章 文献综述第11-23页
 1 RopGEFs的结构和功能第11-18页
   ·RopGEFs的发现第11-13页
   ·RopGEFs的结构第13-14页
   ·RopGEFs调节ROP的机制第14-16页
   ·RopGEFs的生理功能第16-18页
 2 脱落酸(ABA)的生理功能和信号转导机制进展第18-23页
   ·ABA的生理作用第18-19页
   ·ABA信号转导机制研究进展第19-23页
第二章 拟南芥中RopGEF4/8基因表达模式的分析第23-47页
 摘要第23页
 0 引言第23-24页
 1 材料与方法第24-36页
   ·植物材料和培养第24页
   ·质粒和菌株第24页
   ·实验试剂和药品第24-25页
   ·Trizol法提取拟南芥各组织总RNA第25-26页
   ·荧光定量qRT-PCR第26-27页
   ·拟南芥叶片DNA小量制备方法第27-28页
   ·RopGEF4和RopGEF8启动子的克隆第28-29页
   ·RopGEF4和RopGEF8启动子产物回收和T载体连接第29页
   ·大肠杆菌DH5a热激感受态细胞的制备及转化第29-30页
   ·大肠杆菌中质粒DNA的小量提取(碱裂解法)第30页
   ·菌落PCR、酶切鉴定阳性菌株并测序保菌第30-31页
   ·农杆菌C58C1电击感受态的制备和转化第31-32页
   ·拟南芥的转化与筛选第32-33页
   ·GUS报告基因的检测第33页
   ·RopGEF4基因克隆和与GFP瞬时表达载体的连接第33-34页
   ·质粒的大量提取和纯化第34-35页
   ·拟南芥叶肉原生质体的制备和PEG转化第35-36页
   ·激光共聚焦观察第36页
 2 结果与分析第36-45页
   ·qRT-PCR分析RopGEF4和RopGEF8基因表达模式第36-37页
   ·RopGEF4和RopGEF8组织表达分析第37-42页
   ·35S启动子驱动的拟南芥RopGEF4基因在原生质体中的亚细胞定位第42-44页
   ·拟南芥RopGEF4自身启动子驱动的YFP在原生质体中的亚细胞定位第44-45页
 3 讨论第45-47页
第三章 拟南芥RopGEF4/8响应外源植物激素ABA的表型分析第47-57页
 摘要第47页
 0 引言第47-48页
 1 材料与方法第48-50页
   ·植物材料的培养第48页
   ·化学试剂第48页
   ·qRT-PCR和GUS染色法分析ABA对RopGEF4和RopGEF8基因表达变化的影响第48-49页
   ·T-DNA插入突变体的鉴定第49页
   ·气孔开度的测定第49页
   ·种子萌发率测定第49-50页
   ·子叶发生情况观察第50页
   ·主根长的测量第50页
 2 结果与分析第50-55页
   ·qRT-PCR和GUS染色法分析ABA对RopGEF4和RopGEF8基因表达变化的影响第50-52页
   ·拟南芥ropgefs纯和突变体的鉴定第52-53页
   ·ABA和PA对突变体材料气孔开度的影响第53页
   ·ABA对拟南芥ropgef4和ropgef8突变体种子萌发率的影响第53-54页
   ·ABA对拟南芥ropgef4和ropgef8突变体子叶形成的影响第54-55页
   ·ABA对拟南芥ropgef4和ropgee8突变体主根伸长的影响第55页
 3 讨论第55-57页
全文结论第57-59页
不足之处第59-61页
参考文献第61-69页
致谢第69页

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