摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-32页 |
第一章 猪圆环病毒及类猪圆环病毒的研究进展 | 第10-22页 |
1 引言 | 第10-11页 |
2 病原学 | 第11-12页 |
3 流行病学 | 第12-13页 |
4 临床症状与病理变化 | 第13页 |
5 致病机理 | 第13-16页 |
6 实验室诊断方法 | 第16-22页 |
·电镜法 | 第16页 |
·免疫组织化学方法(IHC) | 第16-17页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第17-18页 |
·免疫胶体金技术 | 第18页 |
·间接免疫荧光试验(IFA) | 第18-19页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第19-21页 |
·原位杂交技术(ISH) | 第21页 |
·基因芯片检测技术 | 第21-22页 |
第二章 实验动物模型的相关研究 | 第22-25页 |
1 猪感染模型 | 第22-23页 |
2 小鼠感染模型 | 第23-25页 |
参考文献 | 第25-32页 |
第二部分 试验研究 | 第32-68页 |
第一章 类猪圆环病毒2型因子P1 TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第32-46页 |
摘要 | 第32页 |
1 材料和方法 | 第32-35页 |
·病毒 | 第32页 |
·TaqMan探针与引物 | 第32-33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·类猪圆环病毒2型因子P1 DNA模板的制备 | 第33页 |
·实时荧光定量PCR条件的优化 | 第33-34页 |
·实时荧光定量标准曲线的制定 | 第34-35页 |
·荧光定量特异性、敏感性及重复性检测 | 第35页 |
·实时荧光定量PCR检测临床样品 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-41页 |
·P1目的基因片段的扩增与重组质粒的构建 | 第35页 |
·实时荧光定量PCR条件的优化 | 第35-38页 |
·特异性分析 | 第38页 |
·敏感性分析 | 第38-39页 |
·重复性检测 | 第39-40页 |
·P1阳性样品的检测 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-44页 |
ABSTRACT | 第44-46页 |
第二章 类猪圆环病毒2型因子P1感染Balb/c小鼠模型的研究 | 第46-68页 |
摘要 | 第46页 |
1 材料和方法 | 第46-51页 |
·病毒 | 第46页 |
·实验动物 | 第46-47页 |
·主要的试剂 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
·分组与攻毒 | 第47页 |
·临床症状观察 | 第47-48页 |
·血常规检测 | 第48页 |
·ELISA | 第48页 |
·动物组织中P1 DNA的提取 | 第48页 |
·实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
·免疫组化 | 第49-51页 |
2 结果与分析 | 第51-62页 |
·临床症状观察 | 第51-54页 |
·小鼠血常规检测结果 | 第54-56页 |
·血清学检测结果 | 第56-57页 |
·实时荧光定量PCR | 第57-60页 |
·免疫组化法检测P1在小鼠体内的分布 | 第60-62页 |
3 讨论 | 第62-66页 |
参考文献 | 第66-67页 |
ABSTRACT | 第67-68页 |
全文总结 | 第68-70页 |
附录 常用试剂配制 | 第70-73页 |
致谢 | 第73页 |