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番茄高频转化体系的建立及RNAi载体构建的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第1章 绪论第9-17页
   ·课题背景第9-10页
     ·番茄的研究背景第9页
     ·番茄的抗病性研究第9-10页
   ·番茄黄化曲叶病毒病的研究进展第10-13页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的发生分布第10页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的发病症状第10页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的病原第10-11页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的传播途径第11-12页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的防治第12页
     ·番茄抗番茄黄化曲叶病毒病的育种方法第12-13页
   ·RNAi 技术研究进展第13-15页
     ·RNAi 的研究背景第13页
     ·RNAi 的作用机制第13-14页
     ·RNAi 在植物中的应用第14-15页
   ·本研究的目的与意义第15-17页
第2章 TYLCV 基因保守序列的克隆及 RNAi 载体构建第17-31页
   ·材料与试剂第17-19页
     ·供试材料第17页
     ·培养基及溶液的配制第17页
     ·生化试剂及仪器设备第17-19页
   ·实验内容与方法第19-25页
     ·番茄(感病)基因组 DNA 的提取第19-20页
     ·TYLCV 基因目标序列的选择第20页
     ·PCR 引物的设计第20页
     ·TYLCV 基因保守序列的克隆第20-24页
     ·RNAi 载体正向片段的连接及鉴定第24-25页
     ·RNAi 载体反向片段的连接及鉴定第25页
   ·实验结果第25-29页
     ·番茄基因组 DNA 的提取第25-26页
     ·转化片段的选定及克隆第26-28页
     ·RNAi 载体 PFGC5941-V1B-V1A 的构建第28-29页
   ·讨论第29页
   ·本章小结第29-31页
第3章 RNAi 载体在番茄植株中的瞬时表达第31-39页
   ·材料与试剂第31页
     ·供试材料第31页
     ·培养基及溶液的配制第31页
   ·实验内容与方法第31-34页
     ·番茄苗的栽培第31页
     ·农杆菌的转化和鉴定第31-32页
     ·农杆菌的准备及注射第32-33页
     ·转化片段的检测第33页
     ·番茄植株的抗病性鉴定第33-34页
   ·实验结果第34-36页
     ·农杆菌中质粒的鉴定第34-35页
     ·转化片段的检测第35页
     ·番茄植株发病情况的观察第35-36页
     ·TYLCV 病毒 DNA 的检测第36页
   ·讨论第36-37页
   ·本章小结第37-39页
第4章 番茄高效再生体系的建立第39-49页
   ·材料与培养基第39-40页
     ·供试材料第39页
     ·MS 培养基的配制第39-40页
   ·实验内容与方法第40-42页
     ·番茄再生体系的建立第40-41页
     ·番茄转化方法的优化第41-42页
     ·转基因番茄阳性苗的鉴定第42页
   ·实验结果第42-47页
     ·番茄种子灭菌条件的摸索第42页
     ·不同激素配比对番茄愈伤组织和不定芽诱导的影响第42-43页
     ·不同激素浓度对番茄外植体生根的影响第43-44页
     ·草丁膦使用浓度的筛选第44-45页
     ·不同处理对番茄转化效率的影响第45-46页
     ·转基因阳性苗的筛选第46-47页
   ·讨论第47-48页
     ·不同外植体再生效率的区别第47页
     ·不同激素浓度对外植体生芽及生根的影响第47页
     ·外植体的再生周期和效率第47页
     ·番茄遗传转化体系的优化第47-48页
   ·本章小结第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-55页
攻读硕士学位期间所发表的论文第55-56页
致谢第56页

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