摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1. 苏云金芽胞杆菌 | 第10-15页 |
·苏云金芽胞杆菌的基本特征及分布 | 第10页 |
·苏云金芽胞杆菌杀虫毒素 | 第10-12页 |
·苏云金芽胞杆菌杀虫毒素的种类 | 第10-11页 |
·苏云金芽胞中杆菌杀虫基因的分类 | 第11页 |
·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因的鉴定 | 第11-12页 |
·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体Cry蛋白的结构 | 第12-14页 |
·苏云金芽胞杆菌的杀虫机理 | 第14-15页 |
2. 苏云金芽胞杆菌的应用 | 第15-16页 |
3. 地下害虫蛴螬的危害及防治 | 第16-17页 |
4. 苏云金芽胞杆菌cry8类基因的研究进展 | 第17-19页 |
5. 本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
第二章 菌株ST8的生物学特性研究 | 第21-33页 |
1. 材料与方法 | 第21-28页 |
·材料 | 第21-25页 |
·菌株 | 第21-22页 |
·培养基 | 第22-23页 |
·仪器设备 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·酶与生化试剂 | 第24页 |
·其他材料器材 | 第24-25页 |
·研究方法 | 第25-28页 |
·扫描电镜观察 | 第25页 |
·Bt质粒提取及质粒图谱分析 | 第25页 |
·Bt总DNA的提取 | 第25-26页 |
·生长曲线测定 | 第26页 |
·ST8鞭毛观察 | 第26页 |
·ST8菌株生理生化测定 | 第26页 |
·H-血清型鉴定 | 第26页 |
·ST8菌株SDS-PAGE分析 | 第26-27页 |
·PCR-RFLP鉴定cry基因 | 第27页 |
·琼脂糖凝胶电泳及DNA回收 | 第27页 |
·室内杀虫活性测定 | 第27-28页 |
2. 结果与分析 | 第28-31页 |
·ST8菌株杀虫晶体蛋白特性的研究 | 第28页 |
·菌株质粒分析 | 第28-29页 |
·生长曲线 | 第29页 |
·菌株鞭毛生长情况 | 第29-30页 |
·生理生化特征 | 第30页 |
·H-血清型的鉴定 | 第30页 |
·PCR-RFLP鉴定结果 | 第30-31页 |
·生物活性测定 | 第31页 |
3. 讨论 | 第31-33页 |
第三章 ST8中新型cry8类基因的克隆及工程菌的构建 | 第33-54页 |
1. 材料与方法 | 第33-38页 |
·材料 | 第33-35页 |
·菌株与质粒 | 第33-34页 |
·培养基与抗生素 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·仪器设备 | 第34-35页 |
·研究方法 | 第35-38页 |
·分子生物学操作 | 第35页 |
·阳性克隆的筛选 | 第35页 |
·E.coli质粒DNA提取 | 第35页 |
·全长基因的克隆 | 第35-36页 |
·载体构建 | 第36-37页 |
·基因的原核表达载体的构建 | 第36-37页 |
·基因的穿梭表达载体的构建 | 第37页 |
·Bt电击感受态细胞的制备与电击转化 | 第37-38页 |
·基因表达 | 第38页 |
·基因的原核表达 | 第38页 |
·基因在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株中表达 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-52页 |
·新型cry8基因全长序列的克隆与分析 | 第38-50页 |
·cry8Kb1基因序列分析 | 第38-42页 |
·cry8Pa1基因序列分析 | 第42-45页 |
·cry8Qa1基因序列分析 | 第45-48页 |
·三个基因的序列比较分析 | 第48-50页 |
·基因表达载体的构建 | 第50-51页 |
·基因在大肠杆菌中的表达 | 第51-52页 |
·新型cry8类基因工程菌的构建 | 第52页 |
·生物活性测定 | 第52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
在读期间发表的论文情况 | 第66页 |