| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| ·国内外关于灵芝蛋白及多肽的研究 | 第11页 |
| ·细胞凋亡及其特征 | 第11-12页 |
| ·细胞凋亡调控的相关因子 | 第12-15页 |
| ·B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(bcl-2)与细胞凋亡 | 第12页 |
| ·Survivin与细胞凋亡 | 第12-13页 |
| ·p53基因与细胞凋亡 | 第13页 |
| ·半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)与细胞凋亡 | 第13-14页 |
| ·Ca~(2+)与细胞凋亡 | 第14-15页 |
| ·中药与肝癌细胞凋亡 | 第15-16页 |
| ·多肽与细胞凋亡 | 第16页 |
| ·研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 第二章 灵芝肽诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的研究 | 第18-52页 |
| ·材料与方法 | 第18-28页 |
| ·材料 | 第18-21页 |
| ·原料 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第19-21页 |
| ·方法 | 第21-28页 |
| ·灵芝肽的提取、分离及纯化 | 第21-22页 |
| ·肝癌细胞的复苏 | 第22页 |
| ·肝癌细胞的培养及传代 | 第22-23页 |
| ·四氮甲唑蓝(MTT)比色法细胞增殖抑制率的测定 | 第23页 |
| ·普通光学显微镜的染色观察(姬姆萨) | 第23页 |
| ·荧光显微镜形态学的观察(Hoechst 33258) | 第23-24页 |
| ·透射电镜观察细胞超微结构 | 第24页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染检测HepG2细胞的凋亡率 | 第24页 |
| ·PI单染检测HepG2细胞的的周期分布 | 第24-25页 |
| ·激光共聚焦测定细胞浆中钙离子浓度 | 第25页 |
| ·Caspase-3活性的检测 | 第25页 |
| ·免疫蛋白印迹检测p53、Bcl-2和Survivin蛋白的表达 | 第25-28页 |
| ·统计学处理 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-42页 |
| ·GLP对肝癌细胞HepG2生长的影响(MTT法) | 第28-29页 |
| ·细胞形态学变化 | 第29-33页 |
| ·普通显微镜染色观察结果(姬姆萨) | 第30页 |
| ·荧光显微镜染色观察结果(Hoechst 33258) | 第30-32页 |
| ·透射电镜观察结果 | 第32-33页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染测定细胞凋亡率 | 第33-35页 |
| ·碘化丙啶单染检测HepG2细胞的周期分布 | 第35-37页 |
| ·激光共聚焦观察细胞钙离子浓度结果 | 第37-38页 |
| ·免疫蛋白印迹检测p53、bcl-2和Survivin蛋白的表达结果 | 第38-41页 |
| ·半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-3)活性的测定结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-51页 |
| ·GLP对HepG2细胞增殖的影响 | 第42-43页 |
| ·GLP对HepG2细胞形态学观察的影响 | 第43-44页 |
| ·GLP对HepG2细胞凋亡率和细胞周期的影响 | 第44-46页 |
| ·关于GLP诱导HepG2细胞凋亡机制的探讨 | 第46-51页 |
| ·结论 | 第51-52页 |
| 第三章 灵芝肽结构的初步研究 | 第52-62页 |
| ·材料与方法 | 第53页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第53页 |
| ·方法 | 第53页 |
| ·液相色谱条件 | 第53页 |
| ·质谱测定条件 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录(硕士期间发表的论文) | 第73页 |
