| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-18页 |
| ·研究背景 | 第10-11页 |
| ·研究进展 | 第11-16页 |
| ·KPC研究进展 | 第11-14页 |
| ·NDM-1研究进展 | 第14-16页 |
| ·主要研究内容 | 第16-18页 |
| 第2章 实时荧光PCR检测细菌耐药基因bla_(KPC)技术研究 | 第18-54页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·参考品的来源 | 第18页 |
| ·临床样本来源 | 第18-19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-23页 |
| ·临床样本的处理 | 第19-20页 |
| ·样品处理液的配制 | 第20页 |
| ·两种核酸提取的方法 | 第20页 |
| ·基因工程菌的构建 | 第20-21页 |
| ·细菌的定量 | 第21页 |
| ·含dUTP模板的制备 | 第21页 |
| ·质控品的制备 | 第21页 |
| ·引物和探针的设计 | 第21-22页 |
| ·实时荧光PCR检测 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-52页 |
| ·引物和探针的筛选 | 第23-25页 |
| ·样本的制备 | 第25-27页 |
| ·核酸提取方法和临床样本类型的确定 | 第27-30页 |
| ·PCR反应体系和反应条件的建立和优化 | 第30-41页 |
| ·适用机型 | 第41-42页 |
| ·试剂盒性能评估 | 第42-46页 |
| ·试剂盒稳定性研究 | 第46-49页 |
| ·临床样本的PCR检测 | 第49-52页 |
| ·本章小结 | 第52-54页 |
| 第3章 实时荧光PCR检测细菌耐药基因bla_(NDM-1)技术研究 | 第54-78页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·参考品的来源 | 第54页 |
| ·临床样本来源 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·临床样本的处理 | 第54页 |
| ·样品处理液的配制 | 第54页 |
| ·两种核酸提取的方法 | 第54-55页 |
| ·基因工程菌的构建 | 第55页 |
| ·细菌的定量 | 第55页 |
| ·含dUTP模板的制备 | 第55页 |
| ·质控品的制备 | 第55页 |
| ·引物和探针的设计 | 第55页 |
| ·实时荧光PCR检测 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-77页 |
| ·NDM-1引物和探针的筛选 | 第56-57页 |
| ·样本的制备 | 第57页 |
| ·核酸提取方法的确定 | 第57-59页 |
| ·PCR反应体系和反应条件的建立和优化 | 第59-67页 |
| ·适用机型检测结果比较 | 第67-68页 |
| ·临床样本的PCR检测 | 第68-70页 |
| ·试剂盒性能评估 | 第70-74页 |
| ·试剂盒稳定性研究 | 第74-77页 |
| ·本章小结 | 第77-78页 |
| 结论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 附录 | 第84-96页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |