| 摘要 | 第1-19页 |
| Abstract | 第19-26页 |
| 符号说明 | 第26-27页 |
| 第1章 绪论 | 第27-68页 |
| ·核酸和蛋白质检测的意义 | 第27页 |
| ·核酸和蛋白质的主要检测方法 | 第27-28页 |
| ·核酸分子体外扩增技术及其在生物大分子检测中的应用 | 第28-31页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第28-29页 |
| ·链替代扩增技术(SDA) | 第29页 |
| ·核酸依赖的扩增技术(NASBA) | 第29-31页 |
| ·生物分子信号放大检测技术及其在生物分析检测中的应用 | 第31-47页 |
| ·基于酶联催化反应的信号放大检测 | 第31-33页 |
| ·基于滚环扩增(RCA)的信号放大检测 | 第33-36页 |
| ·基于切刻内切酶介导的链置换聚合酶反应信号放大检测 | 第36页 |
| ·基于核酸酶切反应的信号放大检测 | 第36-38页 |
| ·基于脱氧核酶(DNAzyme)催化的信号放大检测 | 第38-40页 |
| ·基于多重标记和纳米颗粒的信号放大检测 | 第40-46页 |
| ·基于荧光DNA纳米标签的信号放大检测 | 第46-47页 |
| ·本论文拟开展的工作 | 第47-50页 |
| ·参考文献 | 第50-68页 |
| 第二章 单球体积放大法计数单个磁球定量检测单个生物大分子 | 第68-97页 |
| ·引言 | 第68-70页 |
| ·实验部分 | 第70-72页 |
| ·仪器 | 第70页 |
| ·材料与试剂 | 第70-72页 |
| ·实验步骤 | 第72-76页 |
| ·高压灭菌 | 第72-73页 |
| ·保湿盒的制作 | 第73页 |
| ·盖玻片的预处理和硅烷化 | 第73页 |
| ·微池的制作 | 第73-74页 |
| ·磁球的清洗 | 第74页 |
| ·DNA的杂交 | 第74页 |
| ·免疫反应过程 | 第74-75页 |
| ·落射荧光显微术 | 第75-76页 |
| ·结果与讨论 | 第76-92页 |
| ·单链DNA杂交为双链DNA的最佳时间 | 第76-77页 |
| ·荧光DNA纳米tag的组装 | 第77-78页 |
| ·SA-MNBs的多重标记扩增 | 第78-79页 |
| ·人IgG抗原固定在硅烷化的盖玻片上的最佳时间的选择 | 第79-80页 |
| ·BSA封闭液的最佳封闭时间 | 第80-81页 |
| ·生物素化鼠抗人IgG抗体与抗原结合的最佳浓度的选择 | 第81-82页 |
| ·缓冲液最佳清洗次数的选择 | 第82-83页 |
| ·磁分离去除未结合的SA-MNBs降低背景信号 | 第83-84页 |
| ·荧光成像分析 | 第84-86页 |
| ·低浓度下一个靶目标分子结合一个磁纳米颗粒的验证 | 第86-87页 |
| ·检测抗原人IgG的线性范围及检测限 | 第87-90页 |
| ·该免疫方法的特异性 | 第90-91页 |
| ·高浓度下检测抗原人IgG的线性范围 | 第91-92页 |
| ·结论 | 第92-93页 |
| ·参考文献 | 第93-97页 |
| 第三章 多重标记结合RCA技术构建免疫分析新方法用于蛋白质的超灵敏定量检测 | 第97-114页 |
| ·引言 | 第97-100页 |
| ·实验部分 | 第100-102页 |
| ·仪器 | 第100页 |
| ·材料与试剂 | 第100-102页 |
| ·实验步骤 | 第102-104页 |
| ·高压灭菌 | 第102页 |
| ·保湿盒的制作 | 第102页 |
| ·盖玻片的预处理和硅烷化 | 第102页 |
| ·微池的制作 | 第102页 |
| ·DNA模版的环化 | 第102页 |
| ·基底的制备和抗原的包被 | 第102页 |
| ·封闭 | 第102-103页 |
| ·免疫反应 | 第103页 |
| ·RCA反应和级联的荧光DNA纳米标签的组装 | 第103页 |
| ·荧光成像系统 | 第103-104页 |
| ·结果与讨论 | 第104-110页 |
| ·RCA反应的表征 | 第104-105页 |
| ·SA浓度的影响和RCA反应信号扩增的时间依赖性 | 第105-106页 |
| ·基于RCA组装的荧光DNA纳米标签的信号放大性能策略表征 | 第106-107页 |
| ·基于RCA的组装荧光DNA纳米标签作为标记物的分析性能表征 | 第107-110页 |
| ·结论 | 第110-111页 |
| ·参考文献 | 第111-114页 |
| 第四章 磁性纳米颗粒结合RCA技术构建免疫分析新方法用于蛋白质定量检测 | 第114-132页 |
| ·引言 | 第114-116页 |
| ·实验部分 | 第116-118页 |
| ·材料与试剂 | 第116-118页 |
| ·仪器 | 第118页 |
| ·实验步骤 | 第118-121页 |
| ·高压灭菌 | 第118页 |
| ·保湿盒的制作 | 第118页 |
| ·盖玻片的预处理和硅烷化 | 第118页 |
| ·微池的制作 | 第118-119页 |
| ·磁纳米颗粒免疫检测探针的制备 | 第119页 |
| ·基底的制备和抗原的包被 | 第119页 |
| ·封闭 | 第119-120页 |
| ·p-DNA-c-DNA-MNBs-Ab检测探针的免疫反应 | 第120页 |
| ·p-DNA从基底MNB上释放和RCA反应 | 第120页 |
| ·光谱测量 | 第120-121页 |
| ·结果与讨论 | 第121-128页 |
| ·免疫反应和引物p-DNA从基底释放 | 第121页 |
| ·p-DNA-c-DNA-MNBs-Ab多重标记扩增 | 第121-122页 |
| ·RCA反应的表征 | 第122-124页 |
| ·RCA反应信号扩增的时间依赖性 | 第124页 |
| ·基于磁纳米颗粒富集引物DNA-RCA免疫分析方法定量检测蛋白目标物 | 第124-128页 |
| ·结论 | 第128-129页 |
| ·参考文献 | 第129-132页 |
| 第五章 基于核酸外切酶辅助的免分离和切刻酶介导的循环放大荧光法检测凝血酶 | 第132-146页 |
| ·引言 | 第132-134页 |
| ·实验部分 | 第134-136页 |
| ·仪器 | 第134页 |
| ·材料与试剂 | 第134-136页 |
| ·实验步骤 | 第136-137页 |
| ·高压灭菌 | 第136页 |
| ·凝血酶和适体探针孵育反应 | 第136页 |
| ·核酸外切酶Ⅰ降解 | 第136页 |
| ·检测杂交连接 | 第136页 |
| ·切割内切酶Nt.BbvCI反应以及循环放大 | 第136页 |
| ·荧光强度测定和标准曲线的建立 | 第136-137页 |
| ·结果与讨论 | 第137-143页 |
| ·适体探针浓度的优化 | 第137页 |
| ·外切酶浓度的优化 | 第137-138页 |
| ·分子灯塔MB浓度的优化 | 第138-140页 |
| ·核酸内切酶Nt.BbvCI放大倍数 | 第140页 |
| ·蛋白质检测的性能分析 | 第140-141页 |
| ·检测特异性 | 第141-142页 |
| ·检测人血清中的人凝血酶 | 第142-143页 |
| ·结论 | 第143-144页 |
| ·参考文献 | 第144-146页 |
| 第六章 基于核酸外切酶辅助循环放大和RCA辅助G四倍体的信号放大策略检测DNA | 第146-157页 |
| ·引言 | 第146-148页 |
| ·实验部分 | 第148-150页 |
| ·仪器 | 第148页 |
| ·材料与试剂 | 第148-150页 |
| ·实验步骤 | 第150-151页 |
| ·磁球的清洗 | 第150页 |
| ·磁球上连接G4DNA/p DNA结合物 | 第150页 |
| ·酶切循环反应 | 第150页 |
| ·RCA扩增反应 | 第150-151页 |
| ·光谱测量 | 第151页 |
| ·结果与讨论 | 第151-153页 |
| ·第一种方法的原理设计 | 第151-152页 |
| ·MNB-Exo-RCA方法策略验证 | 第152页 |
| ·第二种方法的原理设计 | 第152-153页 |
| ·理论模拟 | 第153页 |
| ·结论 | 第153-154页 |
| ·参考文献 | 第154-157页 |
| 结论 | 第157-160页 |
| 致谢 | 第160-161页 |
| 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第161-162页 |
| 附件 | 第162-179页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第179页 |
