LDR结合Taqman探针检测KRAS基因的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| ·药物基因组学概述 | 第11-12页 |
| ·几种常见的基因分型方法比较 | 第12-15页 |
| ·Kras基因状态与临床个体化用药的关系 | 第15-19页 |
| ·结直肠癌与EGFR的关系 | 第16页 |
| ·结直肠癌与西妥昔单抗、帕尼单抗的关系 | 第16-18页 |
| ·结直肠癌与KRAS基因突变的关系 | 第18-19页 |
| ·荧光实时定量的背景知识 | 第19-20页 |
| ·论文的意义 | 第20-22页 |
| 第二章 KRAS阳性克隆的建立 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要溶液 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·实验准备工作 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-25页 |
| ·克隆方法概述 | 第24-25页 |
| ·实验分析 | 第25-27页 |
| 第三章 特异性探针的优化及其灵敏度实验 | 第27-40页 |
| ·实验原理及方法建立 | 第27-29页 |
| ·LDR检测原理 | 第27-28页 |
| ·Taqman探针检测原理 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·实验试剂 | 第29页 |
| ·实验仪器 | 第29页 |
| ·LDR结合Taqman探针实验方法的建立 | 第29-32页 |
| ·引物探针的溶解及保存 | 第29-31页 |
| ·实验过程 | 第31-32页 |
| ·特异探针实验条件的优化 | 第32-36页 |
| ·模板用量的优化 | 第32-33页 |
| ·退火温度的优化 | 第33-35页 |
| ·引物(P3、P4)用量优化 | 第35-36页 |
| ·特异性探针的灵敏度实验 | 第36-38页 |
| ·混合模板的制备 | 第37页 |
| ·实验结果 | 第37-38页 |
| ·实验总结 | 第38-40页 |
| 第四章 公用探针的优化及其灵敏度实验 | 第40-52页 |
| ·实验原理 | 第40-41页 |
| ·引物探针的设计和保存 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·实验试剂 | 第41页 |
| ·实验仪器 | 第41-42页 |
| ·实验过程 | 第42页 |
| ·公用探针的优化 | 第42-48页 |
| ·模板用量优化 | 第43-44页 |
| ·退火温度优化 | 第44-46页 |
| ·引物用量(P3P4)优化 | 第46-48页 |
| ·公用探针灵敏度实验 | 第48-50页 |
| ·混合模板的制备 | 第48页 |
| ·实验过程 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-50页 |
| ·结果总结 | 第50-52页 |
| 第五章 颈环引物的设计及实验进展 | 第52-57页 |
| ·颈环引物的设计 | 第52页 |
| ·实验过程 | 第52-53页 |
| ·实验结果 | 第53页 |
| ·连接温度的优化 | 第53-56页 |
| ·结果分析 | 第56-57页 |
| 全文小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
